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基于同源加尾系统的4种腹泻病毒的多重RT-PCR检测方法被引量：5: 2013年; 目的针对轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和扎如病毒四种常见腹泻病毒,建立基于同源加尾(Homo-Tag AssistedNon-Dimer,HAND)系统的一步法四重RT-PCR检测方法。方法根据4种病毒基因组保守序列设计引物并在5'端加上同源尾巴序列。通过优化通用尾巴引物和特异性加尾引物的浓度等PCR参数构建四重RT-PCR反应体系,并系统评价其稳定性、特异性和灵敏度。结果成功建立基于HAND系统的4种腹泻病毒一步法多重RT-PCR检测方法。特异性分析显示四种病毒间无交叉反应,灵敏度分析显示轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和扎如病毒的检测下限分别达到48、9.6、1.92和48 pg。结论所建立的基于HAND系统的4种腹泻病毒多重RT-PCR检测方法简便快速、灵敏特异稳定、成本低廉,非常适用于基层医学实验室。; 滕勇勇莫秋华王琪唐明慧赵德坚谭华涂承宁杨泽陈清孙虹; 关键词：多重RT-PCR 轮状病毒诺如病毒星状病毒

珠海市冬春季节儿童病毒性腹泻的流行病学特征被引量：5: 2013年; 目的探讨珠海市冬春季节儿童诺如病毒（NV）、扎如病毒（sV）和星状病毒（AstV）等3种重要病毒性腹泻的流行病学特征。方法采集2009年11月21日至2010年4月3日在珠海市妇幼保健院就诊的腹泻儿童粪便样本，选取轮状病毒和腺病毒筛查阴性的样本，采用逆转录-聚合酶链反应（RT．PCR）技术检测NV、SV和AstV的特异基因片段，并对诺如病毒检测阳性的样本进行分子分型。结果3种病毒季节总检出率为21．49％，其中2009年12月的检出率最高，为29．05％，而2010年2月检出率最低，为12．20％，87．96％的阳性样本来自0—30月龄患儿。NV、SV及AstV的季节检出率分别为14．70％、2．75％和4．04％，3种病毒中以NV和SV各月份阳性检出率差别较大，而AstV较为一致，12—18月龄患儿NV检出率最高（34．09％），60～120月龄患儿sV检出率最高（12．5％），24～30月龄患儿AstV检出率最高（16．67％）。诺如病毒经分子分型后均为GII型。结论NV是引起2009年冬春季节珠海市儿童病毒性腹泻的主要病原之一，SV与AstV也是重要的病原，应加强对婴幼儿NV、SV和AstV等3种重要病毒性腹泻的监测和防控工作。; 刘亚巍王万山莫秋华杨泽杜田; 关键词：诺如病毒流行病学

一种诺如病毒快检试剂盒的评价被引量：1: 2014年; 目的系统评价一种诺如病毒快检试剂盒的检测性能。方法收集130份非轮状病毒感染的腹泻样本,分别采用德国拜发公司生产的RIDA快速检测试剂盒和检验检疫行业标准中推荐的RT-PCR方法平行检测诺如病毒,统计分析两种方法的检测结果 ,并用RT-PCR测定快检试剂盒的最低检测下限。结果在130例腹泻样本中,快检试剂盒检出21例诺如病毒阳性,检出率为16.2%,RT-PCR检出24例诺如病毒阳性,检出率为18.5%。两种检测方法的符合率为97.7%(127/130),两种方法的检测结果差异无统计学意义(P=0.25),快检试剂盒的最低检测下限可达到1 000拷贝数。结论基于固相膜免疫测定的诺如病毒快检试剂盒具有较高的特异性和灵敏度,可以用于临床病毒性腹泻样本的快速筛检和国境口岸的应急检测。; 王琪唐明慧赵俊华汪海波滕勇勇杨泽莫秋华; 关键词：诺如病毒免疫测定

广东某市暴发的8起感染性腹泻调查分析被引量：8: 2015年; 目的通过对2015年1月发生在广东某市的8起感染性腹泻的调查和分析,为学校、工厂等集体单位制定相应的预防控制对策提供科学依据。方法对腹泻疫情进行流行病学分析,并采集食堂可疑食物留样、病例和食堂员工肛拭子等,应用细菌分离培养法和RT-PCR方法分别进行致病菌鉴定和病毒核酸检测。结果这8起疫情在时间上无明显相关性和聚集性,感染人群随机,但都暴发于人口相对集中并且是集中供餐的单位。感染者主要表现为腹泻、呕吐等消化道症状,大部分病情较轻。所有样本均未检出食物中毒常规致病菌,但是检出了诺如病毒和轮状病毒,其中用餐者肛拭子样本诺如病毒检出率为60.3%,厨师肛拭子样本诺如病毒检出率为80.0%,诺如病毒和轮状病毒混合感染检出率为2.4%。综合分析表明,携带病毒的厨师或食物为最大可能的传染源。结论在秋冬季,应提高从业人员腹泻病病原监测频率,加强食品安全监管力度,从而降低腹泻病疫情的暴发频率,保障人民身体健康。; 汪海波王琪涂承宁谭华杨泽莫秋华; 关键词：腹泻病疫情分析诺如病毒轮状病毒食品安全

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珠海市软科学研究计划项目(PC20081002)