江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(2010001) 作品数:5 被引量:9 H指数:2 相关作者: 童梅玲 郭锡熔 池霞 杨蕾 张昕 更多>> 相关机构: 南京医科大学 无锡市人民医院 南京市中医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目 南京市医学科技发展项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
PCB_(1254)暴露致幼年斑马鱼视动反应异常及感光细胞发育相关基因表达变化 被引量:2 2015年 目的:研究受精后暴露PCB1254对斑马鱼幼鱼视动反应及视网膜感光细胞发育相关基因表达的影响。方法:对受精后斑马鱼胚胎进行不同质量浓度的PCB1254(0.125、0.25、0.5、1 mg·L-1)暴露处理,同时设立空白对照和0.01%甲醇对照组。暴露7 d后,观察幼年期斑马鱼视动反应及感光细胞发育相关基因CRX、RHO、SWS1、SWS2表达的变化。结果:(1)当条栅空间频率为0.20线·mm-1,移动速度为25 cm·s-1时,0.5 mg·L-1和1 mg·L-1组的幼鱼视动反应敏感比例明显降低(P<0.05)。(2)各实验浓度组的SWS2基因表达均明显下调(P<0.05),0.5 mg·L-1和1 mg·L-1组的CRX、RHO、SWS1基因表达均明显下调(P<0.05)。结论:0.5 mg·L-1和1 mg·L-1多氯联苯导致幼年期斑马鱼视动反应行为异常及感光细胞发育相关基因表达变化,提示须加强监测和控制环境毒物对儿童眼发育带来的不利影响。 张昕 洪琴 杨蕾 张敏 郭锡熔 池霞 童梅玲关键词:视动反应 感光细胞 慢性低质量浓度多氯联苯暴露对斑马鱼视网膜形态学的影响 被引量:2 2012年 目的探讨慢性低质量浓度多氯联苯(PCBs)暴露对斑马鱼视网膜形态学发育的影响。方法以斑马鱼为模式生物,持续低质量浓度(0.05 mg.L-1)PCBs对斑马鱼胚胎进行暴露处理(实验组),同时设正常对照组。收集受精后7 d(7 dpf)、15 d(15dpf)及30 d(30 dpf)斑马鱼幼鱼,通过光镜和电镜技术,观察各组视网膜不同发育阶段结构形态学的变化。结果 1.光镜下:7 dpf和15 dpf,实验组斑马鱼视网膜各层厚度、细胞排列、细胞形态无明显影响。30 dpf时,实验组斑马鱼部分感光细胞出现核染色质边聚,空泡化变性,胞核变稀疏。2.透射电镜观察:7 dpf和15 dpf时,实验组斑马鱼视网膜感光细胞外节盘结构无明显影响。30 dpf时,实验组斑马鱼视网膜感光细胞有正常外节段形成,但较正常对照组小,且数量变少,线粒体空泡化变性,内质网扩张。结论日常生活中的慢性低质量浓度PCBs暴露对斑马鱼视网膜发育产生毒害作用,因此,必须加强对环境有机污染物的监测和控制。提示环境中长期存在低质量浓度PCBs暴露对人群健康可能造成一定的影响。 王艳萍 池霞 杨蕾 郭锡熔 童梅玲关键词:多氯联苯 斑马鱼 视网膜 形态学 斑马鱼胚胎发育过程中内源性多肽的表达及与眼发育的相关研究 被引量:3 2018年 目的:研究斑马鱼发育过程中内源性多肽的表达规律以及与眼发育的相关性。方法:分别收集0、48 h斑马鱼胚胎进行多肽质谱分析,筛选发育过程中的差异多肽,利用生物信息学方法分析差异多肽对应的前体蛋白及前体基因,从中筛选与眼发育相关的内源性多肽。结果:研究共筛选得到差异多肽232条。理化特性分析发现分子量均分布在2 000 Da以下,等电点主要以弱酸和弱碱性为主,中性极少。生物信息学发现Vitellogenin(VTG)、Titin(TTN)基因编码的前体蛋白富集较多与胚胎发育和眼发育相关的差异多肽。信号通路分析(ingenuity pathway analysis,IPA)发现差异多肽的分子功能和生理系统功能与胚胎发育相关,差异多肽富集信号通路包括轴突介导的信号通路、FAK信号通路和MAPK信号通路,这些信号通路与眼发育密切相关。