国家自然科学基金(39300136)
- 作品数：10 被引量：62H指数：5
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- 人卵巢组织冷冻保存的实验研究被引量：13
- 2005年
- 目的 :探讨冷冻保存对人卵巢皮质内各级卵泡形态及对组织体外培养的影响。方法 :取手术切除的 30例患者的卵巢皮质 ,放入二甲基亚砜配制的冷冻保护液中 ,应用程序冷冻法保存于液氮内。冷冻前后取部分卵巢皮质行组织学检测 ;同时培养部分组织块观察上清中雌二醇分泌的变化。结果 :冷冻后存活的始基卵泡 ,与新鲜组比较无显著改变 (P >0 .0 5 ) ,初级卵泡的存活率显著下降 (P <0 .0 5 ) ;而冷冻保存不会明显降低始基卵泡与初级卵泡总的存活率 (P >0 .0 5 )。复温后卵巢组织中仅见 1枚形态正常的次级卵泡。冷冻后培养上清中雌二醇水平与新鲜组比较无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :程序冷冻法可以较好地保存人卵巢皮质内的始基卵泡 ,且不影响冷冻后卵巢组织的激素分泌。
- 王利红陈子江高选
- 关键词：卵巢体外培养始基卵泡
- 慢速冷冻对人成熟卵与未成熟卵发育潜能的影响被引量：5
- 2003年
- 目的 :探讨慢速冷冻保存对人成熟卵子和未成熟卵子发育潜能的影响。方法 :在行宫腔配子移植和多囊卵巢综合征患者未成熟卵穿刺周期中收集不同成熟期的卵子 10 5个 ,其中成熟卵 (MII) 6 9个 ,未成熟卵 (MI和GV) 36个。各成熟期卵子经慢冻 速融后进行形态学和存活力观察 ,并进一步观察体外成熟、受精及胚胎培养情况。结果 :经慢速冷冻后各个成熟期卵子的形态都发生了改变。冷冻后的未成熟卵子可以体外成熟 (76 6 7% )。冻融成熟卵子受精后的分裂率 (76 92 % )高于体外成熟卵受精后的分裂率 (P <0 .0 1) ,只有冻融成熟卵子经胚胎培养获得优质胚胎 (33 33% )。结论 :用慢速冷冻法保存成熟卵子可以得到较好的胚胎发育结果 ,未成熟卵子的冷冻保存仍然存在相当的难度。
- 李梅陈子江李媛赵力新高选马水英
- 关键词：未成熟卵胚胎发育
- 人工激活胚胎的性染色体分析和IGF-Ⅱ表达研究被引量：6
- 2005年
- 目的观察钙离子载体A23187联合嘌呤霉素激活胚胎的性染色体和胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growthfactor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)表达。方法收集体外成熟周期(in vitromaturation and intracytoplasmicsperminjection,IVM-ICSI)和卵母细胞单精子显微注射(intracytoplasmic sperminjection,ICSI)中受精失败的卵母细胞95枚,采用钙离子载体A23187和嘌呤霉素激活。应用荧光原位杂交技术分析来源于2PN2PB胚胎的性染色体;免疫组化检测IGF-Ⅱ的表达,并与正常胚胎、孤雌胚胎相比较。结果钙离子载体A23187联合嘌呤霉素能有效地激活ICSI后22h未受精卵母细胞,激活胚胎能发育到囊胚阶段。激活胚胎的性染色体为5枚XX,8枚XY。激活胚胎的IGF-Ⅱ表达与正常胚胎相近,明显较孤雌胚胎增强。结论钙离子载体A23187联合嘌呤霉素是一种安全、有效的激活方式,有希望成为ICSI受精失败的有效补救措施。
