四川省国际科技合作与交流研究计划项目(2012HH0013)
- 作品数：10 被引量：59H指数：5
- 相关作者：曾宪垠刘铁秋韩兴发孙雪丹曹晓涵更多>>
- 相关机构：四川农业大学中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：四川省国际科技合作与交流研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- GnRH主动免疫对SD雄鼠下丘脑GnRH合成及性腺反馈系统的影响被引量：5
- 2013年
- 探讨GnRH主动免疫对SD雄鼠下丘脑GnRH合成及性腺反馈系统的影响。36只SD雄鼠随机分为免疫组、手术去势组及对照组,免疫组于12周龄时初免,8周后加免。放免法测定血清抗体滴度、激素浓度及下丘脑正中隆起GnRH含量,实时荧光定量PCR分析下丘脑生殖相关基因mRNA的变化。结果显示,GnRH主动免疫后12只免疫鼠中11只血清GnRH抗体滴度显著升高,血清LH、FSH及T浓度显著降低(P<0.05),睾丸严重萎缩(免疫去势鼠)。与对照鼠相比,免疫去势显著降低下丘脑GnRH含量(P<0.01),且显著下调下丘脑雌激素α受体(ERα)、雄激素受体(AR)、Kiss-1、GPR54及GnRH的mRNA表达水平(P<0.05)。手术去势鼠除血清LH、FSH浓度及下丘脑ERα的mRAN表达水平显著高于对照鼠外(P<0.05),其余指标均与免疫去势鼠类似。结果首次表明,GnRH主动免疫抑制性腺负反馈调节作用及降低了下丘脑GnRH的合成。
- 韩兴发曹晓涵杜小刚宋天增曾宪垠
- 关键词：GNRH主动免疫下丘脑
- 石菖蒲提取物的抑菌效果及其提取工艺的优化被引量：15
- 2014年
- 目的探讨石菖蒲提取物的抗菌效果,并优化其提取工艺。方法采用振荡浸提法制备石菖蒲提取物,以番茄灰霉病菌为供试菌,采用菌丝生长速率法测定提取物的抑菌率,筛选最佳提取溶剂,并经固体培养基稀释法测定有效抑菌浓度。通过单因素试验优化石菖蒲抑菌成分的提取工艺,并在单因素试验的基础上,通过正交试验确定最佳提取工艺组合。结果石菖蒲最佳提取溶剂为乙醇;石菖蒲乙醇提取物对番茄灰霉病菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为0.04 g/ml,最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)为0.06 g/ml;最佳提取工艺组合为温度38℃,时间12 h,乙醇体积分数100%,料液比1∶12,转速240 r/min。结论石菖蒲有机提取物对番茄灰霉病菌具有抑制作用;优化了乙醇提取条件,建立了有效的提取工艺,为以石菖蒲为材料研发中药杀菌剂提供了实验依据。
- 刘铁秋孙雪丹卢发瑞杨晓红刘杨红卢勇曾宪垠
- 关键词：提取物乙醇番茄灰霉病菌抑菌作用
- 20种川产道地药材对番茄灰霉菌的抑制作用研究被引量：5
- 2013年
- 通过使用无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮、三氯甲烷、石油醚和水6种溶剂对20种具有抑菌潜力的川产道地药材活性物质进行提取,以番茄灰霉病菌为供试菌,采用菌丝生长速率法研究其抑菌效果,通过系统研究川产道地药材提取物抑菌效果,在扩充中药材抑菌实验理论数据的基础上,为进一步研发中药杀菌剂提供基础参考。结果表明,在供试浓度为0.1g/mL条件下,乙醇提取物中黄柏、川射干、花椒、黄连、石菖蒲、大黄、川乌抑菌率为100%;乙酸乙酯提取物中川射干、黄连、桔梗、石菖蒲、使君子、川乌抑菌率为100%;三氯甲烷提取物中续断、金银花抑菌率为100%;丙酮提取物中石菖蒲抑菌率为100%;石油醚和水提液抑菌率均小于80%。
- 刘铁秋孙雪丹何苗罗友卢勇曾宪垠
- 关键词：川产道地药材提取物番茄灰霉菌抑菌
- 川牛膝多糖对衰老小鼠模型的体内抗氧化作用被引量：18
- 2014年
