国家自然科学基金(81102841)
- 作品数：9 被引量：66H指数：5
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- 丹参酮ⅡA对缺血再灌注损伤的乳鼠心肌细胞Notch信号通路的影响被引量：12
- 2014年
- 目的研究丹参酮ⅡA预处理对缺血再灌注后乳鼠心肌细胞丙二醛(MDA)水平、细胞凋亡及细胞内Notch1、Hes1及HIF-1αm RNA表达的影响,从Notch信号通路活化水平阐明丹参酮ⅡA预处理防治缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion,I/R)的分子机制。方法培养乳鼠原代心肌细胞,建立心肌细胞I/R模型。并分为对照组、I/R模型组(先用正常培养液孵育1 h,然后模拟缺血2 h,正常DMEM再灌注4 h)、DAPT处理组(先用含DAPT的DMEM中孵育1 h,然后模拟缺血2 h,正常DMEM再灌注4 h)和丹参酮ⅡA处理组(先用含丹参酮IIA的DMEM中孵育1 h,然后模拟缺血2 h,正常DMEM再灌注4 h)。应用硫代巴比妥酸法测定MDA水平,用磷脂酰丝氨酸外翻分析法检测细胞凋亡,并用荧光定量PCR技术检测反映Notch信号通路活化水平的Notch信号通路受体Notch1 m RNA、下游信号分子Hes1 m RNA和HIF-1αm RNA表达。结果与对照组比较,乳鼠I/R模型组心肌细胞MDA水平升高(P<0.01),细胞早期凋亡率增加,Notch1、Hes1、HIF-1αm RNA表达水平增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。与I/R模型组比较,DAPT处理组和丹参酮ⅡA处理组心肌细胞MDA水平降低(P<0.01),心肌细胞早期凋亡率降低,Notch1、Hes1、HIF-1αm RNA表达水平下降(P均<0.01)。结论丹参酮ⅡA在乳鼠心肌细胞I/R损伤中起到心肌保护作用,其可能的分子机制为抑制Notch信号通路的活化及调节细胞凋亡。
- 赵峻峰祝骥陈微卢德赵
- 关键词：NOTCH信号通路缺血再灌注损伤心肌细胞
- 绞股蓝总皂苷对HDL-CE诱导的HepG2细胞SR-B Ⅰ受体表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究绞股蓝总皂苷(GPS)对HepG2细胞B型Ⅰ类清道夫受体(SR-BⅠ)表达的影响,分析绞股蓝总皂苷抗动脉粥样硬化的机制。方法体外培养人HepG2肝癌细胞,用不同浓度的GPS和HDL-CE与细胞共孵育24 h。通过油红O染色观察细胞内脂质堆积情况和酶比色法定量检测细胞内总胆固醇含量的变化,运用Real-time PCR、Western免疫印迹法分别检测绞股蓝总皂苷对细胞膜受体SR-BⅠmR-NA和蛋白的表达。结果 0～120 mg·L-1浓度的GPS对HepG2源性荷脂细胞增殖无影响,HDL-CE单独处理及HDL-CE和不同浓度GPS共孵育细胞处理后HepG2细胞中脂滴堆积增加,总胆固醇和胆固醇酯的含量明显增加,但后者SR-BⅠmRNA和SR-BⅠ蛋白的表达量却下调,并具有一定的量效关系。结论绞股蓝总皂苷对肝细胞具有保护作用,在高脂环境中,绞股蓝总皂苷能抑制肝细胞无限制的摄入脂质。
- 王萍儿卢德赵林韬琦杨贞沃兴德
- 关键词：绞股蓝总皂苷HEPG2细胞胆固醇
- 川芎嗪对泡沫细胞胆固醇逆转运的影响被引量：11
- 2014年
- 目的:从胆固醇逆转运角度探讨川芎嗪对ox-LDL诱导泡沫细胞的干预作用。方法:采用体外培养RAW264.7,以20 mg·L-1ox-LDL诱导其转变成泡沫细胞模型,并用川芎嗪进行干预。通过油红O染色观察细胞内脂质堆积情况和酶比色法定量检测细胞内总胆固醇和胆固醇酯的变化,并用荧光定量PCR和免疫印迹方法检测PPARγ,LXRα,ABCA1 mRNA和蛋白表达。结果:川芎嗪能降低泡沫细胞内总胆固醇和胆固醇酯,抑制脂质积累,并提高PPARγ,LXRα,ABCA1 mRNA和蛋白的表达。结论:川芎嗪通过增加PPARγ,LXRα,ABCA1基因表达,促进胆固醇逆转运。
