国家自然科学基金(30470785)
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 相关作者：张军程妍刘冬龚均付荣国更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第二附属医院西安交通大学包头医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 慢性肾功能不全大鼠下丘脑、胃肠道ghrelin及其受体表达变化被引量：10
- 2011年
- 目的观察慢性肾功能不全(CRF)大鼠下丘脑、胃底和十二指肠组织脑肠肽ghrelin及其生长激素促分泌素受体(GHS-R)在蛋白和mRNA水平上的表达变化。方法 SD大鼠随机分为假手术组和CRF组,其中采用5/6肾切除制作CRF大鼠模型,造模成功后采用免疫组织化学法和实时定量-PCR法检测两组大鼠下丘脑、胃底和十二指肠组织ghrelin基因及其受体GHS-R在蛋白和mRNA水平上的表达变化。结果与假手术组相比较,下丘脑、胃底、十二指肠ghrelin和GHS-R的表达变化在mRNA和蛋白水平表现分别为:下丘脑组织ghrelin和GHS-R的表达减少,其中ghrelin表达减少更明显;胃底组织ghrelin和GHS-R的表达显著增加,P<0.01;而在十二指肠组织,ghrelin的表达无明显变化,但GHS-R的产生却明显减少。结论 ghrelin及其受体GHS-R在胃肠中枢及外周组织不同部位的表达差异可能是CRF大鼠出现胃肠动力障碍的病理学基础之一。
- 付荣国袁浩铮王莉葛蘅张军宁启兰张富军
- 关键词：慢性肾功能不全下丘脑胃肠道GHRELIN
- Ghrelin对CKD大鼠十二指肠消化间期移行性复合运动和Bcl-2/Bax表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察ghrelin对慢性肾功能不全(CKD)大鼠十二指肠消化间期移行性复合运动变化和Bcl-2/Bax表达的影响。方法 SD大鼠18只,体重(180±20)g,雌雄不拘,随机分为对照组(CKD+生理盐水)、ghrelin 1组(CKD+ghrelin 10μg/kg)和ghrelin 2组(CKD+ghrelin 50μg/kg),每组6只。采用5/6肾切除法建立CKD大鼠模型。模型建立成功后分别采用多道生理记录仪和免疫组织化学方法观察十二指肠消化间期移行性复合运动变化和凋亡相关基因Bcl-2/Bax的表达。结果 CKD大鼠普遍存在十二指肠运动功能障碍;ghrelin可以明显增加CKD大鼠十二指肠消化间期移行性复合运动出现的频率,包括呈剂量依赖性增加Ⅲ相出现的时间、频率和振幅,各参数在对照组、ghrelin 1组和ghrelin 2组分别为:Ⅲ相出现的时间[(0.81±0.12)minvs.(0.84±0.13)minvs.(0.99±0.17)min];频率[(22.68±1.00)次/minvs.(23.55±1.08)次/minvs.(29.31±1.51)次/min];振幅[(249.71±13.98)μVvs.(258.49±13.12)μVvs.(318.85±20.10)μV](P<0.05)。同时ghrelin可以明显减少Bcl-2和Bax的表达,其中以Bax的减少更明显(P<0.05),Bcl-2/Bax比值增加(P<0.05)。结论 ghrelin可以明显改善CKD大鼠十二指肠的运动功能,有可能成为一种新型胃肠动力药物。
- 付荣国刘晓丹祁彩霞袁浩峥马峰周琳张军
- 关键词：慢性肾功能不全GHRELIN十二指肠消化间期移行性复合运动
- Barrett食管与贲门黏膜蛋白质组分析研究
- 2008年
- 近年来食管腺癌和贲门癌的发病率在西方国家和亚洲地区呈均上升趋势。对我国局部地区的研究也证实存在这种趋势，并以贲门癌发病率增高为主。大量研究发现，食管腺癌和贲门癌的发生与Barrett食管（BE）有直接的关系，食管末端的腺癌几乎都产生于BE，而40％以上贲门癌的发生与BE有关。
- 年媛媛张军赵丽珍程妍
- 关键词：BARRETT食管贲门黏膜蛋白质组分析食管腺癌癌发病率
- NLCM纯化的不同分化程度贲门腺癌细胞差异蛋白质组学研究
- 2015年
