国家自然科学基金(81100307)
- 作品数：2 被引量：27H指数：2
- 相关作者：窦科峰张航宇赵俊龙高春辰王琳更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学更多>>
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- EGFP-Luc-Hepa1-6细胞系的构建及其在小鼠肝癌模型中的应用被引量：2
- 2015年
- 目的:构建带有增强型绿色荧光蛋白EGFP及荧光素酶luciferase的真核表达载体p CMVLuciferase-IRES2-EGFP,对肝癌细胞系Hepa1-6转染后进行稳定筛选,并将表达该载体的细胞系应用于小鼠原位肝癌模型构建,以对小鼠肝癌细胞进行稳定标记与活体示踪。方法:对p GL3-Basic质粒进行Xba I酶切、Klenow片段补平黏端、Xho I酶切获得luciferase小片段,与Xho I/Sma I酶切p IRES2-EGFP质粒获得的载体大片段连接,获得重组质粒p CMV-Luciferase-IRES2-EGFP。酶切鉴定、测序比对确认序列完全正确后,以重组载体转染Hepa1-6细胞进行稳定筛选,以荧光显微镜观察EGFP表达,报告基因实验与LuminaⅡ成像系统检测荧光素酶活性。确认该细胞系中的质粒得到表达后,以该细胞系进行C57BL/6小鼠肝脏原位接种构建肝癌模型,以LuminaⅡ成像系统连续活体监测肝癌的生长,取离体的肝癌组织制备石蜡切片(HE染色)和冰冻切片(免疫荧光染色)分别观察离体肿瘤组织病理学特征及其中肝癌细胞绿色荧光蛋白表达情况。结果:成功构建表达p CMV-Luciferase-IRES2-EGFP载体的Hepa1-6细胞系(EGFP-Luc-Hepa1-6),并以该细胞系成功构建C57BL/6小鼠原位肝癌模型,实现小鼠肝癌细胞的活体示踪与体外标记。结论:成功构建EGFP-Luc-Hepa1-6细胞系,且以此细胞系构建的小鼠原位肝癌模型可以同时实现小鼠肝癌生长的连续活体监测与离体组织检测。
- 叶雨辰赵俊龙王琳段娟丽高春辰秦鸿雁窦科峰
- 关键词：肝癌EGFPLUCIFERASE小鼠
- 超声联合肿瘤标志物CA19-9及超敏C反应蛋白检测对胆囊癌早期诊断准确性的影响被引量：25
- 2014年
- 目的探讨超声检查联合肿瘤标志物CA19-9和超敏C反应蛋白(hs-CRP)检测在胆囊癌早期诊断中的价值。方法纳入第四军医大学西京医院肝胆外科2008年1月-2013年1月接受胆囊癌切除手术,并经病理证实的原发性胆囊癌患者95例,以及同期胆囊良性病变患者和正常成人各51名。所有患者均有完整的病理、B超、CA19-9、hs-CRP等检查结果。正常成人组受试者均经健康体检排除胆囊疾病,入组后增加CA19-9、hs-CRP等相关检查,分析其胆囊癌早期诊断的准确性。结果 95例胆囊癌B超检查结果显示:腔内结节型31例,肿块型40例,厚壁型24例;病理类型:腺癌87例,腺鳞癌6例,鳞癌2例。各组之间hs-CRP和CA19-9水平差异有统计学意义(P<0.05),其中胆囊癌组最高。单独使用CA19-9和hs-CRP诊断胆囊癌具有较高的敏感性,但是特异性低。单独使用B超诊断胆囊癌的敏感性和特异性分别为74.7%和75.0%。在与B超进行联合检测时,将hs-CRP和CA19-9作为一个血清学变量,分别以CA19-9≥100U/ml和hs-CRP≥6mg/L为阳性界值,当B超与2种血清学变量进行串联试验时,敏感性下降至71.6%,但特异性增加至84.4%,进行并联试验时,敏感性增高至98.9%,特异性下降至66.7%。结论 B超与CA19-9及hs-CRP两种血清学指标结合使用,有助于提高对胆囊癌诊断的准确性。
- 张航宇窦科峰
- 关键词：胆囊肿瘤超声检查C反应蛋白质
