广西研究生教育创新计划(2008105981002D33)
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 相关作者:陆云飞黄名威李涛沈桂鑫更多>>
- 相关机构:广西医科大学广西医科大学第一附属医院广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金:广西研究生教育创新计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 乳腺癌MCF7细胞株中肿瘤干细胞鉴定模式的建立被引量:3
- 2010年
- 目的探讨适用于体外培养的乳腺癌MCF7细胞中肿瘤干细胞的鉴定模式。方法取人乳腺癌MCF7细胞株,在显微操作法的基础上改进单细胞分离种植技术,用该技术分离MCF7单细胞并种植到96孔板,观察单细胞克隆生长情况并依据其生长特征制订成瘤性克隆的纳入标准。随机扩增MCF7单细胞克隆并进行移植成瘤实验,观察符合成瘤性克隆纳入标准的单细胞克隆的成瘤性。结果成瘤性克隆的纳入标准:单细胞种植后1周即形成细胞数>50个的克隆,细胞大小形态正常,大部分细胞状态良好;第2周时克隆迅速扩增至>300个,甚至达1 000个以上,细胞状态好,克隆中心可有(或无)少量细胞凋亡。符合上述标准的单细胞克隆可以100%扩增成功并连续移植成瘤,而相应排除的克隆成瘤率<10%。结论建立了乳腺癌MCF7单细胞分离种植—成瘤性克隆的干细胞鉴定模式,该模式适用于体外培养的肿瘤细胞株中肿瘤干细胞的鉴定。
- 黄名威陆云飞沈桂鑫李涛
- 关键词:肿瘤干细胞克隆细胞肿瘤细胞乳腺癌
- MCF7细胞中肿瘤干细胞的增殖特征被引量:1
- 2011年
- 背景:肿瘤干细胞学说认为,肿瘤干细胞是肿瘤不断增殖的根源,并与肿瘤的浸润转移、耐药现象密切相关。目的:在单细胞水平研究体外传代培养的MCF7细胞中肿瘤干细胞含量变化规律,认识肿瘤干细胞在体外培养环境下的增殖特点。方法:利用单细胞分离种植-成瘤性克隆方法对传代培养后不同时间点MCF7细胞中肿瘤干细胞的比例连续检测,流式细胞仪同步检测相应细胞样本中CD44+CD24-/low亚群的含量变化。结果与结论:传代后培养的MCF7细胞在不同时间点其肿瘤干细胞比例及CD44+/CD24-/low亚群比例均呈现有规律的变化。但CD44+/CD24-/low亚群变化更为显著(36.84%到81.95%),而肿瘤干细胞含量仅在小范围波动(38.54%~47.39%)。结果提示传代培养的MCF7细胞中,肿瘤干细胞具有通过调节自身增殖来保持其比例相对稳定的特点;CD44+/CD24-/low亚群并不代表或者富集MCF7细胞株中的肿瘤干细胞亚群。
- 黄名威陆云飞
- 关键词:肿瘤干细胞增殖
- 一种简单实用的单细胞分离技术被引量:2
- 2010年
- 背景:基于单细胞水平的研究是干细胞、肿瘤干细胞研究的发展趋势。许多研究者常常因为无法轻易获得足够数量的单细胞而在研究时望而却步。掌握简单有效的单细胞分离技术为准确、定量的单细胞水平研究奠定基础。目的:介绍一种简单有效的单细胞分离技术。方法:在显微操作法的基础上改进,利用改制小号的静脉注射静脉注射针及微量移液器组合制成单细胞分离种植装置并采取双手操作法进行单细胞分离。采用染色细胞分离的方法对该技术分离单细胞的效率进行验证。结果与结论:单细胞分离的成功率达到96.5%。利用该技术分离单细胞具有取材容易、制作简单、操作直观可靠、分离成功率高、易于推广普及的特点。分离的单细胞可直接用于进一步的研究。
- 黄名威陆云飞沈桂鑫李涛
- 关键词:单细胞细胞培养流式细胞仪