辽宁省科技厅科技攻关项目(2004225004-11)
- 作品数：7 被引量：25H指数：3
- 相关作者：刘云鹏张敬东曲秀娟滕月娥张晔更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 5-aza-2'-deoxycitydine影响胃癌细胞MGC803对奥沙利铂敏感性及其机制被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨DNA甲基化抑制剂5-aza-2′-deoxycitydine(5-aza-dC)影响胃癌细胞MGC803对奥沙利铂(Oxaliplatin,OXA)的化疗敏感性,及其与Ⅱ相代谢解毒酶GSTP1表达的相关性。方法:5-aza-dC处理MGC803,RT-PCR和Western-Blot方法检测GSTP1基因mRNA和蛋白表达。MSP法分析GSTP1基因启动子区甲基化状态。MTT法检测药物敏感性。结果:5-aza-dC诱导GSTP1基因启动子去甲基化,上调GSTP1mRNA和蛋白表达,降低了MGC803细胞对OXA的敏感性,24h IC50值分别为对照组(13.15±1.7)μg/L、1μM 5-aza-dC处理组(24.54±2.1)μg/L、5μM 5-aza-dC处理组(30.81±1.3)μg/L及10μM 5-aza-dC处理组(51.72±1.6)μg/L,P值<0.01,差异有统计学意义。结论:5-3za-dC降低胃癌细胞对奥沙利铂的敏感性,其机制与增强GSTP1表达有关。
- 张晔曲秀娟刘云鹏荆薇杨向红侯科佐滕月娥张敬东
- 关键词：胃癌谷胱甘肽转硫酶奥沙利铂
- 凋亡抑制蛋白Survivin和Bcl-2在非小细胞肺癌中的表达和意义被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨凋亡抑制蛋白Survivin和Bcl-2表达与非小细胞肺癌(NSCLC)预后之间的关系。方法:将88例NSCLC及5例正常肺组织标本制作成组织芯片,应用免疫组织化学S-P法检测Survivin和Bcl-2的表达,并与临床病理特征及长期生存进行比较分析。结果:Survivin胞浆和胞核阳性表达率分别为94.3%和79.5%,Bcl-2胞浆和胞核阳性表达率分别为54.5%和42.0%,而正常肺组织均为阴性。Survivin胞浆表达与年龄等临床参数无关,而Survivin胞核在吸烟者中表达升高(P=0.002)。Bcl-2胞浆表达在男性、吸烟者、鳞癌、淋巴结无转移者中升高(P<0.01),Bcl-2胞核表达在女性、不吸烟者、腺癌和肿瘤大小为T3和T4者中升高(P<0.05)。Survivin表达与NSCLC病人生存期无关。Bcl-2胞浆表达的病人生存期更长(P=0.005),而Bcl-2胞核表达的病人生存期更短(P=0.012)。多因素分析显示Survivin和Bcl-2不是影响NSCLC预后的独立危险因素。结论:Survivin检测可能有助于NSCLC的诊断,Bcl-2胞浆和胞核表达可能具有相反的预后意义。
- 胡雪君宋娜刘云鹏赵志龙张林康健
- 关键词：SURVIVIN预后组织芯片
- LY294002与化疗药物联用对白血病K562细胞多药耐药的逆转作用
- 2008年
- 背景与目的:传统逆转白血病多药耐药的药物由于不良反应大而限制了其在临床中的应用,进一步研究白血病多药耐药产生机制和有效逆转靶点成为攻克白血病多药耐药的关键。为此,本研究探讨LY294002[磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3-K/Akt)通路抑制剂]对人类白血病K562细胞多药耐药的逆转作用。方法:锥虫蓝拒染法测定细胞生长增殖。Western印迹检测K562/S和K562/D细胞中P-gp及p-Akt的表达。流式细胞术检测细胞内药物积聚。结果:K562/D细胞对柔红霉素(DNR)、多柔比星(ADR)、长春新碱(VCR)、依托泊苷(vP16)交叉耐药,相对其亲本细胞的耐药倍数分别为65、52、134和50。DNR诱导了K562/D细胞的P-gp、p-Akt过度表达。LY294002使K562/D细胞内药物积聚增加,部分逆转了K562/D细胞对DNR、ADR、VCR、VP16的耐药性(相对耐药倍数降至23、21、63和29),而对敏感细胞K562/S的耐药性无影响。结论:LY294002部分逆转K562/ D细胞的多药耐药,可能于DNR诱导K562/D细胞的P-gp、p-Akt过度表达而LY294002抑制PI3-K/Akt信号转导通路有关。
- 张晔曲秀娟刘云鹏荆薇侯科佐滕月娥张敬东
- 关键词：白血病多药耐药
- PI3-K抑制剂LY294002逆转P-gp介导的白血病和胃癌细胞耐药被引量：8
- 2009年
