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女贞子抗丙型肝炎病毒复制酶活性成分研究被引量：11: 2013年; 在前期发现女贞子(Ligustrum lucidum,LL)提取物抑制丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)复制酶(NS5B)活性的基础上,研究女贞子提取物抑制NS5B活性的化学成分及其作用机制。采用乙酸乙酯萃取和薄层色谱法分离女贞子水提取物,NS5B活性抑制实验检测各个分离组分的抑制活性。结果显示,分离组分1和2能够抑制NS5B活性,组分2的抑制能力更强。采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)及NS5B活性抑制实验分析组分1和2中的活性成分。结果显示,熊果酸和齐墩果酸分别是组分1和2的抗NS5B活性成分,齐墩果酸的抑制能力更强。进一步的抑制机制分析发现,熊果酸和齐墩果酸通过非竞争抑制作用抑制NS5B活性,熊果酸和齐墩果酸的Ki分别约为4.7μg·mL 1(10μmol·kg-1)和2.5μg·mL-1(5.5μmol·kg-1)。本研究发现齐墩果酸和熊果酸通过非竞争抑制作用抑制丙型肝炎病毒复制酶NS5B活性,揭示这两个天然化合物具有潜在的丙型肝炎治疗价值。; 孙瑞娜张艳妮汪俊刘好桔孔令保; 关键词：丙型肝炎病毒女贞子熊果酸

持续表达的丙型肝炎病毒NS4B激活HepG2细胞内质网应激反应的研究被引量：2: 2012年; 目的研究持续表达的丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白4B(NS4B)对HepG2细胞内质网应激反应的影响。方法 NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)NS4B通过脂质体转染HepG2细胞,G418筛选、基因组PCR和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内人X盒结合蛋白1(XBP1)mRNA剪接,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78启动子、XBP1启动子和核因子κB(NF-κB)活性。结果基因组PCR和Western blot鉴定证实NS4B基因整合到转染HepG2细胞的染色体上,并有效表达;在NS4B稳定转染的HepG2细胞中,检测到XBP1mRNA剪接、XBP1和Grp78启动子激活、Ca2+稳态变化及NF-κB激活。结论 NS4B在HepG2的稳定表达诱导了内质网应激反应,揭示NS4B可能通过诱导肝细胞内质网应激反应在HCV感染及其致病性中发挥作用。; 熊江红张庆华张艳妮朱向东孔令保; 关键词：肝炎病毒属内质网应激反应 HEPG2细胞

丙型肝炎病毒NS4B蛋白调控Hep3B细胞非折叠蛋白质反应研究被引量：3: 2012年; 研究表达的丙型肝炎病毒(HCV)NS4B对Hep3B细胞非折叠蛋白质反应的影响。NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)NS4B通过脂质体转染Hep3B细胞,G418筛选和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内XBP1 mRNA剪接,Western blot鉴定ATF6蛋白切割,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78和XBP1启动子活性。G418筛选和Western Blot鉴定证实获得稳定表达NS4B的Hep3B细胞;在该细胞内,XBP1 mRNA剪接、ATF6切割、XBP1和Grp78启动子激活均被检测到。NS4B在Hep3B的稳定表达诱导了非折叠蛋白质反应。; 张艳妮张庆华陈瑶刘好桔刘志文孔令保; 关键词：丙型肝炎病毒 NS4B HEP3B

女贞子提取物主要活性组分及其抗丙型肝炎病毒复制活性分析被引量：5: 2013年; 中药女贞子(Ligustrum lucidum,LL)具有肝保护和抗炎症作用.本研究分析女贞子提取物对丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)复制的影响及其活性成分.薄层层析法分离女贞子水提取物,获得5个分离组分.Real-time RT-PCR和Western印迹发现,分离组分1和2抑制HCV JFH1细胞感染模型中的JFH1病毒复制.分离组分的高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)分析表明,熊果酸和齐墩果酸可能是组分1和2的抗病毒活性成分.熊果酸和齐墩果酸抗病毒实验发现,熊果酸和齐墩果酸抑制HCV JFH1的复制,它们的选择指数(SI)分别为6.7和30.8.这些研究结果表明,女贞子及其化学成分熊果酸和齐墩果酸具有潜在的丙型肝炎治疗价值.; 孙瑞娜郭韫丽汪俊吴晓玉孔令保; 关键词：丙型肝炎病毒中药女贞子熊果酸齐墩果酸抗病毒药物

数字典藏在E-learning中的应用被引量：3: 2011年; 数字典藏平台可以成为一个非常丰富与完整的数字学习环境,所具有的典藏功能、展示功能、教育功能和研究功能有助于营造一个好的E-learning环境。数字典藏应用于E-learning是数字典藏再利用一个可行的发展方向,有助于提高数字典藏资源的价值。; 郭韫丽孔令保李冬梅吴先福; 关键词：数字典藏数字图书馆 E-LEARNING

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江西省科技支撑计划项目(2009BNA09400)