- 祝骥滕耀红王萍儿杨贞卢德赵
- 关键词：川芎嗪泡沫细胞PPARΓLXRΑABCA1
- 动脉粥样硬化机制的研究进展被引量：13
- 2016年
- 动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是心脑血管疾病的主要原因和病理基础,表现为大动脉及中动脉的血管内壁出现脂质沉积,形成分散或成片的粥样斑块,造成动脉管腔狭窄,随后斑块破裂出血,可在狭窄的动脉内形成血栓,导致缺血性脑卒中、心肌梗死发生。每年约有一千多万人死于AS所引起的心血管病和脑中风,其严重危害人体健康,并且具有年轻化的趋势。动脉粥样硬化形成与发展与内皮细胞、血管平滑肌细胞、巨噬细胞、血小板和一系列细胞因子和炎性因子有关,其机制非常复杂,涉及脂质代谢紊乱、内皮细胞功能障碍、血栓形成、血管壁慢性炎症、平滑肌细胞增殖和免疫功能障碍等,该文总结了近年来国内外有关动脉粥样硬化机制的研究,并进行综述。
- 谢诗情程文静祝骥卢德赵
- 关键词：动脉粥样硬化心脑血管病内皮细胞炎症
- 白藜芦醇对HeLa细胞蛋白质组影响的研究被引量：4
- 2013年
- [目的]应用双向电泳及质谱技术研究白藜芦醇(Resveratrol,Res)对宫颈癌HeLa细胞蛋白质组的影响。[方法]经磺基罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法筛选对宫颈癌HeLa细胞有效的白藜芦醇浓度,流式细胞仪检测有效白藜芦醇浓度对HeLa细胞周期和凋亡的影响。HeLa细胞经白藜芦醇处理后,提取细胞总蛋白,应用双向电泳技术建立蛋白质组图谱,筛选白藜芦醇处理前后差异在2倍以上的蛋白质作为差异蛋白,进行质谱鉴定和生物信息学分析。[结果]50μmol/L以上浓度白藜芦醇24小时对HeLa细胞的活性产生影响,将细胞阻滞在S期,诱导HeLa细胞的早期凋亡,并呈剂量依赖性。通过差异蛋白质组分析筛选出12个差异蛋白质,包括原肌球蛋白、细胞核糖核蛋白C、锌指蛋白、钙连接蛋白、微管蛋白β、热休克蛋白70、α烯醇化酶、丙酮酸激酶、雌激素受体β、氨基甲酰磷酸合成酶,HeLa细胞经白藜芦醇处理后这些蛋白表达量均增加。[结论]白藜芦醇可能通过参与调节细胞的转移分化、凋亡、能量代谢等过程而起到抗肿瘤作用。
- 李毅卢德赵金丽丽岳静许健
- 关键词：白藜芦醇HELA细胞蛋白质组流式细胞仪
- 肝肾阴虚型甲亢和脾肾阳虚型甲减患者血清蛋白质组的比较分析被引量：2
- 2012年
- [目的]通过对肝肾阴虚型甲亢和脾肾阳虚型甲减患者血清蛋白质组的分析,阐述肝肾阴虚和脾肾阳虚的物质基础。[方法]将正常人、甲亢和甲减患者血清用亲和层析法除去其中的高丰度蛋白质,再用双向电泳技术分析不同组样品蛋白质组的变化,所获的差异蛋白质用质谱进行鉴定。[结果]与正常人相比,肝肾阴虚型甲亢患者血清中RBP和TTR的表达量降低,而IGF-2、FDA-C、NF-κB及PTP表达量升高;脾肾阳虚型甲减患者TTR表达量升高,NHE-1、ZAG、UCH、IGF-2和MHC–II蛋白则表达量下降。肝肾阴虚型甲亢和脾肾阳虚型甲减相比,ProapoA-Ⅰ和TTR表达量降低,而NDU、SCDH/SCR、PK、Cyt P450蛋白、IGF-2和IRF-5表达增加。[结论]肝肾阴虚型甲亢患者机体代谢活跃,而脾肾阳虚型甲减患者则机体代谢减低,合成代谢的速度>分解代谢的速度。肝肾阴虚型甲亢血清IGF-2表达升高,脾肾阳虚型甲减则正好相反,说明血清IGF-2具有成为中医辨证肝肾阴虚和脾肾阳虚血清标志物的可能性。
- 卢德赵宋俊玲王萍儿杨贞唐利华李毅沃兴德
