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国家高技术研究发展计划(2011A100303)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
张亨德
彭辉
苏建民
白学尧
常博皞
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相关机构:
西北农林科技大学
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机构
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西北农林科技...
作者
1篇
张涌
1篇
田进海
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常博皞
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白学尧
1篇
苏建民
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彭辉
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张亨德
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生物工程学报
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2012
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电穿孔介导小干扰RNA高效转染小鼠附植前胚胎
被引量:1
2012年
使用Cy3标记的阴性对照小干扰RNA(siRNA)转染小鼠附植前胚胎,建立向小鼠附植前胚胎导入siRNA的电穿孔方法。通过控制透明带弱化程度、电压、脉冲时间和脉冲次数等条件,采用不同参数组合并结合使用不同介质作为电转缓冲液将Cy3标记的阴性对照siRNA转染小鼠附植前胚胎。在荧光倒置显微镜下,观察胚胎的存活率、siRNA转染率以及阳性转染存活胚胎的囊胚发育率。结果显示小鼠附植前胚胎在使用台氏液消化胚胎透明带10 s后,以opti-MEM作为电转缓冲液,电穿孔参数设置为30 V,1 ms,3次的条件下取得最佳转染效果。总之,电穿孔方法可实现siRNA简便、高效地转染小鼠附植前胚胎。
常博皞
彭辉
田进海
苏建民
张亨德
白学尧
张涌
关键词:
小干扰RNA
电穿孔
透明带
RNA干扰
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