- 目的探讨川产道地中药材川牛膝多糖(RCPs)对衰老小鼠模型的体内抗氧化作用。方法采用D-半乳糖注射诱导衰老模型,同时给予RCPs或维生素C(Vc),连续处理42日后检测小鼠肝脏、心脏、脑组织抗氧化指标。结果与模型组相比,灌胃RCPs或Vc均显著增加小鼠脾脏和肝脏指数(P<0.05);增强肝、心、脑总抗氧化能力(T-AOC)、超氧阴离子及羟自由基清除能力(P<0.05);提高肝脏总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),心脏GSHPx和CAT活性(P<0.05),脑T-SOD及GSH-Px活性(P<0.05);降低肝、心、脑丙二醛(MDA)含量(P<0.05);上调肝、心、脑Cu,Zn-SOD、Mn-SOD、GSH-Px及肝、心CAT mRNA表达水平(P<0.05)。结论川牛膝多糖具有和Vc相当甚至更强的体内抗氧化活性,可作为一种优良的天然抗氧化剂来源。
- 李俊丽韩兴发刘铁秋曾宪垠
- 关键词：川牛膝多糖自由基抗氧化活性MRNA
- 石菖蒲醇提物对番茄幼苗防御酶影响被引量：1
- 2015年
- 为了探讨石菖蒲醇提物作为一种中药杀菌剂对病菌寄主植物本身防御酶体系的影响,该研究以番茄欧粉贝幼苗和川产道地中药石菖蒲为材料,采用冷浸法制备石菖蒲醇提物,经不同浓度石菖蒲醇提物对番茄幼苗进行处理,用比色法测定多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)的活性,并利用GC-MS联用技术,对石菖蒲醇提物的主要化学成分进行定性分析。结果表明:第1天,醇提物浓度在0.04~0.08 g·mL^(-1)时,PAL活性显著高于对照;随后PAL活性随浓度升高降低;当浓度在0.04~0.16 g·mL^(-1)时,POD活性与对照无显著差异;浓度为0.32 g·mL^(-1)时,POD活性显著高于对照;浓度为0.64 g·mL^(-1)时,POD活性显著低于对照;当浓度在0.04~0.32 g·mL^(-1)时,PPO活性显著高于对照;浓度为0.64 g·mL^(-1)时,PPO活性与对照无显著差异;随着时间的延长,三种酶各处理组之间的差异逐步减少。第4天时,各处理组之间PAI,的活性无显著差异;当浓度为0.04 g·mL^(-1)和0.64 g·mL^(-1)时,PPO活性与对照无显著差异,其余范围均显著高于对照;当浓度在0.08~0.32 g·mL^(-1)时,POD活性数值上均高于对照。以上表明在一定浓度范围内醇提物可以增强防御酶活性,未破坏植物的防御酶体系。因此,该醇提物作为一种新型的中药杀菌剂有巨大的开发和利用潜力。利用GC-MS联用技术,可从醇提物中鉴定出30种化学成分,这些物质中多为苯丙素类物质,如β-细辛醚、α-(细辛醚和顺式甲基异丁香油酚等,其中含量最高的物质为β-细辛醚(42.48%)。这提示在后续的研究中,可针对β-细辛醚等醇提物的主要化学成分进行。
- 孙雪丹何苗罗友刘铁秋卢勇曾宪垠
- 关键词：番茄防御酶GC-MSΒ-细辛醚
- GnRH主动免疫雌性大鼠调控机制研究被引量：2
- 2016年
- 旨在探讨GnRH主动免疫雌性SD大鼠的调控机制。24只雌性SD大鼠随机分为免疫组、卵巢切除组和空白对照组(n=8),免疫组于12周龄注射疫苗,4周后加免;卵巢切除组11周龄外科手术摘除卵巢;空白对照组不作任何处理。使用放射免疫分析法测定血清激素E2、P4、FSH和LH含量,荧光定量PCR分析各基因mRNA表达情况。结果显示,主动免疫显著降低血清E2、P4、FSH和LH含量,至56周处死时,E2和LH含量有微弱上升,但4种激素含量均显著低于空白对照组(P<0.05)。与空白对照组相比,主动免疫显著下调下丘脑GPR54、KiSS-1、GnRH和ER-αmRNA,垂体GnRH-R、FSH-β和LH-βmRNA以及卵巢FSHR、LHR和ER-αmRNA的表达水平(P<0.05)。结果表明,GnRH主动免疫能显著抑制雌性SD大鼠性腺发育,降低血清性激素含量,通过下丘脑ER-αmRNA-GPR54/KiSS-1通路保持动物较长时间去势;但GnRH主动免疫造成的动物去势存在恢复的可能。
- 曹晓涵韩兴发杜小刚陈志渝孟风艳储明星曾宪垠
- 关键词：GNRH主动免疫雌性大鼠
- 川射干抑菌成分提取及对番茄灰霉抑菌作用研究被引量：4
- 2014年
