广东省自然科学基金(9452404801001943)
- 作品数：15 被引量：80H指数：6
- 相关作者：潘进权罗晓春谢明权柯野李家洲更多>>
- 相关机构：湛江师范学院广东轻工职业技术学院华南理工大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目湛江市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 米曲霉碱性蛋白酶基因的克隆表达及水解特性被引量：7
- 2012年
- 米曲霉碱性蛋白酶对植物蛋白具有高效的水解能力和较好的脱苦作用.为了便于大量获得该酶以利于工业上的应用,文中通过RT-PCR克隆获得米曲霉碱性蛋白酶基因,将之转化到毕赤酵母KM71菌株中并成功表达,之后用该酶进行牛胰岛素氧化链B链及大豆和花生蛋白的水解试验.结果显示:在10 L发酵罐中诱导表达时,发酵液中重组碱性蛋白酶的酶活达4100U/mL;该蛋白酶最适反应pH值和温度分别为8.5～9.5和50℃,在pH值为6.0～10.0和温度低于40℃时具有较好的稳定性;该酶具有广泛的肽键选择性;该酶对大豆和花生蛋白显示出了强于部分商品化蛋白酶的水解能力.以上结果表明:该重组蛋白酶具有较大的开发利用潜力.
- 柯野陈丹李家洲谢明权罗晓春
- 关键词：米曲霉毕赤酵母克隆水解特性
- 毛霉发酵法制备豆渣可溶性膳食纤维的研究被引量：15
- 2012年
- 以豆渣为原料,采用毛霉发酵方法制备可溶性膳食纤维。采用单因素试验、部分析因设计、中心组合设计及响应面分析的方法对影响豆渣可溶性膳食纤维制备工艺的因素:培养基含水量、起始pH值、发酵温度、发酵时间等发酵工艺进行分析,并对其进行优化,确定相对较合适的发酵工艺条件:每支250mL三角瓶装干豆渣10g,加水调节其含水量为56.7%,添加蛋白胨2.33%、KH2PO40.57%、CaCl20.2%、吐温-80 0.2%,调节培养基起始pH6.0,接种后置于25℃发酵80h。在优化的工艺条件下,豆渣可溶性膳食纤维的得率可达42.2%。结果表明,毛霉发酵可以显著提高豆渣中可溶性膳食纤维的含量,应用该方法制备豆渣可溶性膳食纤维具有可行性。
- 潘进权伍惠敏陈雨钿
- 关键词：可溶性膳食纤维豆渣毛霉发酵
- 毛霉蛋白酶的催化特性及动力学研究被引量：3
- 2010年
- 从雅致放射毛霉胞外分离纯化出一蛋白酶组分,以酪蛋白为底物对其催化特性及动力学进行了分析。结果表明:该蛋白酶组分是一种碱性丝氨酸蛋白酶;在pH8.5～9.5、60℃具有最大催化活性,在pH6～9和低于45℃具有很好的稳定性;在40℃该蛋白酶水解酪蛋白的反应符合米氏方程:V=(22.85/S+8.857);在4～45℃的范围内,该蛋白酶水解酪蛋白反应的活化能Ea为44.09kJ;该蛋白酶在50℃不稳定,其热失活规律符合一级指数衰减动力学模型:a=exp(-0.218t)。
- 潘进权
- 关键词：雅致放射毛霉蛋白酶动力学
- 雅致放射毛霉AS3.2778亮氨酸氨肽酶的部分纯化及性质研究
- 毛酶蛋白酶对大豆蛋白有较高的水解效率以及对蛋白水解物良好的脱苦效果,因此在大豆多肽的制备方面显示出很好的应用前景。为了开发这一蛋白酶系,采用硫酸铵盐析、离子交换层析、疏水层析及凝胶层析等方法对毛霉胞外蛋白酶组分进行了分离...
