家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金(SKLVEB2009KFKT020)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：程军郭涛曾艳波赵其平黄兵更多>>
- 相关机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海师范大学更多>>
- 发文基金：家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 柔嫩艾美耳球虫抗药性相关基因M_(20)的克隆与表达被引量：1
- 2011年
- 利用前期构建的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株与各自母株之间的抑制性消减文库而获得的ESTs序列,选择其中一个差异表达的EST序列(克隆号为M20),采用RACE技术,以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA为模板,扩增获得了该基因的全长cDNA序列,命名为M20,该基因全长847 bp,包括一个525 bp的开放阅读框,编码174个氨基酸,预测理论分子量约为19 ku。实时荧光定量PCR结果显示,该基因在敏感株中表达量高于地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株;在不同发育阶段中,未孢子化卵囊表达量高于孢子化卵囊、子孢子以及裂殖子阶段虫体。将该基因克隆于原核表达质粒pET28b中,构建重组质粒pET28b-M20,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导表达获得了重组蛋白,分子量约约为23 ku,该蛋白以包涵体形式存在,在IPTG诱导8 h后表达稳定,Western blot检测表明,其具有较好的免疫原性。
- 程军董辉郭涛韩红玉姜连连赵其平朱顺海马卫娇曾艳波孔春林李婷黄兵
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫抗药性地克珠利马杜拉霉素实时荧光定量PCR
