国家自然科学基金(81102899)
- 作品数：13 被引量：22H指数：3
- 相关作者：张芳邱郑徐春蕾郑珩王旻更多>>
- 相关机构：中国药科大学南京中医药大学郑州大学第五附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省政府留学奖学金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 天花粉蛋白结合肽的筛选及潜在靶点蛋白的同源分析
- 2020年
- 目的通过噬菌体展示技术,筛选天花粉蛋白(TCS)的结合多肽,并通过蛋白质同源分析,研究TCS在体内可能直接作用的靶点蛋白。方法用构建的十五肽库和购买的十二肽库分别对TCS进行4轮固相亲和筛选,并通过噬菌体ELISA检验阳性克隆与靶蛋白的亲和力,对阳性克隆进行测序,并将多肽序列与已登记蛋白序列进行同源性分析。结果每轮筛选的回收率,及多克隆噬菌体ELISA结果显示筛选有效。通过单克隆噬菌体ELISA结果挑取阳性克隆,测序分析得到若干噬菌体展示多肽序列。经蛋白质同源性分析,TCS特异性结合多肽与蛋白激酶C(PKC)的磷酸化位点具有同源序列。结论噬菌体展示技术是筛选中药成分靶点蛋白的有效手段,PKC可能为TCS潜在的靶点蛋白。
- 赵峻时磊张芳
- 关键词：噬菌体展示天花粉蛋白同源分析
- 耐热阿拉伯糖苷酶三维结构模拟和底物对接分析被引量：2
- 2013年
- 阿拉伯糖苷酶能催化L-阿拉伯糖和木糖间糖苷键的水解,在半纤维素降解及阿拉伯糖制备过程中有重要作用。源自乙醇热厌氧杆菌Thermoanaerobacter ethanolicus的阿拉伯糖苷酶具有阿拉伯糖苷酶和木糖苷酶的双重活性,且具有高度的热稳定性。为深入研究该酶的催化机理,预测了该酶的空间结构和活性中心关键残基,以便指导进一步的实验研究;使用同源模建的方法,以Thermotoga neapolitanaβ-糖苷酶3b的结构为模版,模建了T.ethanolicus阿拉伯糖苷酶的结构,并使用分子对接的方法,将底物对硝基苯基-L-阿拉伯糖苷(pNPAP)和对硝基苯基-D-木糖苷(pNPX)对接到酶的活性中心;预测的底物-酶复合物结构表明酶活性中心Asn90、Arg164、Lys201、Asp281等残基在底物结合和水解过程中可能发挥有重要的作用。
- 吴文明劳兴珍郑珩
- 关键词：阿拉伯糖苷酶同源模建分子对接活性位点
- 噬菌体展示技术与中药活性成分靶点蛋白筛选研究被引量：3
- 2013年
- 噬菌体展示技术是将所需多肽/蛋白从大量变异体的集落中提取出来的一种高通量的体外筛选技术,因其高效、实用、便捷的优势现已广泛应用于药物研发的多方面领域,在中药活性成分靶点蛋白中也有越来越广泛的应用。靶点蛋白是药物分子在体内的结合位点,良好的靶点是获得优良药物的基础。该文综述了噬菌体展示技术的研究进展及其在中药活性分子靶点蛋白筛选中的应用。
- 张芳邱郑
- 关键词：噬菌体展示技术中药活性成分
- 浊点系统中红酵母静息细胞生物还原3，5-二(三氟甲基)苯乙酮被引量：1
- 2012年
- 以红酵母静息细胞为生物催化剂,在由两种不同浊点的表面活性剂组成的浊点系统中对3,5-二(三氟甲基)苯乙酮进行生物转化,以生产3,5-二(三氟甲基)苯乙醇。分别考察了浊点系统对细胞生长和转化过程的影响。在细胞培养阶段表面活性剂Triton X-114(TX-114)能够大大提高细胞对毒性底物的耐受能力。表面活性剂浓度5%,底物浓度6 l/ml时,浊点系统的产物浓度为5.47 mg/ml,转化率为80.5%,分别比两相系统提高91.3%和78.1%。细胞经4次循环使用,活性仍保持80%以上。
- 张芳王旻李莉秦静怡
- 关键词：生物还原
- 基于士的宁和马钱子碱为主要活性成分的马钱子抗肿瘤活性研究被引量：6
- 2014年
- 近年来,马钱子及其有效成分士的宁和马钱子碱的抗肿瘤活性得到了广泛研究,对多种不同类型的肿瘤均有抑制作用,而且对肿瘤发生、侵入的各环节均具有作用,过程中影响细胞内多种肿瘤药物靶标,呈现出多靶点、多功能的典型特点。文章综述了近年来利用马钱子、士的宁和马钱子碱进行抗肿瘤研究的现状。
- 张芳徐春蕾王筱曚邱郑
- 关键词：马钱子马钱子碱抗肿瘤
- 三白草酮及衍生物的溶解性和保肝活性研究被引量：1
- 2014年
- 目的考察三白草酮及衍生物的溶解性和保肝活性。方法采用HPLC测定三白草酮及衍生物在常用溶剂中的溶解度和正辛醇-水/缓冲液体系中的表观脂水分配系数(P);采用CCl4小鼠肝损伤模型考察其保肝活性。结果 25℃时三白草酮及衍生物A、B、C在水中的溶解度分别为(0.161±0.007),(12.4±0.57),(0.145±0.006),(0.667±0.031)mg/L;在正辛醇/水中的lgP分别为(3.32±0.13),(2.63±0.08),(3.28±0.08),(2.76±0.09);衍生物A的保肝降酶活性较三白草酮有所提高,衍生物B与三白草酮相当,衍生物C有肝损伤作用。结论衍生物A的lgP比三白草酮降低较多,可能会通过改善体内吸收提高药效;衍生物C的lgP虽有下降,但三白草酮中一个次甲二氧基被破坏,显示出肝损伤作用。
