云南省烟草公司项目(03A01)
- 作品数:2 被引量:13H指数:2
- 相关作者:谭学林张锦伟李文正付坚董霞更多>>
- 相关机构:云南农业大学云南烟草科学研究院云南省烟草科学研究所更多>>
- 发文基金:云南省烟草公司项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 水杨酸诱导的烟草抗性相关序列的分离被引量:5
- 2007年
- 通过已分离鉴定的水杨酸诱导烟草‘云烟85’中与抗性相关的差异表达基因,采用差示筛选和反式Northern检测以及序列分析得到94个烟草差异表达的EST序列。经测序及同源性比较,其中87个有同源序列,7个为新序列;有51个与抗性相关,占总序列的54.3%,其中有系统获得抗性蛋白基因和病程相关蛋白基因等。
- 董霞李文正付坚兰建强李正风刘世贵
- 关键词:水杨酸烟草抗性相关基因
- 抗黑胫病烟草品种K326 cDNA文库的构建被引量:8
- 2005年
- 以优质高抗黑胫病的烟草品种K326为材料,在苗期接种黑胫病菌丝,3 d后取叶片用Trizol试剂提取总RNA,经电泳检测28S,18S条带清晰,无DNA污染.以总RNA为模板,采用SMART技术合成双链cDNA,其产物主要集中在0.5~3kb之间,最大片段超过3kb.合成的双链cDNA经Sfi Ⅰ(A/B)酶酶切后,用CHROMASPIN-400层析柱分离分级cDNA,将大于0.5kb的cDNA片段混合,载入λTriplEx2载体,构建成云南第一个烟草cDNA文库.该文库的大小为1.2×107pfu.扩增文库的滴度达到1.2×109 pfu/mL.文库的重组率大于94%.取阳性克隆转化为质粒,通过PCR反应检测,重组体确有DNA插入,其片断大小在0.5~1kb之间.
- 张锦伟李文正谭学林
- 关键词:烟草K326CDNA文库