国家自然科学基金(81201854)
- 作品数：13 被引量：150H指数：6
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- 相关机构：内蒙古医科大学内蒙古医科大学附属医院更多>>
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- LASS2/TMSG-1基因沉默对人前列腺癌细胞生物学功能的影响及其机制被引量：10
- 2014年
- 目的探讨LASS2/TMSG-1基因沉默对PC-3M-2B4细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法将实验分为3组:空白对照组(仅转染PBS的PC-3M-2B4细胞)、无关阴性对照siRNA组及LASS2/TMSG-1 siRNA转染组。首先针对LASS2/TMSG-1基因,设计并合成siRNA;在脂质体介导下瞬时转染人前列腺癌PC-3M-2B4细胞24 h后分别采用Western blot和RT-PCR技术检测细胞内LASS2/TMSG-1蛋白及ATP6L mRNA表达水平;使用BCECF AM H+敏感荧光探针检测转染24、36、48、96 h后3组细胞的细胞内H+浓度;用MTT法检测细胞增殖;划痕修复实验和Transwell体外侵袭实验分别检测PC-3M-2B4细胞的迁移和侵袭能力。结果转染LASS2/TMSG-1 siRNA 24 h后,LASS2/TMSG-1 siRNA组LASS2/TMSG-1蛋白表达与对照组相比下降65%,ATP6L mRNA表达水平与对照组比较提高75%。通过BCECF AM荧光探针检测LASS2/TMSG-1 siRNA转染组细胞内H+浓度明显下降,且与空白对照组及无关阴性对照siRNA组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法检测显示,PC-3M-2B4细胞在转染24、48 h后,3组细胞生长速度无明显差异(P>0.05);转染72 h后LASS2/TMSG-1 siRNA转染组细胞生长速度明显升高,与空白对照组、无关阴性对照siRNA组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。划痕修复试验和Transwell体外侵袭实验显示,转染LASS2/TMSG-1 siRNA 24 h后,与空白对照组及无关阴性对照siRNA组相比,能显著促进细胞迁移和侵袭能力(P<0.05)。结论体外合成的siRNA能有效沉默LASS2/TMSG-1基因表达,同时上调V-ATPase质子泵中关键性亚基—ATP6L mRNA的表达水平,且基因沉默后其细胞内H+浓度下降,提示LASS2/TMSG-1基因可能与ATP6L相互作用、共同参与对细胞内pH值的影响,导致肿瘤细胞内外微环境的改变并影响肿瘤细胞的生物学行为,如增殖、迁移及侵袭能力。
- 徐晓艳
- 关键词：前列腺肿瘤SIRNA
- 特异性小片段干扰RNA降低人源性长寿保障基因2/肿瘤转移抑制基因-1表达对人前列腺癌细胞株侵袭转移能力的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 观察人源性长寿保障基因2（LASS2）/肿瘤转移抑制基因-1（TMSG-1）对人前列腺癌细胞株侵袭转移能力的影响.方法 首先采用小片段RNA干扰技术沉默人前列腺癌细胞株PC-3M-2B4（低转移潜能）中LASS2/TMSG-1的表达,并通过实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术、免疫细胞化学法筛选干扰效率最高的小干扰RNA （siRNA）后,选取干扰效率最高的siRNA-2进行后续实验,通过体外侵袭实验、细胞划痕实验及黏附实验检测干扰LASS2/TMSG-1基因前后,PC-3M-2B4细胞侵袭转移能力的改变.结果 筛选出4条siRNA,以空白对照为1,siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及siRNA-4的LASS2/TMSG-1 mRNA表达量分别为1.557、0.155、0.369及0.193;siRNA-2转染组穿膜细胞数为（21.20±1.21）个,细胞的侵袭能力明显高于无关阴性对照组[（l0.07±1.39）个]和空白对照组[（11.00±1.97）个,P＜0.01];siRNA-2转染组细胞划痕修复率[（64.90±0.56）％]明显高于无关阴性对照组[（26.46±0.31）％]和空白对照组[（22.18±0.57）％],差异有统计学意义（P＜0.01）;细胞黏附30、60 min后,与无关阴性对照组[（29.83±0.15）％、（49.90±0.35）％]、空白对照组[（30.37±1.27）％、（50.20±0.06）％]比较,siRNA-2转染组细胞黏附率[（10.10±0.27）％、（30.37±0.30）％]明显下降,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 通过RNA干扰技术证实了LASS2/TMSG-1在肿瘤侵袭转移中的作用,证明它是一种肿瘤转移抑制基因.