- 目的联合导向激光捕获显微切割技术(NLCM)及蛋白质组学技术比较分析高分化贲门腺癌细胞和低分化贲门腺癌细胞的蛋白质表达图谱差异,寻找与贲门腺癌恶性程度和预后有关的分子标志物。方法应用导向激光捕获显微切割技术分别获取高分化和低分化贲门腺癌细胞,提取蛋白质,应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离蛋白质,选定差异点,胶内酶解后,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)鉴定差异蛋白质,并用免疫组化方法验证差异蛋白的表达。结果 1NLCM分别分离纯化了高分化和低分化贲门腺癌细胞;2建立了高分化和低分化贲门腺癌细胞的蛋白质表达图谱,两组分别检测到(846±52)个和(923±84)个蛋白质点,两组的匹配率为85.4%;3对高分化和低分化的贲门腺癌蛋白质表达谱进行比较分析,鉴定出10种差异蛋白,其中6个蛋白质在低分化贲门腺癌细胞中表达上调,4个蛋白质在低分化贲门腺癌细胞中表达下调;4差异蛋白质涉及细胞间信号转导、细胞代谢、凋亡及迁移等;5进一步通过免疫组化方法验证了差异蛋白HSP27的表达与蛋白质组学研究结果一致。结论高分化和低分化贲门腺癌间存在蛋白质表达的差异,这些差异表达的蛋白质可能与贲门腺癌的恶性程度和预后有关。
- 程妍李阳刘冬宋亚华张军龚均
- 关键词：贲门腺癌激光捕获显微切割蛋白质组学分子标志物
- 导向激光捕获显微切割技术在贲门腺癌差异蛋白质组学的应用研究被引量：4
- 2014年
- 目的建立一套适用于贲门腺癌差异蛋白质组学研究的导向激光捕获显微切割技术(navigated laser capture microdissection,NLCM)方法,并探讨其可行性。方法比较染色剂和固定剂对蛋白质影响的差异,探讨不同处理条件下贲门腺癌和癌旁组织切片的镜下组织学特点,改进常规LCM,建立在染色切片指引下分离细胞的NLCM技术,并通过双向凝胶电泳分析对该技术进行评价。结果染色剂对蛋白质的影响大于700mL/L乙醇固定剂;光镜下在不染色的组织切片上,贲门腺癌细胞、肠化生细胞和正常柱状上皮细胞都有其各自的形态特异性,易于辨认;NLCM可以准确纯化贲门腺癌细胞、肠化生细胞和正常柱状细胞;LCM的苏木素染色贲门腺癌细胞(A组)、NLCM的无染色贲门腺癌细胞(B组)和未切割的新鲜贲门腺癌组织(C组)的双向电泳表达图谱非常相似。各组蛋白质点的数量之间差异无统计学意义(P>0.05)。A组碱性端蛋白等点聚焦较差,部分蛋白质点的表达量减低或消失,B组双向电泳表达图谱蛋白质点分离较好。结论 NLCM不但可以快速、准确地将贲门腺癌及其癌前病变细胞进行分离,而且有效避免了染色剂对蛋白质提取质量的影响,是一项适用于贲门腺癌蛋白质组学研究的样品制备方法。
- 程妍张军张蓉刘冬陈晓黎谢丹红龚均
- 关键词：贲门腺癌激光捕获显微切割蛋白质组双向凝胶电泳
- 导向激光捕获显微切割纯化的贲门腺癌细胞蛋白质表达图谱的建立
- 2015年
- 目的建立高分辨率的贲门腺癌细胞双向凝胶电泳图谱,为构建贲门腺癌的蛋白质表达数据库奠定基础。方法应用导向激光捕获显微切割技术(NLCM)获取贲门腺癌细胞,应用双向凝胶电泳(2-DE)技术对贲门腺癌细胞蛋白进行分析,建立贲门腺癌细胞的蛋白质表达图谱,并通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱肽质量指纹技术(MALDI-TOF MS)和数据库对部分蛋白质点进行鉴定。结果获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的NLCM分离的贲门腺癌细胞双向凝胶电泳图谱;鉴定出了72个贲门腺癌相关蛋白质;蛋白质大部分位于细胞质和线粒体,其次位于细胞膜、细胞核、细胞骨架、内质网、高尔基体、核糖体等。蛋白质涉及细胞代谢、增殖和分化、RNA转录和翻译、信号转导、氧化还原、蛋白质分子伴侣等。结论首次建立了分辨率高、重复性好的导向激光捕获显微切割分离的贲门腺癌细胞的双向凝胶电泳图谱,并鉴定出了72个贲门腺癌相关蛋白,为进一步构建贲门腺癌的蛋白质组学数据库奠定了基础。
- 程妍张军刘冬伍洁宋亚华龚均
- 关键词：贲门腺癌激光捕获显微切割蛋白质组分子标志物
