浙江省医药卫生科学研究基金(2007A091)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：石键赵洪洋张宏傅伟明陈鹏更多>>
- 相关机构：浙江大学医学院附属第二医院华中科技大学遂昌县人民医院更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用重组真核表达载体pCMV-p53转染wt p53基因及对大鼠C6胶质瘤细胞的热增敏效应被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨C6细胞在加热后的生物学行为改变及转染外源性野生型p53基因(wtp53)对C6胶质瘤热疗的影响。方法:提取与鉴定真核表达载体pCMV-p53,利用红色荧光蛋白确定转染质粒和脂质体的最佳比例。wtp53真核表达质粒稳定转染至大鼠C6胶质瘤细胞系,通过neo基因表达的检测确定目的基因转染的成功性。设置C6/p53(+)细胞组、C6细胞加热组、C6/p53(+)细胞加热组、反复加热后生长的热耐受C6细胞组和对照组,观察各组细胞的生物学行为及裸鼠接种成瘤率。对裸鼠皮下各组异种胶质瘤做激光间质热疗(laser interstitial thermotherapy,LITT)并比较抑瘤效果。结果:wtp53基因片断经正确鉴定和提取,转染质粒和脂质体的最佳转染比例为1∶6。neo基因稳定表达于转染了阳性质粒的C6细胞中。热耐受C6细胞的生长未受影响,C6/p53(+)细胞组生长速度减慢,加热组在加热12h后细胞增殖明显受影响,而C6/p53(+)细胞加热组的细胞增殖活性从6h起受到显著抑制;在C6/p53(+)细胞组、C6细胞加热组、C6/p53(+)细胞加热组中都可以观察到细胞凋亡形态学改变,流式细胞技术证实C6/p53(+)细胞加热组凋亡率增加最为明显,达对照组的30倍,差异有显著性(P<0.01)。C6细胞加热组、C6/p53(+)细胞组、C6/p53(+)细胞加热组的裸鼠成瘤率均有下降,分别为75%、57%、20%,而热耐受C6细胞组为100%。C6/p53(+)裸鼠LITT组与假手术组疗效比较差异有显著性(P<0.001),较C6裸鼠LITT组也有统计学差异(P<0.05)。而热耐受C6裸鼠的抑瘤效果在所有的LITT实验组最低。结论:p53基因可通过真核载体基因转染技术实现在C6细胞中稳定表达,并能在体内、外抑制大鼠C6胶质瘤细胞的生长,wtp53表达上调可增加C6细胞对加热的敏感性。
- 石键傅伟明张宏赵洪洋朱贤立
- 关键词：基因P53转染
- 立体定向技术建立大鼠脑胶质瘤激光间质热疗模型被引量：1
- 2010年
- 目的利用立体定向技术接种SD大鼠C6脑胶质瘤，并建立脑胶质瘤激光间质热疗（LITT）模型。方法采用立体定向技术，将体外培养并调制的C6胶质瘤细胞悬液20μl（浓度1×10^11／L）接种于SD大鼠右侧尾状核区。分时段MRI检查；做组织病理学和Ⅷ因子相关抗原（FⅧR），胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和S-100蛋白免疫组化检查。根据MRI扫描监测，校正肿瘤定位，按2～10W不同功率和热疗时间分组，插入半导体激光光纤进行间质热疗，同时使用ThermaCAM S65型红外热像仪测量肿瘤的中心靶点皮层温度和（或）热电偶仪间质测量靶区周边的深部温度。结果优化的立体定向接种技术使本组大鼠脑胶质瘤动物模型具有颅内生长稳定，成瘤率高，未见颅外转移病灶，实验周期短，可重复性好，可插入热疗光纤热疗，组织学上接近人类特征。LITT各组靶区温度高于假手术组（P〈0．05）；在同一治疗组内中心靶点皮层温度和靶区周边的深部温度之间有近似性，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论利用立体定向技术可成功建立SD大鼠脑尾状核C6胶质瘤模型，其肿瘤MRI影像及病理特征与人脑胶质瘤相似。红外热像测温技术在大鼠实验性LITT研究中的应用具有可行性，可联合热电偶深部测温技术应用于脑肿瘤LITT治疗。
- 石键张宏卜文良陈鹏赵洪洋傅伟明
- 关键词：神经胶质瘤立体定位技术热凝术激光
- 立体定向脑胶质瘤的激光间质热疗
- 2011年
- 局部或全身加热治疗肿瘤（简称热疗）已有100多年的历史.脑肿瘤热疗技术在近几年里发展颇快,脑肿瘤局部加热产生炭化或凝固圈,导致肿瘤细胞坏死或凋亡;对瘤周脑组织来说,局部加热可以引起血管扩张,血管壁的通透性增加,内皮细胞损害,继而血脑屏障开放,可与化疗、放疗、光敏治疗（PDT）发挥协同作用.
- 石键张建民陶祥洛
- 关键词：激光间质热疗脑胶质瘤肿瘤细胞坏死内皮细胞损害血脑屏障开放脑肿瘤