- 徐晓艳武彦
- 关键词：前列腺癌
- 缩短快速冰冻切片制片时间的新方法被引量：6
- 2014年
- 目的探讨缩短快速冰冻切片制片时间的新方法,进而改善冰冻切片染色效果。方法本实验对固定液进行了改进,采用甲醇和甲醛混合液作为固定剂来固定冰冻切片组织,能有效缩短快速冰冻切片的制片时间;实验中采用常规的冰冻切片方法进行切片,用改进后的固定液固定冰冻切片组织,然后常规HE染色,最后采用碱性水(30-50℃的洗衣粉水)返蓝,封片。结果使用此方法制片,切片时间可控制在3 min左右,染色时间仅用5 min,切片完整,细胞核、细胞质、细胞膜等清晰度增加;另外,此方法操作简便、经济、快速,易于掌握。结论通过对固定液的改进,采用碱性水(30-50℃的洗衣粉水)返蓝,有效地提高了快速冰冻切片的染色质量;并且制片时间缩短,方法简便快捷,能准确快速地为病理医生提供优质的冰冻染色切片。
- 王玉芳徐晓艳
- 关键词：冰冻切片染色方法
- 肝脏原发性透明细胞癌1例
- 2016年
- 患者男性，47岁。因肝区胀痛5个月入院。MRI示肝脏外形无异常，各叶比例正常，肝左叶内侧段可见类圆形稍长T2、稍长T1信号，边界清晰，大小40.5mm×33mm×35.2mm（图1），反相位信号明显减弱，DWI呈稍高信号。
- 安若然李时荣于慧玲徐晓艳
- 关键词：肝脏肿瘤透明细胞癌病例报道
- 非小细胞肺癌中MMP-9和MMP-13的表达及意义被引量：23
- 2014年
- 目的分析MMP-9和MMP-13在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及相关性,探讨二者与NSCLC临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测88例NSCLC和18例癌旁正常肺组织中MMP-9、MMP-13的表达。结果 MMP-9与MMP-13在NSCLC中的阳性率均高于癌旁正常肺组织(P<0.05)。MMP-9表达与患者年龄、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);MMP-13表达与分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。NSCLC中MMP-9与MMP-13的表达呈正相关(P<0.05)。MMP-9和MMP-13阳性组的生存率均低于阴性组,差异有显著性(P<0.05);且肿瘤大小、淋巴结转移和MMP-13阳性表达与NSCLC的预后密切相关(P<0.05)。结论 MMP-9与MMP-13均与NSCLC的侵袭、转移及预后密切相关,MMP-13可能主要通过激活MMP-9途径来参与NSCLC的侵袭、转移。
- 徐晓艳裴陆田李秀霞
- 关键词：肺肿瘤非小细胞肺癌MMP-9MMP-13免疫组织化学
- 与肺癌相关的靶基因研究简介被引量：6
- 2016年
- 肺癌是目前全世界发病率最高的恶性肿瘤,其病死率也居于前列。因此,肺癌的早期诊断及早期治疗对于降低肺癌患者的病死率以及改善患者生存质量至关重要。近年来有关肺癌早期诊断、治疗及预后的分子标志物的研究愈来愈受到关注。在肺癌中,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)占绝大多数。针对晚期NSCLC,肿瘤分子靶向治疗日趋重要。因此,从分子水平研究肺癌的发病机制和诊断,对肺癌的防治有重大意义。近些年,对基因水平方面的研究也取得了很大进展。现对与肺癌相关的靶基因最新研究进行展综述如下。
- 王雅梅徐晓艳
- 关键词：肺癌靶基因分子水平发病机制
- 肿瘤侵袭转移机制研究进展被引量：65
- 2014年
- 侵袭和转移是恶性肿瘤的特性,也是患者主要死亡原因。了解恶性肿瘤侵袭、转移发生机制,寻找相应阻断途径对遏制恶性肿瘤发展有重要作用。肿瘤细胞侵袭和转移过程主要受肿瘤转移基因与肿瘤转移抑制基因、肿瘤血管生成、细胞外基质降解、细胞黏附、肿瘤微环境等因素影响。本文就恶性肿瘤细胞侵袭与转移机制的研究进展作一综述。
- 伊日贵徐晓艳李时荣
