国家自然科学基金(30470780)
- 作品数：9 被引量：31H指数：3
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- 缺氧诱导因子(HIF-1α)对基质金属蛋白酶-2在肝星状细胞中表达的调控作用
- 目的了解激活的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)细胞株 HSC-T6中 HIF-1α在基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)基因表达调控...
- 赵迪陈平圣范任华张万东
- 关键词：缺氧诱导因子肝星状细胞基质金属蛋白酶
- 文献传递
- 转染金属硫蛋白基因1A促进大鼠肝星状细胞增殖
- 2009年
- 目的:观察金属硫蛋白基因1A(MT1A)对肝星状细胞(HSCs)增殖的影响。方法:构建MT1A基因真核表达质粒,转染HSCs。通过RT-PCR、Western blotting法检测导入的质粒在HSCs中的表达,采用AgNOR染色法及Ki-67抗原免疫细胞化学染色检测HSCs增殖指数。结果:MT1A基因在HSCs中过表达;转染MT1A基因组每个细胞AgNOR颗粒数(5.43±0.45)较pcDNA3.1组(3.94±0.39)及非转染组(4.14±0.34)均高(P<0.05);免疫细胞化学染色结果显示,转染MT1A基因组细胞Ki-67染色呈阳性,而对照组为阴性。结论:外源MT1A基因在HSCs中过表达可促进其增殖。
- 王科陈平圣
- 关键词：肝星状细胞金属硫蛋白增殖
- 化学缺氧对肝星状细胞基质金属蛋白酶-2表达及活性的影响被引量：5
- 2007年
- 目的探讨化学缺氧对大鼠HSC MMP-2的表达和活性的影响及其调节机制。方法用不同浓度的氯化钴（CoCl2,0、50、100、200μmol/L）造成大鼠HSC化学缺氧,RT-PCR、酶图法分别检测MMP-2 mRNA表达及其酶活性;Western blot检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达;用荧光素酶报告基因分析技术测HIF-1α对MMP-2基因的激活作用。结果随CoCl2浓度从0μmol/L依次递增到200μmol/L,MMP-2 mRNA表达的量（用吸光度值表示）从0.53±0.12依次上调到1.57±0.11,4组间差异有统计学意义（F=34.21,P〈0.01）,其活性下降幅度（用吸光度值表示）从84.49±5.38逐渐下降至53.70±3.42,4组间差异有统计学意义（F=29.54,P〈0.01）,HIF-1α表达量依次增加;核蛋白提取物与MMP-2基因探针（含缺氧反应元件）共浴后,电泳迁移条带产生延迟现象,竞争性序列能部分拮抗其结合。结论化学缺氧能使HSC MMP- 2 mRNA表达上调,酶活性下降。HIF-1α可能参与了缺氧条件下MMP-2的表达调节。
- 范任华陈平圣赵迪张万东
- 关键词：肝纤维化缺氧基质金属蛋白酶-2肝星状细胞缺氧诱导因子-1Α
- 季德胜蛇药片对大鼠急性肺损伤的保护作用被引量：3
- 2006年
- 目的研究季德胜蛇药片对细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠急性肺损伤的保护作用。方法50只雄性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、地塞米松阳性对照组、LPS模型组及低、中、高三种不同剂量蛇药组。分别用地塞米松和三种不同剂量的蛇药在LPS诱导ALI模型之前预处理大鼠。检测大鼠的肺系数,光镜观察肺组织损伤程度,酶谱法测肺组织匀浆液和支气管肺泡灌洗液上清中MMP2、MMP9酶活力及免疫组织化学方法检测肺组织MMP2、MMP9蛋白表达情况。结果与模型组比较,阳性对照组及蛇药组肺系数均降低(P<0.05),且高剂量组明显低于阳性对照组(P<0.01)。蛇药组肺组织损伤程度、MMP9酶活力均随剂量的增加而减轻或降低,MMP2酶活力亦有不同程度的下降;高剂量组MMP2、MMP9蛋白表达减弱;结论季德胜蛇药片对LPS诱导大鼠急性肺损伤有一定保护作用,其作用机制可能与抑制MMP2、MMP9表达及活性有关。
- 陶冬英陈平圣刘东风
- 关键词：季德胜蛇药片基质金属蛋白酶急性肺损伤细菌脂多糖
- 缺氧诱导因子-1α及其下游分子在大鼠肝纤维化组织中的表达被引量：14
- 2005年
- 目的观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其下游分子在大鼠肝纤维化组织中的表达情况,分析HIF-1α及其下游分子与肝纤维化程度的关系。方法用CCl4诱发大鼠肝纤维化模型,建模结束后(实验8周末)根据纤维化程度将模型组分为S2、S3、S4亚组,然后分别应用免疫组织化学和逆转录酶PCR方法检测HIF-1α、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白和HIF-1α、MMP-2 mRNA在大鼠肝纤维化组织中的表达变化。结果与对照组(S0组)比较,模型组(S2、S3、S4亚组)HIF-1α、MMP-2、VEGF蛋白和HIF-1α、MMP-2 mRNA表达均明显增强(P<0.01);HIF-1α、MMP-2、VEGF的表达与肝纤维化程度呈正相关(r值分别为0.923、0.848、0.878,均P<0.001);MMP-2、VEGF的表达与HIF-1α也呈正相关(r值分别为0.862、0.993、0.892,均P<0.001)。结论HIF-1α可能通过调节MMP-2及VEGF的表达促进了肝纤维化的发展。
