“十五”国家科技攻关计划(2004BA719A08)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 相关作者:张军郭永利罗海峰黄德党葛胜祥更多>>
- 相关机构:厦门大学更多>>
- 发文基金:福建省科技重大专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 适于HIV-1 p24抗原检测试剂的单抗制备与筛选被引量:1
- 2007年
- 目的制备抗HIV-1p24单克隆抗体(单抗,McAb),并利用双抗体夹心ELISA法建立HIV-1p24抗原检测试剂。方法以基因工程原核重组抗原HIV-1p24蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备单克隆抗体,单抗经纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA筛选检测p24蛋白的最佳配伍单抗以期建立HIV-1p24抗原检测试剂。结果成功筛选到16株稳定分泌抗HIV-1p24单抗的杂交瘤细胞株,并从中筛选出最佳单抗配伍组合“16G12+2F2b-HRP”,该组合对p24蛋白的检测灵敏度为20pg/mL,对感染性克隆pNL4-3表达的HIV病毒培养上清检测呈阳性,对100份HIV阴性人血清无非特异性反应,显示出良好的检测灵敏度和特异性。结论本研究初步成功地建立了HIV-1p24抗原的检测试剂,并为最终建立HIV第四代诊断试剂(HIV Ag/Ab Assay)奠定了坚实的基础。
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- 关键词:HIV-1单克隆抗体夹心ELISA