- 关键词：肿瘤
- LASS2/TMSG-1基因过表达对人肺癌95D细胞体外侵袭迁移能力的影响及其机制被引量：5
- 2016年
- 目的分析LASS2/TMSG-1基因过表达对人肺癌95D细胞体外侵袭迁移能力的影响,初步探讨LASS2/TMSG-1基因的作用机制。方法运用脂质体转染法将前期已构建好并冷冻保存的Pc DNA3-TMSG-1质粒通过脂质体转染法瞬时转染入95D细胞(高转移潜能,LASS2/TMSG-1低表达),使外源性LASS2/TMSG-1基因在细胞内过表达即LASS2/TMSG-1过表达组,同时设立转染空白质粒的空白对照组和未转染质粒的阴性对照组。应用体外侵袭及迁移实验检测人肺癌95D细胞侵袭及迁移能力的变化;应用qRT-PCR和Western blot法检测LASS2/TMSG-1 mRNA及蛋白的表达;应用Western blot法检测ATP6L、MMP-2及MMP-9在细胞中的表达水平;应用明胶酶谱法检测肿瘤细胞中MMP-2及MMP-9的活性;使用比色法检测细胞中V-ATPase的活性;使用BCECF H+敏感探针检测细胞外H+浓度的变化。结果 LASS2/TMSG-1过表达组细胞的LASS2/TMSG-1表达水平明显升高,而ATP6L表达水平下降,其V-ATPase活性及细胞外H+浓度降低,与空白对照组和阴性对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05);MMP-2、MMP-9的表达及活性均降低,与其他两组相比差异有统计学意义(P<0.05);并且LASS2/TMSG-1过表达组细胞的体外侵袭及迁移能力明显低于其他两组(P<0.05)。结论 LASS2/TMSG-1可能通过结合ATP6L亚基抑制V-ATPase活性,改变细胞外H+浓度,影响MMP-2、MMP-9的表达及活性,进而改变肿瘤细胞的体外侵袭迁移能力等生物学行为。
- 徐晓艳伊日贵李秀霞于慧玲李时荣
- 关键词：肺肿瘤V-ATPASE基质金属蛋白酶
- 不同转移潜能人肺癌细胞系中LASS2/TMSG-1的表达及其意义被引量：1
- 2016年
- 目的探讨LASS2/TMSG-1在不同转移潜能人肺癌细胞系中的表达及其意义。方法培养95C细胞(人肺巨细胞癌低转移亚系)和95D细胞(人肺巨细胞癌高转移亚系)。采用MTT增殖实验、Transwell侵袭实验、划痕修复实验检测95C和95D细胞的增殖、侵袭及迁移能力;分别用RT-PCR和Western blot法检测两株细胞中LASS2/TMSG-1 mRNA和LASS2/TMSG-1、MMP-9、MMP-13蛋白的表达水平。结果 MTT增殖实验显示,培养至第2-5天,95D细胞的增殖能力强于95C细胞(P<0.05);95D细胞的侵袭能力显著高于95C细胞(t=-20.62,P<0.05);划痕修复实验证实95D细胞的迁移能力强于95C细胞(t=23.56,P<0.05)。LASS2/TMSG-1的mRNA和蛋白在95C细胞中的表达明显高于95D细胞中的表达,差异具有显著性(P<0.01)。MMP-9及MMP-13蛋白在95C细胞中的表达明显高于在95D细胞中的表达(t=-7.009,-13.042;均P<0.01)。结论 LASS2/TMSG-1的mRNA和蛋白在人肺癌低转移亚系95C中的表达显著高于在高转移亚系95D细胞中的表达。该基因可能参与抑制人肺癌细胞的增殖、侵袭及迁移过程,并且可能通过其下游基因MMP-9、MMP-13发挥重要的作用。
- 徐海芹李时荣翁立新王静媛海玲徐晓艳
- 关键词：肺癌逆转录-聚合酶链反应
- 人类长寿保障基因2／肿瘤转移抑制基因l基因过表达对人肺癌细胞的影响被引量：2
- 2017年
- 人类长寿保障基因2／肿瘤转移抑制基因1（LASS2／TMSG-1）基因是近年来新年来新发现的一种肿瘤转移抑制基因，目前关于LASS2／TMSG-1基因对肿瘤细胞影响的研究多在肝癌、前列腺癌、乳腺癌，而对于肺癌的研究较少。
- 李时荣伊日贵左华楚徐晓艳
- 关键词：肿瘤转移抑制基因基因过表达人肺癌细胞肿瘤细胞前列腺癌
