湖北省自然科学基金(2006ABA342)
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 相关作者：谭艳王家宁罗超郭凌郧张少峰更多>>
- 相关机构：郧阳医学院附属人民医院郧阳医学院湖北医药学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 头孢曲松钠与左氧氟沙星治疗无合并症淋病疗效的对比研究被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨和比较头孢曲松钠与左氧氟沙星在无合并症淋病患者治疗中的临床应用价值。方法:选取2012年6月至2013年12月期间我院所收治的90例无合并症淋病患者作为本次临床研究对象,采用区组化随机分组法将入选患者随机分为头孢曲松钠组和左氧氟沙星组,每组45例。分别对头孢曲松钠组和左氧氟沙星组无合并症淋病患者的临床治疗情况、不良反应发生情况、预后复发情况进行比较和分析。结果:头孢曲松钠组无合并症淋病患者临床治疗效果达到痊愈标准的比率及总有效率分别为82.22%和97.78%,均显著高于左氧氟沙星组患者的64.44%和77.78%(P<0.05);两组治疗中不良反应发生率不具有显著差异(P>0.05);头孢曲松钠组无合并症淋病患者预后复发的比率为4.44%,明显低于左氧氟沙星组患者的22.22%(P<0.05)。结论:头孢曲松钠在提高无合并症淋病患者临床疗效以及改善预后等方面均优于左氧氟沙星,可作为治疗无合并症淋病患者的推荐药物予以应用和推广。
- 吴方毅任妮丽
- 关键词：无合并症淋病头孢曲松钠左氧氟沙星
- Y染色体异常与男性不育被引量：2
- 2014年
- 育龄夫妇中不孕不育的发生率约为10%~15%,其中男性因素约占50%。男性不育的病因除了常见的精索静脉曲张、生殖道炎症外,遗传因素所引起的精子生成障碍约占男性不育的30%。不育男性出现染色体（包括常染色体和性染色体）数目和结构异常的可能性是正常男性的8至10，
- 谭艳
- 关键词：Y染色体男性不育
- 腺病毒介导的人内皮型一氧化氮合酶基因和增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达
- 目的研究腺病毒载体介导人内皮型一氧化氮合酶(human endothelial nitric oxide synthase,heNOS)和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent prot...
- 谭艳王一平王家宁张少峰郭凌郧孔霞罗超
- 关键词：勃起功能障碍增强型绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞
- 文献传递
- 细菌内同源重组法高效制备携带增强型绿色荧光蛋白与人内皮型一氧化氮合酶cDNA的重组腺病毒载体被引量：7
- 2007年
- 目的:利用细菌内同源重组法快速构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和人内皮型一氧化氮合酶(he-NOS)cDNA的重组腺病毒质粒和制备表达EGFP和heNOS的重组腺病毒。方法:质粒载体pHCMV SP1A-heNOS用EcoRⅠ酶切,回收heNOS cDNA,亚克隆至腺病毒穿梭质粒中,形成转移质粒pShuttle-heNOS-EGFP;然后用PmeI线性化后的pShuttle-heNOS-EGFP转化含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态BJ5183,使其在细菌内发生同源重组,获得阳性重组质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定后经PacⅠ酶切,转入AD 293细胞,包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP,纯化,鉴定,滴度测定。结果:heNOS cDNA成功地插入到穿梭质粒中,pShuttle-heNOS-EGFP与pAdeasy-1在BJ5183中成功发生了同源重组,得到了重组腺病毒质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组腺病毒经PCR检测表明携带有目的基因heNOS,滴度约为6.5×1015pfu/L。结论:细菌内同源重组法构建腺病毒载体具有高效、省时、省力的特点,制备出的高滴度重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP为勃起功能障碍的基因治疗奠定了基础,携带的EGFP标记基因可以直观地检测靶细胞感染和外源基因的表达情况。
- 谭艳王家宁郭凌郧孔霞唐俊明张少峰黄永章罗超
- 关键词：同源重组腺病毒绿色荧光蛋白
- 腺病毒介导的人内皮型一氧化氮合酶基因和增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达被引量：3
- 2008年
- 目的:研究腺病毒载体介导人内皮型一氧化氮合酶(human endothelial nitric oxide synthase,heNOS)和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)在体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)的表达。方法:体外培养、扩增大鼠骨髓间充质干细胞,并对培养的细胞进行成骨、成脂肪诱导分化和细胞免疫表型鉴定;用Pme I线性化后去磷酸化的pShuttle-heNOS-EGFP转化含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态BJ 5183,使其在细菌内发生同源重组,获得阳性重组质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定正确后经PacⅠ酶切,转入AD 293细胞,包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP。用重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP对MSCs进行转染,并用荧光显微镜及免疫荧光染色法观察转染细胞内EGFP和heNOS蛋白质的表达。结果:pShuttle-heNOS-EGFP与pAdeasy-1在BJ 5183中成功地发生了同源重组,得到了重组腺病毒质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒在AD 293细胞中包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP。经基因转染的MSCs中高表达heNOS和EGFP。结论:采用腺病毒载体可以将外源性的heNOS基因转染至MSCs中,并得到有效表达,且携带的EGFP标记可以直观地检测靶细胞感染和外源基因的表达情况,这将为勃起功能障碍的细胞治疗提供一条新的途径。
- 王一平谭艳王家宁张少峰郭凌郧孔霞罗超
- 关键词：增强型绿色荧光蛋白腺病毒载体间充质干细胞
- PCR产物靶向克隆法高效构建携带人内皮型一氧化氮合酶cDNA的重组质粒
- 2008年
- 目的:将PCR扩增产物人内皮型一氧化氮合酶(heNOS)cDNA定向克隆到载体pShuttle-IRES-hrGFP-2以构建重组质粒pShuttle-heNOS-EGFP。方法:在扩增目的基因的PCR引物5′端加上与线性化载体同源的15个碱基,使PCR反应产物两端分别带上15个和线性化载体两端同源的碱基序列。EcoRⅠ酶切质粒pHCM-Vsp1A-heNOS,回收heNOS cDNA作为模板,进行PCR扩增。将纯化的PCR产物heNOS cDNA与EcoR V酶切后的线性化载体pShuttle-IRES-hrGFP-2以摩尔数为8∶1比例混和,在重组酶作用下,25℃反应30 min,将PCR产物定向克隆入目标载体pShuttle-IRES-hrGFP-2上,获得阳性重组质粒pShuttle-heNOS-EGFP。重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定。结果:经鉴定,成功构建出重组质粒pShuttle-heNOS-EGFP。结论:无需传统的酶切、连接、载体去磷酸化等手段,利用PCR产物靶向克隆法,可快速、高效完成PCR产物的定向克隆。
- 谭艳王家宁郭凌郧罗超
- 关键词：多聚酶链式反应
