国家重点实验室开放基金(08Y01ESPCT)
- 作品数：1 被引量：10H指数：1
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- 免疫磁珠分离与实时定量PCR技术联合检测水中轮状病毒的研究被引量：10
- 2009年
- 建立了一种免疫磁珠分离技术联合实时定量PCR快速定量检测水中轮状病毒的方法.通过制备能够分离水中轮状病毒的特异免疫磁珠,优化分离条件,建立了免疫磁珠分离前处理方法,并与逆转录、实时定量PCR结合,成功用于水中轮状病毒的检测.研究发现,在1 mL水样中加入10μL轮状病毒免疫磁珠、0.25μL Tween 20、孵育2 h可达到较好的分离效果;免疫磁珠可用于3%牛肉浸膏等常用病毒洗脱液中的轮状病毒的分离,表明该分离技术能与已有的病毒浓集方法良好地整合.免疫磁珠分离技术与实时定量PCR联合用于检测水中轮状病毒,全过程需时约5 h,检测限为1×10^4copies/mL（相当于3-4 PFU/mL）,检测结果与细胞病变试验检测结果有良好的线性相关关系（R^2=0.981 6）,表明其能较好地表征水样的病毒感染风险.对接种已知量的轮状病毒的污水处理厂二级出水、再生水、地表水、自来水等水样的实验表明,该法可用于各种水样中轮状病毒的检测.
- 杨万何苗李丹施汉昌刘丽
- 关键词：实时定量PCR轮状病毒环境水样
