辽宁省科技厅科技攻关项目(2004225004-10)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：李艳卢香兰王萍萍王柏勋王蕾更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院中国医科大学附属第四医院更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅科技攻关项目辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外源性TGF-β_1对NB4细胞内源性TGF-β_1的影响及其促凋亡机制的研究被引量：2
- 2010年
- 目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)作用于NB4细胞后的细胞凋亡情况、细胞周期改变及内源性TGF-β1、P27Kip1、cyclin E及bcl-2 mRNA水平的变化。方法:瑞氏-吉姆萨染色观察凋亡细胞形态学的变化;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;半定量RT-PCR技术检测内源性TGF-β1、P27Kip1、cyclin E以及bcl-2的mRNA水平。结果:TGF-β1能抑制NB4细胞的生长,促进NB4细胞的凋亡。5μg/LTGF-β1使NB4细胞阻滞在G1期。外源性TGF-β1浓度<5μg/L时,内源性TGF-β1的mRNA表达上调,外源性TGF-β1浓度为10μg/L时,内源性TGF-β1mRNA表达下调。5μg/LTGF-β1可使P27Kip1表达上调、cyclin E、bcl-2表达下调。结论:TGF-β1可诱导NB4细胞凋亡,引起细胞周期分布异常;外源性TGF-β1可能通过(1)上调内源性TGF-β1,从而使下游因子P27Kip1高表达以诱导NB4细胞凋亡;(2)TGF-β1直接抑制了cyclin E的表达,或者通过调高P27Kip1的表达反馈抑制cyclin E的活性,进而导致细胞周期阻滞;(3)通过下调bcl-2而诱导NB4细胞凋亡。高浓度的外源性TGF-β1可拮抗内源性TGF-β1表达,可能与其导致TGF-β1受体突变,或存在TGF-β1受体靶点过饱和现象有关。
- 梁颖李艳卢香兰王艳萍高峰于锦香
- 关键词：P27KIP1细胞周期蛋白E
- PD98059对HL60细胞Ras-MEK1/2-ERK1/2信号转导影响的研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨MEK1抑制剂PD98059对HL60细胞Ras-MEK1/2-ERK1/2信号转导以及细胞增殖的影响。方法四唑盐比色试验(MTT)法检测PD98059对HL60细胞增殖的抑制作用,流式细胞术观察PD98059对HL60细胞凋亡和G0/G1期阻滞的影响,半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定PD98059对HL60细胞ERK2、p27、Skp2基因表达的影响,免疫组织化学SP法检测ERK2、p27、Skp2蛋白表达的改变情况。结果 PD98059能够抑制HL60细胞的生长,该抑制作用具有浓度及时间依赖性(P<0.05)。PD98059能够促进HL60细胞凋亡,该作用具有浓度及时间依赖性(P<0.05);PD98059作用HL60细胞48h,随着浓度的增加G0/G1期阻滞增强(P<0.05)。PD98059可使HL60细胞ERK2、Skp2的mRNA及蛋白表达量减少,p27的mR-NA及蛋白表达量增加(P<0.05)。结论 PD98059能够抑制HL60细胞的生长,诱导细胞发生G0/G1期阻滞,促进其凋亡,这可能是通过PD98059阻断Ras-MEK1/2-ERK1/2信号转导,影响了ERK2、Skp2、p27等的表达而实现的。
- 宋广玉李艳王萍萍
- 关键词：细胞外信号调节MAP激酶类HL-60细胞PD98059
- P27^(Kip1)和TGF-β1在原代APL细胞凋亡中作用机制的研究被引量：3
- 2009年
- 本研究探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对原代APL细胞凋亡及周期的影响,As2O2作用前后P27Kip1、TGF-β1、cyclinE和bcl-2的变化以及P27Kip1在As2O3诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡中的作用。用细胞形态学及流式细胞仪分别检测原代APL细胞凋亡和细胞周期改变,免疫组织化学法和RT-PCR技术检测药物处理前后细胞P27Kip1、TGF-β1、cyclinE以及BCL-2蛋白和基因表达的变化。结果表明:As2O3与APL细胞共同培养24小时,浓度为1、5、10μmol/L时,凋亡细胞所占比例分别为1.42%、4.57%、10.67%;至48小时,凋亡细胞分别为8.92%、16.07%和18.90%,明显高于相同浓度的As2O3作用24小时(p<0.05);至72小时,细胞以碎片为主。同一时段随着As2O3浓度的增加,APL细胞凋亡不断增多;同一浓度As2O3作用于APL细胞,随着作用时间的延长,APL细胞凋亡也随之增多。5、10μmol/L的As2O3作用于APL细胞24、48、72小时可见细胞周期阻滞于G1期,G1期细胞比例均明显高于对照组(p<0.05),而1μmol/LAs2O3作用后的细胞周期无明显变化。1、5和10μmol/LAs2O3作用于APL细胞,P27Kip1蛋白表达增高,P27Kip1mRNA与β-actin灰度值之比(P27Kip1/β-actin)分别为0.181、0.489和0.921,表明随着As2O3浓度的增高,P27Kip1mRNA表达水平显著上调(p<0.05),P27Kip1表达与凋亡细胞数之间存在正相关(r=0.55,p<0.05);与对照组相比,TGF-β1蛋白和mRNA表达上调,伴有CyclinE、BCL-2蛋白和mRNA表达下调,TGF-β1表达与凋亡细胞数之间存在正相关(r=0.51,p<0.05),TGF-β1表达与P27Kip1表达之间也存在正相关(r=0.31,p<0.05)。结论:As2O3体外可诱导原代APL细胞凋亡,存在时间-剂量依赖关系,并使细胞周期阻滞于G1期。P27Kip1表达的变化情况与As2O3诱导细胞凋亡的作用效果密切相关,As2O3诱导原代APL细胞凋亡的机制可能是通过上调TGF-β1,从而上调P27Kip1,拮抗CyclinE和BCL-2的作用,抑制细胞增殖,使细胞周期阻滞于G1期,从而诱导细胞发生凋�
- 王蕾李艳王萍萍卢香兰王柏勋
- 关键词：P27^KIP1TGF-Β1细胞凋亡CYCLIN