- 目的研究川射干抑菌成分的提取条件及其对番茄灰霉病菌的有效抑制浓度,为新型杀菌剂研发奠定技术和理论基础。方法以番茄灰霉病菌为供试菌,采用振荡浸提法提取抑菌成分,采用菌丝生长速率法测定抑菌率,选择最优提取溶剂,通过单因素试验和正交试验,确定最佳提取条件组合,采用固体培养基稀释法测定有效抑菌浓度。结果川射干抑菌成分最佳提取溶剂为乙酸乙酯,最优提取条件为时间20h,温度38℃,料液比1:12,转速160r/min,各因素影响程度为温度>料液比>时间>转速,MIC为0.04g/m L,MBC为0.08g/m L。结论本文初次确立了川射干抑菌成分提取的技术条件,提取的抑菌成分对番茄灰霉病菌有显著的抑制作用。
- 刘铁秋曾宪垠刘杨红杨晓红卢发瑞卢勇
- 关键词：川射干番茄灰霉病菌抑菌成分
- 石菖蒲醇提物对番茄灰霉抑菌稳定性及防效研究被引量：4
- 2014年
- 本文通过菌丝生长速率法研究石莒蒲醇提物对番茄灰霉的抑菌稳定性，采用凹玻片法和盆栽法研究其对灰霉孢子萌发的影响和温室防效，从而形成系统完整的数据基础，为石菖蒲杀菌剂的研发提供科学依据。结果表明，醇提物在不同pH和紫外照射下抑菌活性稳定，在高于78℃时抑菌活性下降，在蔗糖处理浓度高于0．08g／mL时抑菌活性增强，在室温（22—28℃）和低温（4℃）下可长期储存；其对灰霉孢子萌发的Ec50为0．0109g／mL，EC90为0．0318g／mL；温室防效的Ec50为0．0221g／mL，EC90为0．1533g／mL。石菖蒲醇提物可抑制番茄灰霉菌丝生长和孢子萌发，抑菌稳定性和温室防效良好，可进一步研发为中药杀菌剂。
- 刘铁秋卢发瑞杨晓红何苗孙雪丹卢勇曾宪垠
- 关键词：醇提物灰霉菌稳定性孢子萌发
- GnRH主动免疫对雌鼠下丘脑-垂体-卵巢轴调控的影响被引量：8
- 2014年
- 本研究采用GnRH并列体二聚物(GnRH-Tandem-Dimer,GTD)为免疫原主动免疫SD雌鼠,检测下丘脑-垂体-卵巢轴生殖相关基因表达变化,分析主动免疫GTD对SD雌鼠生殖功能的影响。选取48只性成熟SD雌鼠随机分为GTD免疫去势组和空白组。免疫组雌鼠于12周龄时初免GTD免疫去势疫苗,4周后加免。每两周采集血液检测血清激素含量变化。分别于加免后4、8、12周处死大鼠,每组处死8只,收集血液;并采集下丘脑、垂体、卵巢,分析生殖相关基因mRNA表达变化。结果显示,GTD主动免疫后大鼠卵巢严重萎缩,重量下降到对照组的23.12%(p<0.05);血清FSH、LH、P4及E2含量均显著下降(p<0.05);除下丘脑GnRH mRNA先上升后下降外,下丘脑ER、垂体GnRH-R、LH-β、FSH-β和卵巢LH-R、FSH-R和ER mRNA表达水平显著下调(p<0.05)。结果表明,GTD主动免疫可通过对生殖内分泌激素分泌的调节和对生殖相关基因mRNA表达水平的调控,影响下丘脑-垂体-卵巢轴的功能。
- 曹晓涵韩兴发陈志渝曾宪垠
- 关键词：主动免疫下丘脑-垂体-卵巢轴雌鼠
- GnRH主动免疫对雄性大鼠垂体-睾丸轴功能的影响被引量：1
- 2013年
- 本研究用GnRH并列体二聚物(GnRH-TDK)主动免疫SD雄性大鼠观察其对大鼠垂体-睾丸轴功能的影响,以探讨GnRH主动免疫去势的分子机理。24只性成熟SD雄鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组雄鼠于12周龄时初免,8周后加免,对照组雄鼠不做任何注射。每两周采集血液放免法检测血清抗体滴度及激素含量变化。加免后4周脱颈处死所有雄鼠,收集垂体、睾丸实时荧光定量PCR分析相关生殖基因mRNA的变化。结果显示,GnRH主动免疫后12只免疫雄鼠中11只血清GnRH抗体滴度显著上升,血清LH、FSH及睾酮(T)均极显著下降到检测限附近或以下(p<0.01),同时睾丸严重萎缩,其重量及体积下降到对照组睾丸的20%(p<0.01),组织切片显示,曲细精管上皮组织严重受损,管内仅有少数退化的精原细胞。与对照组相比,GnRH主动免疫极显著下调雄鼠垂体GnRH受体、LH-β、FSH-β和睾丸LH受体及FSH受体mRNA表达水平(p<0.01)。由此可见,GnRH主动免疫可通过下调垂体GnRH受体、促性腺激素亚基及睾丸LH、FSH受体基因表达,影响垂体-睾丸轴的功能。
- 韩兴发曹晓涵杜小刚曾宪垠
- 关键词：GNRH主动免疫