- 鹿群陈子江高选李媛颜军昊马水英李梅
- 关键词：胚胎性染色体钙离子载体A23187嘌呤霉素人工受精
- 钙离子载体A23187联合嘌呤霉素对人体外成熟卵母细胞孤雌激活作用的研究被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨钙离子载体A23187或联合嘌呤霉素(puromycin)对人类体外成熟卵母细胞的孤雌激活作用。方法:收集体外培养成熟的人卵母细胞124枚,根据体外成熟培养的时间分为24、48、72h组。分别采用A23187、A23187联合嘌呤霉素进行孤雌激活,然后应用荧光原位杂交(FISH)技术对孤雌胚胎进行性染色体分析。结果:A23187或联合嘌呤霉素能激活体外成熟的卵母细胞,激活率分别为38.9%、71.8%;二者联合应用能有效地提高孤雌胚胎的发育潜能。随着体外成熟培养的时间延长,A23187联合嘌呤霉素对卵母细胞激活率呈下降趋势;其中24、48h组成熟的卵母细胞激活率和胚胎发育潜能显高于72h组。FISH对9个孤雌胚胎的性染色体分析示,7个孤雌胚胎为XX,2个为X。结论:钙离子载体A23187联合嘌呤霉素能有效地激活人体外成熟卵母细胞,形成的孤雌胚胎核型多数为双倍体。
- 鹿群马金龙高选赵跃然陈子江
- 关键词：卵母细胞嘌呤霉素孤雌激活荧光原位杂交
- 抵抗素基因第2内含子多态性与多囊卵巢综合征相关性的研究被引量：5
- 2005年
- 目的:探讨抵抗素基因第2内含子多态性在多囊卵巢综合征(polycysticovarysyndrome,PCOS)发病中的作用。方法:为75例多囊卵巢综合征患者(PCOS组)和66例正常者(对照组)的DNA进行测序,观察两组间抵抗素基因第2内含子序列有无差异。结果:两组抵抗素基因在距第2外显子末端39bp位点上存在C和CT两种基因型,CT均表现为套峰,未发现由C向T的突变,内含子2其余碱基序列稳定不变。PCOS组C等位基因出现的频率为0.96(72/75),出现CT套峰的频率为0.04(3/75);对照组中C等位基因出现频率为0.95(63/66),CT套峰出现频率为0.05(3/66),两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:①抵抗素基因第2内含子基因多态性位于距第2外显子末端39位点上,存在C和CT两种基因型;②抵抗素基因第2内含子多态性与多囊卵巢综合征的发病无关。
- 石玉华盛燕陈子江赵力新王来诚赵跃然高芹
- 关键词：多囊卵巢综合征抵抗素基因内含子
- 卵巢囊肿与多囊卵巢皮质中卵泡密度分析及其冷冻保存被引量：3
- 2005年
- 目的:探索来自卵巢囊肿及多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)卵巢皮质中卵泡的分布特征,并观察冷冻对卵巢组织形态学的影响。方法:收集23例卵巢囊肿(卵巢囊肿组)及8例PCOS(PCOS组)的卵巢皮质,分析卵巢皮质中的卵泡密度;同时冷冻部分组织,观察冷冻前后各级卵泡的分布及形态学改变。结果:PCOS组中的卵泡密度明显高于卵巢囊肿组,但各卵泡囊肿组间的卵泡密度差异无显著性。冷冻后各组中卵泡分布以及形态正常的始基与初级卵泡比例,与冷冻前比较差异无显著性;而冷冻前后PCOS组织中初级卵泡比例显著高于卵巢囊肿组,形态正常的始基卵泡比例明显低于卵巢囊肿组。结论:卵巢囊肿与PCOS患者的卵巢皮质可作为人卵巢组织冷冻保存的标本来源。
- 王利红陈子江范秀玲许成岩沈芸
- 关键词：卵巢囊肿多囊卵巢综合征
- 人类MⅡ期卵冷冻与复苏的初步实验研究被引量：9
