福建省科技重大专项(2013N5007)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：刁勇林俊生王晓黄晓平周宇更多>>
- 相关机构：华侨大学更多>>
- 发文基金：福建省科技重大专项国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 适体核酶型人工核糖开关的设计被引量：2
- 2014年
- 适体核酶型核糖开关是近年出现的一种人工基因调控开关。最常见的适体核酶由锤头状核酶和适体组成,结构清晰,易于设计。作为一种顺式作用元件,适体核酶型核糖开关在特异性配体的作用下,无需蛋白质辅助,即可通过调节自身裂解反应,调控mRNA的翻译,可应用于多种细胞的基因调控。目前适体核酶型核糖开关的设计,主要是通过合理组装核酶与适体元件,整合到mRNA后再进行功能筛选。该基因调控开关调节幅度大、响应迅速、调控方式简洁,有可能应用于体内传感器、基因治疗、生物处理器等多个领域。
- 王佳稳冯婧娴林俊生刁勇
- 关键词：适体基因调控锤头状核酶
- 重组人VEGF165蛋白在毕赤酵母中高效表达与多克隆抗体的制备被引量：1
- 2014年
- 构建pPIC9K-VEGF165分泌型载体,线性化后电击转化至GS115(his4)中,经最小葡萄糖培养基(MD平板)筛选出阳性表达菌株并进行聚合酶链式反应(PCR)验证.菌株发酵上清液经Sephadex G-25,Heparin Sepharose FF和Sephacryl S-100层析介质分离纯化,目的蛋白纯度达到95%,相对分子质量约为24ku.结果表明:重组人VEGF165蛋白能诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖,提高HUVEC细胞的活性;重组人VEGF165蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗体效价达1:51 200.
- 王晓黄晓平周宇刁勇
- 关键词：多克隆抗体毕赤酵母
- 长效人促卵泡激素CHO细胞株的构建及其体内活性
- 2014年
- 促卵泡激素(FSH)是具有促进卵泡与睾丸发育作用的一种垂体糖蛋白激素。因其体内半衰期较短,临床上需要连续10 d以上每天注射,病人使用非常不方便。本文旨在通过提高糖基化程度,研制一种长效FSH。通过一段含有两个N-糖基化位点的连接序列,将人FSHα链与β链cDNA融合,并插入pcDNA3.1(+)表达载体。表达载体转染CHO-K1细胞后,通过G418筛选得到阳性单克隆细胞,并经PCR和Western blotting证实。该重组FSH为单链蛋白,分子量约为49 kDa。经无血清培养,工程细胞株培养上清液中重组FSH的表达量可达3 mg/L。单次注射该重组FSH能够促进大鼠卵巢发育与卵泡成熟,且药效与连续8次注射Folltropin-V的相近。实验结果显示,本研究已成功获得一种长效重组FSH。
- 黄晓平王晓杨春雪贾东方林俊生刁勇
- 关键词：促卵泡激素无血清培养