- 潘进权
- 关键词：雅致放射毛霉纯化脱苦
- 毛霉AS3.2778脯氨酸氨肽酶的部分纯化及性质研究被引量：6
- 2011年
- 毛霉蛋白酶对大豆蛋白有较高的水解效率并对蛋白水解物有良好的脱苦效果,因此在大豆多肽的制备方面显示出很好的应用前景。为了开发这一蛋白酶系,实验中P采用硫酸铵盐析、离子交换层析、疏水层析及凝胶层析等方法对其进行了分离纯化,从雅致放射毛霉AS3.2778的发酵麸曲中部分纯化得到一氨肽酶组分,并对其性质进行了探讨。纯化的毛霉氨肽酶是一典型的脯氨酸氨肽酶,它对小肽N端的脯氨酸有非常强的水解能力;该氨肽酶在40～45℃、pH6.5有最大催化活性,在30℃以内,pH5.0～8.0有很好的稳定性;在所试验的几种蛋白酶抑制剂中,仅1 mmol/L的苯甲基磺酰氟(PMSF)对毛霉氨肽酶有抑制作用,由此说明纯化的毛霉氨肽酶可能是一种丝氨酸蛋白酶;常见金属离子对该氨肽酶活性的影响不明显;脱苦实验结果表明,纯化的毛霉氨肽酶对于大豆蛋白水解物的苦味有明显的去除效果。
- 潘进权
- 关键词：雅致放射毛霉纯化脱苦
- 雅致放射毛霉蛋白酶SP1基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2012年
- 雅致放射毛霉蛋白酶具有较好的脱苦味和水解豆类蛋白的能力.为了揭示其结构和功能的关系,促进其开发应用,文中通过RACE和PCR技术克隆获得丝氨酸蛋白酶SP1基因.根据生物信息学中的理论和方法,对SP1进行了较全面的预测和分析.结果表明:SP1基因由4个外显子和3个内含子组成,编码454个氨基酸残基.SP1属于蛋白酶K家族,与Rhizopus microsporus var.chinensis的丝氨酸蛋白酶同源性最高,亲缘关系最近.以蛋白酶K晶体结构(PDB code:1IC6)作为模板进行同源建模,通过对模拟结构的分析可知:SP1分子内无二硫键,具有1个Ca2+结合位点;SP1与蛋白酶K在底物结合区域、氢键、盐键和二硫键等方面均存在差异,这些差异可能就是SP1具有独特的水解作用和脱苦能力的原因.
- 柯野黄伟谦李家洲谢明权罗晓春
- 关键词：雅致放射毛霉丝氨酸蛋白酶基因克隆
- 雅致放射毛霉AS3.2778亮氨酸氨肽酶的部分纯化及性质研究
- 毛酶蛋白酶对大豆蛋白有较高的水解效率以及对蛋白水解物良好的脱苦效果,因此在大豆多肽的制备方面显示出很好的应用前景。为了开发这一蛋白酶系,采用硫酸铵盐析、离子交换层析、疏水层析及凝胶层析等方法对毛霉胞外蛋白酶组分进行了分离...
- 潘进权
- 关键词：雅致放射毛霉纯化脱苦
- 竹叶总黄酮提取工艺及抗氧化特性的研究被引量：21
- 2012年
- 为了考察湛江地区竹叶黄酮资源的可利用性,对该地区主要竹叶品种及不同生长周期竹叶中黄酮含量进行分析比较,并采用部分析因设计、中心组合设计及响应面分析的方法对黄酮含量较高的粉单竹竹叶总黄酮的提取工艺进行优化,确定的提取工艺条件是:甲醇体积分数71.3%,浸提温度81.5℃,浸提回流时间2h,料液比1:30。在优化的工艺条件下,粉单竹竹叶黄酮的提取率达到38.08mg/g,高于相关文献所报道的。竹叶黄酮抗氧化试验结果显示,竹叶黄酮对超氧负离子及羟基自由基均表现出较好的清除效果。本研究结果表明:竹叶黄酮是一种极具开发潜力的天然抗氧化剂。湛江地区的粉单竹竹叶可作为黄酮提取的优良原料。
- 潘进权张世英何敏婷庄梦玲
- 关键词：竹叶黄酮抗氧化响应面法
- 蛋白酶脱除大豆蛋白水解物苦味的研究进展被引量：7
- 2011年
- 主要概述大豆蛋白水解研究的起源,蛋白水解物的苦味以及苦味形成理论的研究进展。从蛋白酶催化特性的角度阐述了蛋白水解物苦味形成的直接根源,以及蛋白酶酶法脱苦的理论及研究概况,并对这一领域的研究前沿提出了自己的设想。
- 潘进权
- 关键词：蛋白水解物苦味蛋白酶
- 纳豆芽孢杆菌蛋白酶的制备及性质研究被引量：2
- 2011年
- 纳豆芽孢杆菌是纳豆发酵生产的主要菌种,对其胞外蛋白酶催化特性的研究有助于了解纳豆的发酵生产过程,并有利于从中发掘有开发应用潜力的蛋白酶。实验从不同纳豆产品中分离筛选得到1株高产蛋白酶的纳豆芽孢杆菌,对其胞外蛋白酶的催化特性及活性影响因子进行了分析。结果显示,纳豆芽孢杆菌蛋白酶是一典型的金属蛋白酶,EDTA几乎可完全抑制其活性,Ca2+是其活性中心的辅基;该蛋白酶在60℃、pH 7.0有最大催化活性,在pH 6～9和低于45℃条件下具有很好的稳定性;50℃时,该蛋白酶会缓慢失活,其热失活规律符合一级指数衰减模型:a=0.124+0.887e(-0.45t);该蛋白酶对大豆蛋白有很强的水解能力,其水解效率与Alcalase蛋白酶相当,可以实现底物蛋白的深度水解,具有一定的开发应用价值。
- 潘进权邓社兴梁亚眉
- 关键词：纳豆芽孢杆菌蛋白酶
