广东省自然科学基金(10151051501000072)
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 相关作者:洪英洽赵善超李炬聪姜勇罗海华更多>>
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- 晚期糖基化终末产物受体胞外段不同功能段在前列腺癌细胞中的表达与定位
- 2012年
- 目的构建晚期糖基化终末产物受体(RAGE)胞外段不同功能段V/VC1真核细胞表达载体,并在前列腺癌细胞株PC-3中表达,为进一步研究其在前列腺癌发病中的作用和机制打下基础。方法采用PCR方法扩增RAGE不同功能段V/VC1的序列,利用分子克隆技术将其重组于pcDNA3-HA载体中。利用PCR和测序鉴定克隆正确性。转染PC-3细胞,用Western blotting检测其表达,免疫荧光检测其在细胞中的定位。结果克隆的RAGE不同功能段V/VC1真核表达载体完全正确,Western blotting检测到RAGE不同功能段V/VC1的表达,免疫荧光检测其主要定位于细胞浆中。结论成功地构建了RAGE不同功能段V/VC1真核表达载体,其能够在PC-3细胞中表达。
- 李炬聪宋先璐陆斌李煜生洪英洽邓鹏赵楚标罗海华赵善超姜勇
- 关键词:晚期糖基化终末产物受体真核表达载体前列腺癌
- 细胞外段V/VC_1区缺失RAGE真核表达载体的构建、转染及在前列腺癌细胞中的表达和定位
- 2013年
- 目的构建带HA标签的晚期糖基化终产物受体(RAGE)不同功能段缺失体真核细胞表达载体,使其在前列腺癌细胞株PC-3中过表达并观察其定位。方法采用PCR方法扩增缺失不同功能段V/VC1的RAGE缺失体ΔV/ΔVC1序列,利用分子克隆技术将其重组于pcDNA3-HA载体中,利用PCR和测序鉴定克隆正确性;转染PC-3细胞,用Western blot法检测其表达,免疫荧光法检测其在细胞中的定位。结果 RAGE不同缺失体质粒经测序鉴定无误,并可在PC-3细胞中高表达,且经免疫荧光检测其主要在细胞质中表达。结论成功构建了RAGE不同缺失体的真核表达载体,转染PC-3细胞后呈高表达,其在PC-3细胞中主要定位于细胞质。
- 洪英洽包继明李炬聪袁平庆罗海华赵善超姜勇
- 关键词:晚期糖基化终产物受体真核表达载体前列腺癌