国家重点实验室开放基金(SKLPPBKF09011)
- 作品数：8 被引量：42H指数：4
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- 烟草WRKY12基因的分离、表达与多克隆抗体的制备被引量：11
- 2011年
- 在高等植物中,WRKY转录因子家族成员广泛参与植物的生长发育、代谢、生物胁迫和非生物胁迫等生理过程的调控。本研究采用同源序列克隆的方法获得烟草WRKY12基因,序列分析表明,该蛋白属于WRKY家族第2类成员,只有一个WRKY结构域,锌指结构为C-X4-C-X23-H-X1-H。构建系统发育树结果表明,它与大豆中GmWRKY6和GmWRKY12亲缘关系较近,相似性分别达50%和45%。Northern Blot试验证明该基因表达受4℃低温胁迫诱导。将其完整编码区构建到大肠杆菌表达载体,在培养温度18℃条件下添加0.2mmol/L IPTG诱导表达融合蛋白。进一步试验获得特异性和纯度非常高的纯化蛋白和抗体。
- 李立芹
- 关键词：烟草WRKY原核表达
- 根癌农杆菌介导番茄‘白果强丰’遗传转化体系优化被引量：1
- 2011年
- 以番茄无菌苗的子叶为外植体,通过农杆菌介导法对其遗传转化体系进行了优化,结果表明:外植体在MS+2mg/L6-BA+0.2mg/LIAA的进行2天的预培养后,用农杆菌EHA105(浸染浓度为OD600=0.6)浸染6min,转化效率最高,经过PCR检测初步证明NPTII基因已整合到番茄再生植株中,本研究建立了高效番茄‘白果强丰’子叶农杆菌介导的遗传转化体系。
- 李立芹
- 关键词：根癌农杆菌番茄
- 农杆菌介导番茄“美粉一号”遗传转化体系优化研究(英文)
- 2010年
- [目的]研究农杆菌介导番茄"美粉1号"遗传转化体系的优化。[方法]以番茄美粉1号无菌苗的子叶为外植体,通过农杆菌介导法对其遗传转化效率进行了优化,建立高效番茄子叶农杆菌介导的遗传转化体系。[结果]外植体在MS+2mg/L6-BA+0.5mg/LIAA进行2d的预培养后,用农杆菌EHA105(浸染浓度为OD=0.4)浸染5min,转化效率最高;经过PCR检测初步证明nptⅡ基因已整合到番茄再生植株中。[结论]该研究结果为今后优良基因导入番茄品种美粉1号奠定了基础。
- 李立芹
- 关键词：根癌农杆菌番茄
- 植物低磷胁迫适应机制的研究进展被引量：18
- 2011年
- 磷对植物生长发育起到至关重要作用。但是土壤中存在大量植物不可利用的磷,根际周围非常低的有效磷含量是限制植物生长的因素。植物在遭受低磷胁迫时,其根形态、磷酸酶、有机酸、磷转运体等方面会产生一些适应机制。论述了这些机制最新研究进展,并对这一问题的研究方向进行展望。
- 李立芹
- 关键词：磷胁迫根系酸性磷酸酶有机酸转运体
- 番茄“美粉1号”子叶再生体系的建立被引量：4
- 2011年
- 以番茄品种美粉1号为试验材料,研究20%次氯酸钠和0.1%氯化汞处理不同时间对番茄种子表面消毒和萌发的影响,同时研究不同的激素组合对该品种再生芽形成和生根的影响。结果表明,用20%次氯酸钠对番茄种子消毒20 min,可获得较多的无菌苗;同时发现,IAA浓度为0.2 mg/L和6-BA浓度为2 mg/L组合时,外植体再生芽频率较高,为85.2%,促进不定芽生根的最佳激素浓度为MS培养基中添加0.5 mg/L IAA。再生苗移栽到灭菌处理后的土壤中后成活率较高,可达92%。
- 李立芹
- 关键词：番茄子叶
- 农作物Pht1家族磷转运体蛋白的生物信息学分析被引量：6
- 2011年
- 以AtPT1所编码的氨基酸序列做为检索序列,通过对GenBank NR数据库以及EMBI、DDBJ、PDB数据库进行检索,发现小麦、大麦、玉米、水稻和番茄等植物中具全长cDNA的33个Pht1家族磷转运体基因,包括马铃薯1个,苜蓿5个,辣椒3个,茄子2个,烟草2个,番茄2个,菜豆1个,玉米4个,大麦2个,小麦1个,水稻7个,大豆2个和木薯1个。利用生物信息学分析,首次将Pht1家族磷转运体基因保守特征序列确定为GGDYPLSATIMSE。对检索到的33个Pht1家族磷转运体蛋白进化关系分析表明,与AtPT1亲缘关系较近的双子叶植物磷转运体蛋白是木薯MePT1和GmPT2,关系较近的单子叶植物磷转运体蛋白是OsPHT8和OsPHT12。
- 李立芹
- 关键词：生物信息学
- 农杆菌介导番茄“美粉1号”遗传转化体系优化研究被引量：2
- 2011年
- [目的]优化农杆菌介导番茄"美粉1号"遗传转化体系。[方法]以番茄美粉1号无菌苗的子叶为外植体,通过农杆菌介导法对其遗传转化效率进行了优化,建立高效番茄子叶农杆菌介导的遗传转化体系。[结果]外植体在MS+2.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L IAA进行2 d的预培养后,用农杆菌EHA105(浸染浓度为OD=0.4)浸染5 min,转化效率最高;经过PCR检测初步证明nptⅡ基因已整合到番茄再生植株中。[结论]该研究结果为优良基因导入番茄品种美粉1号奠定了基础。
- 李立芹
- 关键词：根癌农杆菌番茄
- 番茄“白果强丰”子叶再生体系的建立
- 2011年
- 以番茄品种"白果强丰"为试材,研究20%次氯酸钠和0.1%升汞处理不同时间对番茄种子表面消毒和萌发的影响及不同激素组合对该品种再生芽形成和幼苗生根的影响。结果表明:用20%次氯酸钠对番茄种子进行消毒20 min,可获得较多的无菌苗,同时发现,IAA浓度为0.2 mg/L和6-BA浓度为2 mg/L组合时,外植体再生芽频率较高为87.2.2%,促进不定芽生根最佳激素浓度为MS培养基中添加0.5 mg/L IAA。再生苗移栽到灭菌处理后土壤中成活率较高,可达88%。
- 李立芹
- 关键词：番茄子叶