- 徐春蕾薛平吴玉兰张芳李祥
- 关键词：衍生物溶解度HPLC保肝活性
- 叶酸受体α真核表达载体的构建及在HEK293细胞中表达的鉴定被引量：1
- 2013年
- 从高表达叶酸受体α的卵巢癌细胞株SKOV3中提取总RNA,RT-PCR扩增FRα基因片段,使用HindⅢ和EcoRⅠ双酶切后克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,对其进行酶切及测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染入人胚肾细胞HEK293中,并利用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色检测细胞内FRα基因的表达情况。通过RT-PCR扩增得到750 bp左右的FRα基因片段,并构建了真核表达重组质粒,经酶切、测序鉴定正确。转染HEK293细胞后,RT-PCR检测到细胞中FRαmRNA的存在,Western blot、细胞免疫荧光证明FRα蛋白在细胞中的表达。成功构建了FRα基因的真核表达重组质粒,该质粒可在真核细胞中表达FRα蛋白,这些实验结果为卵巢癌基因疫苗的研究奠定了基础。
- 刘欣欣邱郑王筱萌邢黎军张娟张芳王旻
- 关键词：卵巢癌叶酸受体Α真核载体DNA疫苗
- 药效团技术在抗感染新药研究中的应用被引量：2
- 2013年
- 药效团(pharmacophore)是指药物分子中对活性起重要作用的"药效特征元素"及其空间排列形式。药效团技术作为1种发展迅速的计算机辅助药物设计方法,已广泛应用于虚拟筛选、全新药物设计、先导化合物优化和ADMET预测等新药的设计和研发过程中,可提高药物研发的成功率,降低研发成本,缩短研发周期。近年来,禽流感、甲流感及超级细菌等新型传染性疾病的出现,为抗感染新药研发提出了新的挑战,为此,综述近年来国内、外发表的有关药效团模建技术的研究进展及其在抗感染新药研发中应用的文献以促进计算机辅助药物设计手段在抗感染新药研发中的应用。
- 肖静房咪陈姣郑珩
- 关键词：药效团抗感染
- 金属β-内酰胺酶TMB-1三维结构模建及活性位点的分析
- 2013年
- 目的:模拟金属β-内酰胺酶TMB-1三维结构,分析其结构特点与水解活性之间的关系。方法:运用DS 2.5版软件搜索模板、序列比对和构建模型,用Ramanchandran图和3D Profile程序验证模型,经分子动力学优化与水解后氨苄西林Libdock对接,再经动力学优化后与NDM-1重叠分析模型活性位点关键残基。结果:经Ramanchandran图和3D Profile分析,表明TMB-1蛋白模建结构较为合理;重叠分析显示其空间结构为与其他金属β-内酰胺酶类似的αββα折叠,其锌配位残基具有高度的序列和结构保守性。结论:TMB-1相比NDM-1活性位点Loop3和Loop10上氨基酸残基自由度的降低可能是造成特异水解活性重要原因之一。
- 黄灿陈姣劳兴珍郑珩
- 关键词：同源模建
- HPLC-MS法测定大鼠血浆中双-O-甲基四氢呋喃愈创木素B的浓度及药代动力学参数
- 2012年
- 目的建立测定大鼠血浆中双-O-甲基四氢呋喃愈创木素B(DiB)含量的高效液相色谱-电喷雾离子化-质谱(HPLC-ESI-MS)联用的分析方法,并用于其在大鼠体内的药代动力学研究。方法 SD大鼠6只,单剂量静脉注射(10mg.kg-1)DiB,以三白草酮为内标,用HPLC-MS法测定给药后血浆中的药物浓度,并用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果 DiB的血药浓度在0.025～5.0 mg.L-1范围内线性关系良好,最低定量限为0.025 mg.L-1,提取回收率≥91.1%,日间、日内RSD≤10.0%。大鼠单剂量尾静脉注射DiB 10 mg.kg-1后,主要动力学参数AUC(0-t)、T12β、CL、V1分别为:(11.44±2.44)mg.h.L-1、(3.73±1.30)h、(0.65±0.14)L.h-1.kg-1、(3.36±3.19)L.kg-1。结论该方法操作简便、灵敏、快速、专属性强,可用于DiB的血药浓度检测及药代动力学研究。
- 徐春蕾刘史佳居文政陈勇张芳李祥
- 关键词：HPLC-MS药代动力学
