军队“十一五”面上项目(06-MB238)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：孔佩艳陈幸华梁雪曾东风高蕾更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：军队“十一五”面上项目重庆市医学重点学科建设基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HIF-1α基因miR RNAi慢病毒载体的构建与鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的构建人HIF-1α的mi R RNAi慢病毒载体。方法利用已经构建成功的针对人HIF-1α基因的mi RNA干扰质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFP-HIF-1αmi R,通过BP/LR反应,将EmGFP-HIF-1α-mi R表达框整合重组到产毒质粒pLenti6/V5-DEST中测序鉴定,用PLP1、PLP2和PLP/VSVG质粒共转染包装293FT细胞产毒,并利用GFP蛋白表达水平进行滴度测定。结果经测序鉴定证实成功构建针对人HIF-1α基因的mi RNA慢病毒干扰载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-HIF-1αmi R。结论成功构建针对人HIF-1α基因的mi RNA慢病毒RNA干扰载体。
- 曾东风孔佩艳陈幸华张曦梁雪高蕾彭贤贵王庆余
- 关键词：RNA干扰(RNAI)慢病毒
- 人HIF-1αRN干扰质粒构建及其转染人急性髓性白血病骨髓基质细胞
- 2007年
- 目的构建人HIF-1α的miRNA干扰表达载体并转染人急性髓性白血病骨髓基质细胞。方法设计合成针对人HIF-1α基因的miRNA前体寡核苷酸,通过退火成为双链DNA片段,以T4 DNA连接酶与线性化pcDNA(tm)6.2-GW/EmGFP-miR质粒连接,构建含HIF-1α前体miRNA的重组质粒。经测序鉴定后,通过脂质体介导转染人急性髓性白血病骨髓基质细胞。结果经测序鉴定针对人HIF-1α基因的miRNA干扰质粒构建成功,并能够成功转染人急性髓性白血病骨髓基质细胞。结论成功构建针对人HIF-1α基因的miRNA干扰质粒并转染人急性髓性白血病骨髓基质细胞,为后续研究HIF-1α基因在人急性髓性白血病骨髓基质的功能奠定基础。
- 曾东风孔佩艳陈幸华彭贤贵梁雪
- 关键词：HIF-1ΑRNA干扰急性髓性白血病基质细胞
- 缺氧诱导因子-1α和PTEN、P53在急性髓性白血病骨髓基质细胞中的表达及意义被引量：8
- 2007年
- 目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和PTEN、P53在急性髓性白血病骨髓基质细胞中的表达及意义。方法分离培养28例急性髓性白血病患者和22例正常对照样本骨髓基质细胞,RT-PCR检测HIF-1αmRNA的表达,免疫组织化学技术检测基质细胞HIF-1α和PTEN、P53蛋白表达和分布。结果急性髓细胞白血病(AML)组HIF-1αmRNA和蛋白表达率显著高于对照组(P<0.05),AML组P53蛋白表达率显著高于对照组(P<0.05),而PTEN表达率显著低于对照组(P<0.01)。HIF-1α在骨髓基质细胞的阳性表达与P53的高表达和PTEN的低表达相关联(P<0.05)。结论HIF-1α可能是白血病异常骨髓造血微环境形成过程中的重要调控因子,HIF-1α的表达可能与PTEN和P53基因表达调控相关。
- 曾东风孔佩艳陈幸华张曦常城梁雪高蕾
- 关键词：PTENP53急性髓性白血病基质细胞
