广东省自然科学基金(5001756)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 相关作者：张金明储海函黄红军梁伟强左中男更多>>
- 相关机构：中山大学附属第二医院佛山市第一人民医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 兔骨髓间充质干细胞构建组织工程化海绵体尿道的可行性被引量：7
- 2007年
- 目的:探索以骨髓间充质干细胞为种子细胞构建组织工程化海绵体尿道的可行性。方法:实验于2004-11/2006-03在中山大学第二附属医院医学科研中心完成。①参照张金明等报道的方法,制备脱细胞尿道海绵体-尿道基质,并行组织学检查观察脱细胞效果。②分离兔骨髓间充质干细胞,鉴定其表型,体外培养增殖后种植于兔脱细胞尿道海绵体-尿道基质上。③48只兔随机均分为实验组、对照组,每组24只。实验组用种植有干细胞的脱细胞基质即组织工程尿道修复部分切除的兔海绵体尿道,对照组组仅用脱细胞基质修复。④术后观察动物排尿情况,并于术后1,2,4,8,12,24周切取标本,看有无狭窄及腔面一般性状并行组织学检查,比较两者差异。结果:两组共48只兔全部进入结果分析。①自行制备的组织工程支架和种子细胞鉴定结果:所制备脱细胞基质质地柔软,镜下未见细胞成份;分离培养的细胞表型为CD45阴性,CD166,CD29,CD105阳性,符合骨髓间充质干细胞特征。②术后动物及标本一般观察:实验组术后2周时发现1例尿瘘;对照组2周时发现1例尿瘘,8,12,24周时分别发现各1例尿道狭窄。其余实验动物在拔除导尿管后排尿通畅。③两组兔再造尿道组织学检查结果:实验组自术后2周开始,组织学检查见血管和平滑肌逐渐增多;24周时,尿道腔面光滑,可见和正常尿道海绵体类似的组织结构。对照组自2周起可见血管,4周起可见平滑肌再生,24周时血管和平滑肌形成仍较少,较多纤维瘢痕,且无窦样组织形成,再造尿道腔面不如实验组光滑。结论:以骨髓间充质干细胞为种子细胞,脱细胞尿道海绵体为基质,构建组织工程化尿道海绵体,移植修复兔海绵体尿道缺损,可形成类似于正常尿道海绵体的组织结构。
- 黄红军张金明储海函
- 关键词：间充质干细胞尿道
- 异种脱细胞海绵体尿道基质修复兔尿道缺损被引量：4
- 2007年
- 目的:探索应用猪脱细胞尿道基质修复兔尿道缺损的可行性。方法:实验于2004-01/12在中山大学第二附属医院实验中心完成。实验分组及方法:取新西兰雄性大白兔52只,体质量2.5～3.5kg;雄性家猪6只,体质量100kg左右。将大白兔随机分为实验组:用猪脱细胞海绵体尿道基质修复兔尿道缺损;自体尿道黏膜组:用镶嵌有自体尿道黏膜上皮的猪脱细胞海绵体尿道基质修复尿道缺损;对照组:未行手术作对照,其中实验组和自体尿道黏膜组每组24只,对照组4只。实验评诂:术后1,2,4,8,12,24周行逆行尿道造影,麻醉后处死动物,取再造尿道标本作组织病理学检查。结果:纳入大白兔52只,均进入结果分析。所有实验动物存活,除2例发生狭窄、2例发生尿瘘外,其余均取得满意效果。组织学观察显示,术后2周自体尿道黏膜组再造尿道管腔完全上皮化,4周实验组再造尿道腔面完全上皮化。在再造尿道的组织中,术后1个月时开始有血管生长,3个月时有平滑肌细胞生长;6个月时平滑肌及胶原纤维排列整齐,血管数量接近正常尿道的血管数量。结论:猪脱细胞海绵体尿道基质可以一期再造兔尿道,镶嵌自体尿道黏膜可以加速再造尿道管腔的上皮化。
- 徐路生张金明左中男储海函
- 关键词：脱细胞基质尿道尿道再造
- 兔肌源性干细胞分离培养及诱导分化为神经细胞的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨兔肌源性干细胞（MDSC）分离纯化及诱导分化为神经细胞的方法。方法取2—3周龄新西兰兔大腿肌肉，采用改进的Preplating技术分离MDSC，并应用流式细胞仪（FCM）、免疫细胞化学检测细胞表型。添加神经生长因子、全反式维甲酸、β-巯基乙醇诱导MDSC分化为神经细胞并运用免疫细胞化学和FCM检测特异性神经巢蛋白（Nestin）的表达。结果经过连续6d的差速贴壁分离得到小圆形及小菱形细胞，传代后进一步纯化，FCM结果显示这些细胞〉90％为desmin^＋，〉90％为bcl-2^＋，〉95％为CD45^-。免疫细胞化学显示大多数细胞为desmin^＋及bcl-2^＋。诱导后的细胞〉90％为Nestin^＋．结论采用改进的Preplating技术能很好地分离出MDSC，并能在体外诱导分化为神经细胞，为构建组织工程化尿道海绵体提供种子细胞。
- 董月桐冀晨阳张金明
- 关键词：肌源性干细胞神经细胞分化
- 兔肌源性干细胞的生物学特性及表型研究被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨兔肌源性干细胞(MDSCs)的分离及特征和表型研究。方法:取1.5月龄新西兰兔大腿肌肉,采用差速贴壁分离Prep late技术,分别用Ⅺ胶原酶、d ispase蛋白酶以及胰蛋白酶分步消化肌肉,并用差速贴壁法分离晚期贴壁的细胞,流式细胞仪(FCM)、免疫细胞化学以及W estern b lotting等检测初步确定细胞表型。结果:进行连续6 d的差速贴壁分离。第3 d开始得到较多量的圆形或短梭形细胞,簇样生长,体积明显小于骨骼肌细胞及其它杂细胞,10 d左右汇合,有极强的融合生长倾向。细胞在汇合度<30%传代可较好地保持原形态,流式细胞仪检测示MDSCs>80%为desm in+,>70%为Bc l-2+,>95%为CD45-,免疫细胞化学定性示desm in+。W estern b lot-ting检测显示随着细胞的纯化,α-SMA表达越来越弱。而细胞高汇合度(>50%)或低血清培养时极易融合成肌管或肌细胞链,skeletalmyosin+。结论:MDSCs具有desm in、Bc l-2高水平表达和CD45极低水平表达的特性,具有多向分化能力的MDSCs是组织工程研究的一种新型种子细胞。
- 张金明何涛梁伟强黄红军
- 关键词：肌源性干细胞