- 冯珍陈平圣张爱凤刘东风张晓明王莉
- 关键词：肝纤维化缺氧诱导因子-1Α基质金属蛋白酶-2血管内皮生长因子
- CCl_4肝纤维化过程中肝组织金属硫蛋白与肝星状细胞MMP-2表达及活性之间相关性研究被引量：5
- 2009年
- 目的:研究金属硫蛋白(MT)在体内及体外与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达、活性之间的相关性。方法:昆明种雄性成年小鼠50只,其中实验鼠40只,对照鼠10只,用CCl4诱导小鼠肝纤维化模型。向肝星状细胞(HSCs)条件培养基(含有MMP-2)中加不同浓度MT,使之与MMP-2酶学共浴,检测MMP-2活性。制作小鼠肝组织芯片,天狼猩红染色判断肝纤维化程度。免疫组化法测肝组织MMP-2、MT蛋白表达,酶图法测鼠肝组织匀浆和培养基中MMP-2活性。结果:①模型组小鼠肝组织MMP-2和MT蛋白表达水平均随纤维化进展而呈波浪式交替升高,但二者时相变化相反。②模型组小鼠肝组织MMP-2活性随实验时间的增加而逐渐升高,亦有波动。除个别时点外,酶活性与MT表达呈负相关。③肝星状细胞条件培养基与不同浓度的MT直接作用后,MMP-2活性随MT浓度增加活性逐渐降低(P<0.01)。结论:在小鼠肝纤维化发生发展过程中,肝组织MT蛋白和MMP-2蛋白表达均有上升趋势,二者间可能存在相互作用;MT蛋白和MMP-2活性呈负相关,前者对后者可能起抑制作用。
- 刘蕾蕾陈平圣刘东风
- 关键词：金属硫蛋白基质金属蛋白酶-2
- 化学缺氧影响肝星状细胞基质金属蛋白酶-2表达及其活性水平
- 目的探讨化学缺氧对大鼠肝星状细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase, MMP-2)表达、活性的影响和调节机理。方法用不同浓度的氯化钴(CoCl)(0μm,50μm,100μm, 200μ...
- 范任华陈平圣赵迪张万东
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α基质金属蛋白酶-2缺氧肝星状细胞
- 文献传递
- 利凡诺对B16黑色素瘤细胞生长及MMP-2、MMP-9表达的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:观察利凡诺对体外培养的B16黑色素瘤细胞生长状态及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,研究利凡诺的抗肿瘤转移作用。方法:用噻唑蓝(MTT)法检测利凡诺对B16黑色素瘤细胞的生长抑制率;酶联免疫吸附法检测细胞培养上清的MMP-2蛋白相对含量;免疫细胞化学染色检测MMP-2、MMP-9蛋白表达情况。结果:MTT法检测结果显示,不同浓度的利凡诺对细胞都有明显抑制并伴有时间及浓度依赖性;6.25、12.5μg.ml-1的利凡诺组在72 h与同时段对照组比有显著差异(P<0.05);利凡诺各药物组的MMP-2、MMP-9蛋白阳性表达随药物浓度的增加而减弱。结论:利凡诺可以抑制B16细胞的生长,并且具有潜在的抑制肿瘤侵袭和转移的作用。
- 王莉陈平圣冯珍
- 关键词：利凡诺基质金属蛋白酶
- 肝纤维化形成过程中RECK基因表达和MMP-2活性的相关性研究被引量：1
- 2010年
- 目的:研究肝纤维化形成过程中RECK基因的表达与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性之间的相关性。方法:SD雄性成年大鼠(25只)随机分为对照组(5只)和肝纤维化组(20只)。对照组每周2次纯花生油皮下注射,剂量为3ml·kg-1,第8周全部处死。肝纤维化组每周2次用50%CCl4油溶液皮下注射,剂量为3ml·kg-1,建立起肝纤维化模型,并分别于第1、2、4、6、8周末各处死4只动物,留取肝组织备用。天狼猩红染色判断肝纤维化程度,RT-PCR法检测RECK基因的表达情况,明胶酶谱法检测肝组织MMP-2的活性。结果:MMP-2的活性随肝纤维化的形成而逐渐升高,而RECK基因表达的变化与之相反,RECK的表达和MMP-2的活性呈负相关(P<0.05)。结论:在大鼠肝纤维化形成过程中,RECK的表达与MMP-2活性可能有密切关系,前者对后者可能起抑制作用。
- 郭珊珊陈平圣李静吴楠刘东风
- 关键词：RECK基因基质金属蛋白酶-2肝纤维化
- 肝纤维化发展及逆转过程中RECK基因表达与MMP-2活性相关性的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:了解肝纤维化发展和逆转过程中RECK基因表达与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性之间的相关性。方法:SD雄性成年大鼠随机分为对照组和肝纤维化组,用CCl4皮下注射建立肝纤维化模型。8周后,肝纤维化组随机分为肝纤维化进展组和肝纤维化自然逆转组,前者继续予CCl4注射,后者停用CCl4。采用天狼猩红染色判断肝纤维化程度,明胶酶谱法检测肝组织MMP-2的活性,RT-PCR法检测RECK基因的表达情况。结果:MMP-2的活性随肝纤维化程度的加重而逐渐升高,而肝纤维化逆转时则随时间推移MMP-2的活性逐渐下降;而RECK的变化相反,RECK表达和MMP-2的活性呈负相关(P<0.05)。结论:在大鼠肝纤维化发展和逆转过程中,RECK表达与MMP-2活性可能有密切关系,前者对后者可能起抑制作用。
- 郭珊珊吴楠李静刘东风陈平圣
- 关键词：RECK基因肝纤维化基质金属蛋白酶-2