结论:斑马鱼胚胎期发育过程中内源性差异多肽理化特性稳定,与胚胎发育密切相关,并可能通过相关信号通路来影响眼发育,将为眼发育提供新的研究思路,为机制研究奠基基础。 李楠 李楠 张昕 史春梅 郭锡熔 郭锡熔 池霞关键词:眼发育 斑马鱼 信号通路 miR-182在多氯联苯(PCB_(1254))暴露后视网膜神经节细胞内的表达及意义 被引量:2 2017年 目的:研究多氯联苯(polychlorinated biphenyls,PCBs)PCB1254引起视网膜神经节细胞毒性作用的可能机制。方法:分别配制浓度为0.125、0.250、0.500、1.000 mg/L的PCB1254对RGC-5细胞进行暴露处理,并设立空白对照及0.01%甲醇对照组,测定细胞内miR-182表达水平;利用miR-182类似物或抑制剂转染RGC-5细胞,使miR-182上调或下调,分别检测细胞凋亡、细胞增殖功能和细胞周期;使用0.5、1.0 mg/L的PCB1254刺激RGC-5细胞,再转染miR-182类似物,分别检测细胞凋亡、细胞增殖功能。结果:随着PCB1254浓度的增高,RGC-5细胞内miR-182的表达逐渐被抑制,当浓度≥0.5 mg/L时,与对照组的差异有统计学意义(P<0.05)。在RGC-5细胞内沉默miR-182可导致Caspase-3活性增高(P<0.05),表明miR-182沉默促进细胞凋亡;CCK-8法显示miR-182沉默会导致RGC-5细胞活力降低(P<0.05),表明miR-182沉默会抑制细胞增殖;Mi R-182沉默对RGC-5细胞周期无显著影响(P>0.05)。使用miR-182类似物干预0.5、1.0 mg/L PCB1254暴露后的RGC-5细胞,发现细胞内Caspase-3活性下降(P<0.05)、细胞活力增加(P<0.05),表明miR-182可改善PCB1254对RGC-5细胞凋亡及增殖功能的影响。结论:PCB1254可能通过抑制miR-182的表达来影响RGC-5细胞的增殖和凋亡,进而导致视功能损害。 张晓倩 张昕 李楠 池霞 郭锡熔 童梅玲关键词:多氯联苯 幼年期斑马鱼视动反应的行为学特征 2015年 目的 探讨幼年期斑马鱼视动反应(OMR)行为特征,并确定最佳OMR行为实验条件,建立其行为实验平台,为基础和临床研究儿童眼病及视觉发育提供视功能评估的参考依据。方法 建立斑马鱼 OMR 行为学装置,通过产生匀速水平移动的一定空间频率黑白条栅的视觉刺激,观察幼年期斑马鱼对该视觉刺激反应的行为学特征,进一步通过改变条栅空间频率或移动速度来观察其行为表现,从而建立最佳的幼年期斑马鱼OMR行为学实验模型。结果 1.当条栅移动时,幼年期斑马鱼出现相对于条栅移动方向的4种行为反应:正向游动、反向游动、停滞不前、犹豫向前;其中正向游动为OMR敏感表现。2.当条栅移动速度固定为25.0 cm /s时,幼年期斑马鱼对不同空间频率(0.04、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80线/mm)的条栅敏感性随着空间频率的升高先增高后降低,以0.20线/mm 敏感性最高(73.0%)。3.当条栅空间频率固定为0.20线/mm 时,幼年期斑马鱼对条栅的敏感性随着移动速度(12.5、25.0、50.0、75.0 cm /s)的增加先升高后降低,在25.0 cm /s时敏感性最高(72.5%)。结论 幼年期斑马鱼对一定空间频率、移动速度的视觉刺激存在特有的视动反应行为特征,条栅空间频率为0.20线/mm,移动速度为25.0 cm /s是幼年期斑马鱼视动反应的最佳实验条件,并可运用该条件作为有关儿童眼病的基础和临床研究中进行视功能评估依据。 张昕 洪琴 杨蕾 张敏 魏宁 王禹瞳 郭锡熔 池霞 童梅玲关键词:视动反应 视功能