上海市自然科学基金(11ZR1430200)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
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- IgG抗体适体与16kD抗原联合检测血清结核抗体研究被引量：3
- 2011年
- 目的研究结核患者IgG抗体适体与16 kD抗原组合在结核病血清学检测中的应用价值。方法 SELEX技术筛选得到结核患者IgG抗体适体,并将适体构建的混合ELISA体系用于少量血清标本的检测,初步鉴定适体的检测效果,然后将适体与16 kD抗原联合构建ELISA检测体系进行221份血清标本的分析。结果 SELEX筛选得到4个高亲和适体;单适体血清学检测结果显示,适体之间存在交叉互补性;适体两两组合检测效果显示,N1+N6组合的阳性平均值与阴性平均值的比值最高;221份血清标本检测结果显示,N1+N6适体组合、16 kD抗原以及N1+N6+16 kD组合3种检测体系的敏感性和特异性分别为47.31%和92.97%、49.46%和91.41%、51.61%和92.19%,N1+N6适体组合、16 kD抗原以及N1+N6+16 kD组合3种检测体系的结核病组和健康对照组之间的t检验结果依次为t=6.564,P<0.0001;t=5.279,P<0.0001;t=4.348,P<0.0001,结核病组和非结核疾病对照组之间的t检验结果依次为t=4.196,P<0.0001;t=3.014,P=0.0031;t=2.929,P=0.004,差异均具有统计学意义,三种检测方法之间卡方检验显示,差异无统计学意义(P>0.05);单独适体组合与单独抗原检测合并计算的敏感性、特异性为67.74%、84.38%,与N1+N6+16 kD组合检测结果的卡方检验显示,敏感性差异有统计学意义(χ2=8.52,P<0.05),特异性差异无统计学意义(χ2=2.04,P>0.05)。结论 SELEX技术筛选获得的特异性IgG抗体适体和16KD抗原联合具有良好的结核病血清学诊断价值,可用于结核病的实验室诊断。
- 柏文娟白广红胡忠义刘忠华杨华秦莲花
- 关键词：结核血清学检测
- 结核患者血清IgG抗体适体的制备及特异性鉴定被引量：4
- 2011年
- 目的筛选获得结核患者血清IgG抗体的特异性适体。方法纯化结核患者血清中的IgG抗体,以IgG抗体为靶标,利用SELEX技术进行筛选,筛选得到的ssDNA适体文库,进行克隆测序、亲和性检测、二级构象分析,并用于血清标本检测,进行适体特异性的鉴定。结果纯化获得了IgG抗体,浓度为1.3mg/mL。SELEX筛选10轮后,随机挑选12个适体进行亲和性检测和二级结构分析。结果显示,亲和性吸光度值大于1.0的适体有4个。二级构象分析揭示,适体与靶分子的结合基础为口袋颈环鼓包结构和分枝的连接角度。对亲和性吸光度值大于1.0的4个适体,经29份临床标本检测进行特异性的进一步验证显示,其中有3个适体对结核病组与健康对照组的检测结果具有显著差异。结论初步筛选获得结核患者血清IgG抗体的适体,并有较高的特异性。
- 柏文娟胡忠义刘忠华杨华秦莲花
- 关键词：IGG抗体SELEX适体