- 2003年
- 目的 :探讨不同冻融方法对人类MⅡ期卵子结构及发育潜能的影响。方法 :共收集人MⅡ期卵子 186个 ,随机分为A、B、C三组冷冻。A组为带完整冠丘颗粒细胞的MⅡ期卵 ,其冷冻保护液含 0 .1M蔗糖 ;B组为不带冠丘颗粒细胞的MⅡ期卵 ,冷冻保护液中蔗糖浓度同A组 ;C组为不带冠丘颗粒细胞MⅡ期卵 ,冷冻保护剂中蔗糖浓度为0 .2M。对冷冻复苏后的卵子进行质量评估、显微授精及胚胎培养 ,并对部分卵进行染色体分析。结果 :( 1)带冠丘颗粒细胞的A组MⅡ期卵子冻融后的受精卵卵裂率显著高于B组 (P <0 .0 5 ) ;0 .2M蔗糖浓度冷冻的C组的卵存活率、优质卵率和卵裂率均高于B组 (P<0 .0 5 )。 ( 2 )冻融后MⅡ期卵子的核型分析未发现染色体数目异常 ,但发现有染色单体的缺失。结论 :带完整冠丘颗粒细胞不影响MⅡ期卵子的冻融效果 ,而且可能有助于保护卵子的发育潜能 ;在冷冻保护液中 ,0 .2M蔗糖浓度比 0 .1M更适合于MⅡ期卵子的冷冻 ;
- 陈子江李梅李媛赵力新唐蓉高芹
- 关键词：冷冻胚胎体外受精
- 冷冻保存对人始基卵泡中颗粒细胞的影响被引量：5
- 2005年
- 目的:探讨冷冻保存对人始基卵泡中颗粒细胞的形态及存活率的影响。方法:程序冷冻法保存人卵巢组织,采用常规组织学检测冷冻前后卵泡中颗粒细胞形态,并采用胶原酶消化联合镜下机械分离卵巢组织中的始基卵泡,采用双荧光标记,检测冷冻前后人卵巢组织分离始基卵泡中颗粒细胞的存活比例。结果:形态学检测发现,冷冻前卵巢组织中颗粒细胞发生损伤的始基卵泡占12.4%,卵母细胞损伤20.6%;冷冻后两者的比例分别为23.3%与24.4%。荧光标记的冷冻前卵巢组织中颗粒细胞存活的始基卵泡占72.7%,<50%颗粒细胞存活的卵泡仅占3.6%,卵母细胞存活率为85.5%;冷冻组中颗粒细胞存活的始基卵泡占79.5%,<50%颗粒细胞存活的卵泡仅占2.5%,卵母细胞存活率达86.1%。结论:冷冻复温的过程主要破坏卵泡中的颗粒细胞,而对卵母细胞的损伤很小。
- 王利红陈子江赵力新高选
- 关键词：粒层细胞卵泡冷冻保存
- 人类胚胎冻存技术的初步研究被引量：4
- 1999年
- 研究了不同冷冻与复苏方法以及不同移植周期法对人类胚胎冻存结果的影响。共复苏了１４９ 个胚胎，８９ 个（５９．７％ ）得以存活。在２０ 个移植周期中，５ 例（２５．０％ ）获得临床妊娠，２ 例已经分娩健康的婴儿。结果表明，采用缓慢降温至－ １２０℃再浸入液氮中冷冻及快速升温、逐步置换冷冻保护剂的方法复苏，胚胎的存活率（７２．７％ ）较高。
- 李媛陈子江冯云高士友
- 关键词：胚胎移植冷冻保存存活率分析胚胎
- 人卵母细胞玻璃化冷冻的临床应用及成功分娩被引量：12
- 2006年
- 目的探讨人卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值。方法将从促排卵周期获得的人的卵母细胞用冷冻环进行玻璃化冷冻保存,复苏后行卵细胞浆内单精子注射-胚胎移植,观察复苏后卵母细胞形成胚胎的发育能力。结果冷冻后融解235个卵母细胞,存活169个(71．9％,169／235),受精122个(72．2％,122／169)。移植11例,获得临床妊娠2例。第1例于2005年12月15日妊娠35+2周行剖宫产,为双胎女婴,均发育正常。第2例为单胎妊娠,现妊娠16周,目前胎儿及孕妇健康。结论卵母细胞玻璃化冷冻是一种较理想的保存女性生育力的方法,但是其技术应用于临床有待进一步研究和实践。
- 陈子江李媛胡京美李梅
- 关键词：玻璃化冷冻分娩
