国家教育部博士点基金(20113227110011)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：钱晖许文荣贾浩源叶惠慧薛建国更多>>
- 相关机构：江苏大学江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外源性sall4基因在胃癌HGC27细胞株中的表达及鉴定
- 2013年
- 目的:建立sall4稳定转染的HGC27细胞株,为sall4基因在胃癌发生发展中的作用研究奠定基础。方法:采用脂质体介导法将pCMV6-entry-sall4及pCMV6-entry质粒转染至HGC27细胞,48 h后加入终质量浓度600mg/L的G418抗生素进行药物加压筛选,获得阳性单克隆细胞株,通过RT-PCR和蛋白质印迹检测细胞中sall4的表达情况。结果:成功构建了稳定过表达sall4的HGC27细胞株,稳定转染细胞株中sall4的mRNA和蛋白水平明显高于未转染组及转染空载体组。结论:本实验成功筛选出sall4基因过表达的稳定转染胃癌细胞系。
- 张玲高硕张斌王梅许潇钱晖许文荣
- 关键词：胃癌SALL4过表达
- 流式细胞仪分选侧群细胞条件的探索与优化被引量：1
- 2014年
- 目的探讨不同浓度的荧光染料(Hoechst 33342)和抑制剂维拉帕米(verapamil)对流式细胞仪分选侧群(SP)细胞的影响。方法实验分为Hoechst 33342组(Hoechst 33342浓度分别为2.5、5.0和7.5μg/mL)和抑制组(Hoechst 33342+verapamil,verapamil浓度分别为50、100和150μmol/L),用流式细胞仪分选人肺腺癌细胞系A549中SP细胞,摸索Hoechst 33342和verapamil的最佳浓度,并用本实验室构建的一株肿瘤细胞系K1进行验证。结果在verapamil和Hoechst 33342浓度分别为150μmol/L和7.5μg/mL时,A549细胞染色充分,SP细胞亚群与非SP(non-SP)细胞亚群分群明显,SP细胞约为2.2%。K1细胞在verapamil为50μmol/L和Hoechst 33342为5μg/mL时,SP细胞亚群与non-SP细胞亚群分群明显,SP细胞亚群可被verapamil抑制,其比例约为1.3%。分选后的SP细胞和non-SP细胞可进一步扩增培养。结论 Hoechst 33342和verapamil可影响肿瘤细胞中SP细胞分选效率。
- 叶惠慧贾浩源张蕾蕾薛建国祝源蒋留留李里明许文荣钱晖
- 关键词：侧群细胞流式细胞术肿瘤干细胞人肺腺癌细胞