- 关键词：肝肾阴虚脾肾阳虚甲亢甲减蛋白质组
- 姜黄素对非酒精性脂肪肝细胞胆固醇代谢的影响被引量：12
- 2014年
- [目的]探讨姜黄素对体外诱导的非酒精性脂肪肝模型细胞胆固醇代谢的影响及其机制。[方法]采用油酸诱导法建立非酒精性脂肪肝细胞模型,并用姜黄素进行处理,油红O染色观察细胞内脂质累积情况,酶法检测细胞内甘油三酯、游离胆固醇和总胆固醇含量,定量PCR检测SR-BΙmRNA和HMGCR mRNA的表达。[结果]30μg·mL-1油酸可成功建立非酒精性脂肪肝细胞模型,姜黄素干预后,脂肪肝细胞中甘油三酯和游离胆固醇减少,细胞内脂质积累减少,而总胆固醇无显著变化。姜黄素还能降低HMGCR mRNA表达,而增加SR-BⅠmRNA表达。[结论]姜黄素能够降低脂肪肝细胞游离胆固醇,其机制与其抑制内源性胆固醇的生物合成,促进外源胆固醇进入肝细胞进行代谢有关。
- 滕耀红祝骥庞珍珍王萍儿卢德赵
- 关键词：姜黄素胆固醇代谢非酒精性脂肪肝
- 漆黄素对泡沫细胞蛋白质组的影响
- 2017年
- 目的应用双向电泳和质谱技术研究漆黄素对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的泡沫细胞蛋白质组的影响,分析漆黄素抑制泡沫细胞形成的分子机制。方法采用MTT法检测ox-LDL对RAW264.7细胞及漆黄素对泡沫细胞活力的影响,化学法检测细胞内胆固醇酯(CE)的量,筛选合适的ox-LDL和漆黄素处理浓度。油红O染色法检测漆黄素对泡沫细胞内脂质累积情况的影响,并用双向电泳法建立漆黄素处理前后细胞蛋白质组图谱,质谱法鉴定差异表达的蛋白质;Western blotting法验证细胞色素b5(Cyt b5)的表达情况。结果 20μg/m L ox-LDL可以成功诱导泡沫细胞,100μg/m L漆黄素干预后,泡沫细胞内CE明显下降,脂质累积减少。蛋白质组学结果表明,漆黄素处理泡沫细胞后,Cyt b5、谷胱甘肽S-转移酶、NADH脱氢酶(泛醌)黄素蛋白2、Prelamin A/C、葡萄糖调节蛋白78、热休克蛋白60、Supervillin、胆固醇酰基转移酶表达量增加,而钙网蛋白、转录延伸因子B、蛋白核受体表达量下降。结论漆黄素可能通过增强细胞抗氧化及抗炎能力,减弱细胞应激反应、降低细胞内胆固醇堆积、调节细胞凋亡及提高免疫能力等途径起到抗动脉粥样硬化的作用。
- 许颖龄胡潇方来祝骥王萃杨贞卢德赵
- 关键词：漆黄素泡沫细胞动脉粥样硬化蛋白质组胆固醇酯氧化应激
- 丹参酮ⅡA对泡沫细胞胆固醇平衡的影响被引量：10
- 2012年
- 目的通过体外细胞实验阐明丹参酮ⅡA对泡沫细胞胆固醇平衡的影响。方法体外培养小鼠RAW264.7细胞,以氧化型低密度脂蛋白诱导为泡沫细胞模型,并用不同浓度的丹参酮ⅡA进行处理,通过油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,酶比色法定量检测细胞内总胆固醇和胆固醇酯的变化,荧光定量PCR和WesternBlot检测细胞中CD36、三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、肝脏X受体α(LXRα)、过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)及PPARγ的mRNA和蛋白表达。结果 0～20 mg/L的丹参酮ⅡA对泡沫细胞增殖活力无明显影响,20 mg/L丹参酮ⅡA干预后,泡沫细胞内胆固醇酯与总胆固醇的比值显著降低,细胞内脂质累积减少,并上调AB-CA1、LXRα和PPARα的mRNA和蛋白表达,但对CD36表达无明显作用。结论丹参酮ⅡA能抑制泡沫细胞的形成,其机制可能是通过诱导PPARα、LXRα和ABCA1表达,促进胆固醇的外排。
- 卢德赵林韬琦王萍儿杨贞沃兴德
- 关键词：泡沫细胞氧化型低密度脂蛋白