- 背景与目的:磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B[phosphatidylinositol-3-kinase(PI3-K)/protein kinase B(Akt),PI3-K/Akt]通路是调控细胞生存的重要信号转导通路之一。本研究旨在探讨PI3-K抑制剂LY294002对P-gp过表达的人类白血病K562/DNR和胃癌SGC7901/ADR细胞多药耐药性的逆转作用。方法:将细胞分为单纯药物组和LY294002预处理组,单纯药物组分别以柔红霉素(daunorubicin,DNR)、阿霉素(adriamycin,ADR)、长春新碱(vincristine,VCR)和依托泊甙(etoposide,VP-16)处理,LY294002预处理组在加药前以LY294002进行预处理。用台盼蓝拒染法及MTT法检测药物敏感性及LY294002对细胞耐药性的影响。Western blot检测K562/DNR和SGC7901/ADR细胞中P-gp及p-Akt的表达。流式细胞术检测细胞内药物浓度。结果:2.5μmol/LLY294002预处理显著降低DNR、ADR、VCR和VP-16对K562/DNR细胞的IC50,相对逆转效率分别为72.4%、64.9%、60.4%和52.8%。此外,LY294002部分逆转SGC7901/ADR对ADR的耐药性,相对逆转效率为31.0%。LY294002预处理可部分抑制p-Akt和P-gp的表达,随着处理时间的延长,K562/DNR、SGC7901/ADR细胞内DNR、ADR的蓄积效应有增强的趋势。结论:LY294002通过抑制PI3-K/Akt信号转导通路,部分逆转P-gp介导的白血病和胃癌细胞的多药耐药。
- 张晔曲秀娟刘云鹏杨向红侯科佐滕月娥张敬东
- 关键词：白血病多药耐药
- 胃癌组织Akt和p-Akt蛋白及耐药相关蛋白表达临床意义的研究被引量：3
- 2009年
- 目的:检测胃癌组织Akt和p-Akt蛋白与胃癌生物学行为的相关性,及其与耐药相关蛋白P-gp和Gst-pi表达的相互关系。方法:将124例胃癌标本和16例正常胃黏膜标本制作成组织芯片,应用免疫组织化学SP法检测Akt、p-Akt、P-gp及Gst-pi蛋白的表达。同时利用蛋白质印迹法检测Akt、p-Akt、P-gp及Gst-pi在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR及其亲本细胞中的表达。结果:Akt和p-Akt在胃癌组织中的阳性表达率分别为82.3%和71.0%,显著高于正常胃黏膜,且两者表达均与胃癌的TNM分期有关(P<0.05)。p-Akt和P-gp表达成正相关,与Gst-pi表达无关,而Akt与P-gp、Gst-pi表达均无关。蛋白质印迹法结果提示,p-Akt在SGC7901/ADR中的表达显著高于其亲本细胞,而Akt在胃癌耐药和亲本细胞中的表达差异无统计学意义。结论:p-Akt过度表达可能参与P-gp介导的多药耐药,为临床采用Akt抑制剂以增加胃癌细胞的化疗敏感性提供了依据。
- 张晔曲秀娟刘云鹏荆薇杨向红侯科佐滕月娥张敬东
- 关键词：组织芯片AKTP-AKT多药耐药相关蛋白质类
- 阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡的分子机制探讨被引量：2
- 2008年
- 目的：探讨阿糖胞苷（Ara-C）诱导HL-60细胞凋亡的分子机制。方法：采用苔盼蓝拒染法检测细胞活力，MTF法测定细胞生长抑制率；形态学观察和流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot方法检测Bcl-2和caspase-3及其裂解片段的蛋白表达。结果：1～100斗M Ara-C以时间和剂量依赖方式抑制HL-60细胞增殖，诱导细胞凋亡，并下调Bcl-2蛋白表达，激活caspase-3。同时加入MEK抑制剂PD98059明显增加Ara-C的细胞毒作用和对caspase-3的激活作用，且这种作用可被P38MAPK抑制剂SB203580拮抗；PD98059和SB203580二者均未影响Ara-C对Bcl-2蛋白的下调作用。JNK抑制剂SP600125对Ara-C的上述作用无明显影响。结论：Ara-C以时间和剂量依赖方式抑制HL—60细胞增殖，并诱导细胞凋亡，同时下调Bcl-2蛋白表达，激活caspase-3；MEK抑制剂正性调节Ara-C的细胞毒作用，P38MAPK抑制剂负性调节Ara-c的细胞毒作用，二者可能是在caspase-3水平而未改变Bcl-2水平来发挥作用的。
- 王甦刘云鹏候科佐罗颖刘世洲王妍
- 关键词：MAPK阿糖胞苷BCL-2CASPASE-3凋亡
- PI3K/Akt抑制剂LY294002对胃癌细胞化疗增敏作用的探讨被引量：3
- 2008年
- 目的探讨PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002与化疗药物5-Fu及奥沙利铂联合使用对3种胃癌细胞系(MGC803、BGC823和SGC7901)化疗效果的影响。方法将PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002联合化疗药物5-Fu及奥沙利铂作用于3种胃癌细胞系,MTT法检测单独使用5-Fu、奥沙利铂及联合LY294002对体外培养的3种胃癌细胞系的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡。结果联合LY294002作用后,5-Fu、奥沙利铂对3种胃癌细胞系的增殖抑制作用明显增强(P<0.05),且凋亡率显著提高(P<0.05)。结论LY294002能有效提高化疗药物5-Fu、奥沙利铂体外对胃癌细胞的增殖抑制作用,抑制PI3K/Akt信号转导通路可显著提高胃癌的化疗疗效。
- 张晔曲秀娟刘云鹏杨向红侯科佐滕月娥张敬东
- 关键词：P13K/AKT信号通路胃肿瘤
