浙江省科技计划项目(2009C33040)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：王慧利齐云玲包其郁章颖雍静茹更多>>
- 相关机构：温州医学院更多>>
- 发文基金：浙江省科技计划项目国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 大肠杆菌质粒解离后致死基因分布及多态性分析
- 2011年
- 目的通过对来自小同年份大肠杆菌质粒DNA序列进行商通量测序，从质粒基因组水平分析大肠杆菌质粒DNA所携带的解离后致死基因的种类、数量以及多态性。方法收集4年临床分离非重复的320株大肠杆菌。菌株分为两个部分，碱裂解法提取全部质粒DNA，Solexa测序获得大规模的短序列。采用比较基因组学方法分析两个样本所含的解离后致死基因类型及丰度的差异，研究解离后致死基因存在的核苷酸多态位点。结果测序法获得两批数据，E1短序列总数为11077768，叮以定位到参照序列上为5019（0．045％）。E2短序列总数为9377792，可以定位到参照序列上是4952（0．053％）。两个样本中共有9个解离后致死基因型，其中hok基阕丰度最高。5个基因型共发现29个单核苷酸多态性（SNPs）位点，约33％为非同义突变。同一个位点的A、G二核苷酸多态现象常见。结论已知的大肠杆菌解离后致死基因的9个基因型，在温州地区分离的大肠杆菌质粒上均有发现，其中hok基因出现频率最高，共5个基因型存在多态性。
- 高国辉齐云玲孙倩宋智健宋玉龙李劲松王慧利包其郁丁力
- 关键词：大肠杆菌质粒单核苷酸多态性
- 螺旋藻耐盐相关基因启动子区功能分析被引量：2
- 2011年
- 文章利用绿色荧光蛋白基因作为报告基因,研究2个螺旋藻耐盐相关基因启动子区域的功能。通过启动子预测软件预测螺旋藻耐盐相关基因5′端非翻译区的启动子结构,用Primer3.0程序在线设计引物,以pMD18-T载体和pUC18载体克隆螺旋藻启动子序列、gfp和卡那霉素抗性基因,将螺旋藻启动子-GFP基因-卡那霉素抗性基因（pro-gfp-kanr）三联DNA片段克隆至pKW1188载体,并将该重组质粒pKW1188：：pro：：gfp：：kanr转化至受体菌集胞藻6803,激光共聚焦显微镜观察不同盐浓度培养条件下、不同时间段集胞藻表达GFP的情况。结果显示,通过不同盐浓度和不同时间的诱导,2个螺旋藻启动子在0.4~0.6 mol/L NaCl条件下,培养6~8 h表达的绿色荧光蛋白最多。文章成功构建了以绿色荧光蛋白为报告基因、卡那霉素抗性基因为选择标记、集胞藻6803作为外源基因表达受体,进行螺旋藻耐盐相关基因功能研究的平台;另外,从螺旋藻启动子能被盐诱导大量表达GFP的结果看,与启动子相关的螺旋藻基因很可能与螺旋藻的耐盐性相关。
- 李姗姗雍静茹齐云玲章颖赵亮夏士林李东王慧利包其郁李佩珍
- 关键词：绿色荧光蛋白螺旋藻启动子集胞藻耐盐相关基因
