河南省杰出青年科学基金(074100510009)
- 作品数：9 被引量：31H指数：3
- 相关作者：陈奎生庞霞李晟磊赵志华郑湘予更多>>
- 相关机构：郑州大学第一附属医院郑州大学武警河南总队医院更多>>
- 发文基金：河南省杰出青年科学基金河南省科技攻关计划河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA对人食管癌EC9706细胞真核起始因子4E表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨siRNA对人食管癌EC9706细胞中eIF4E表达的影响。方法针对GeneBank中eIF4E基因的不同靶点,设计并合成两条特异siRNA及一条无义siRNA寡核苷酸模板,利用体外转录法合成siRNA,在脂质体介导下以150ng/μl、200ng/μl和250ng/μl三种浓度转染EC9706细胞,分别培养24h、48h、72h,同时设正常对照组。采用免疫细胞化学及原位杂交技术检测转染前后EC9706细胞中eIF4E蛋白和mRNA的表达;应用流式细胞技术检测转染前后EC9706细胞周期的变化情况。结果转染siRNA后细胞形态发生明显改变。不同浓度的两条特异siRNA转染细胞后,eIF4E蛋白及mRNA表达量均较正常对照组降低,并且具有显著的剂量依赖性(P<0.05),但两转染组之间相比,差异无统计学意义(P>0.05);无义siRNA未表现出对eIF4E基因表达的抑制效应(P>0.05);两条特异siRNA转染组与无义siRNA转染组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。三种不同浓度siRNA转染细胞72h后与无义转染组及正常对照组相比,G0/G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例相对减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论特异性siRNA能有效抑制人食管癌EC9706细胞中eIF4E基因的表达,抑制细胞增殖。
- 陈奎生周强王志永柴雅玫
- 关键词：RNA干扰食管肿瘤EC9706细胞
- eIF4E反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4EHPA表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4E及肝素酶(HPA)蛋白、mRNA表达的影响,并观察其对EC9706细胞侵袭力的抑制效果。方法:针对eIF4E mRNA翻译起始区设计经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(ASODNS),经脂质体转染食管癌EC9706细胞,采用原位杂交、Western Blot和Boy-den chamber侵袭实验等方法检测抑制前后EC9706细胞中eIF4E及HPA表达情况及细胞侵袭力改变。结果:eIF4EASODNS转染食管癌EC9706细胞24、48、72h后,elF4E及HPA的mRNA与蛋白表达量均较对照组有所降低(P<0.05),且均以转染72h的抑制效应最为明显,在每个时间段内随剂量增加eIF4E ASODNS抑制效应明显增强(P<0.05);eIF4E ASODNS对HPA蛋白、mRNA表达的抑制效应和对eIF4E蛋白、mRNA表达的抑制效应,呈正相关关系(蛋白r=10.02,mRNA r=10.17,P均<0.01);eIF4E ASODNS体外转染食管癌EC9706细胞后,其穿越Matrigel的细胞数明显少于细胞对照组、空白对照组和无关对照组(P均<0.05)。结论:eIF4E ASODNS可抑制食管癌EC9706细胞中eIF4E、HPA蛋白及mRNA表达,且可抑制食管癌EC9706细胞的浸润转移。该研究结果为临床治疗食管癌等恶性肿瘤浸润转移奠定一定的理论基础。
- 陈奎生楚丽赵志华李晟磊高冬玲张云汉
- 关键词：真核细胞起始因子4E反义寡核苷酸肝素酶转染
- 榄香烯对人食管癌EC9706细胞中eIF4E表达的影响被引量：6
- 2008年
- 目的探讨榄香烯对人食管癌EC9706细胞中eIF4E蛋白表达的影响。方法分别用不同浓度榄香烯处理人食管癌EC9706细胞,并采用免疫细胞化学SP法检测eIF4E蛋白的表达情况。结果不同浓度的榄香烯均可下调人食管癌EC9706细胞中eIF4E蛋白表达,榄香烯作用组与对照组两两相比,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论榄香烯可通过下调人食管癌EC9706细胞中eIF4E蛋白的表达,从而抑制食管癌EC9706细胞的生长、浸润和转移。
- 付艳忠陈奎生
- 关键词：食管癌EC9706细胞榄香烯免疫组化EIF4E
- 食管鳞癌组织中Galectin-3和MMP-9 mRNA的检测与分析
- 目的探讨Galectin-3和MMP-9mRNA在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其临床意义。方法应用原位杂交方法检测50例ESCC、19例癌旁不典型增生组织及50例正常食管黏膜组织中Galectin-3和MMP...
- 庞霞郑湘予李晟磊陈奎生
- 关键词：食管肿瘤鳞状细胞癌GALECTIN-3MMP-9原位杂交
- 文献传递
- RNA干扰抑制食管癌EC9706细胞中3－磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1基因的表达及其对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响被引量：3
- 2011年
- 目的研究RNA干扰抑制食管癌EC9706细胞中3－磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（PDK1）的表达及其对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法以PDK1siRNA转染EC9706细胞，分别采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测PDK1mRNA和蛋白的表达以及下游Akt蛋白的磷酸化水平。分别以四甲基偶氮唑蓝（MTF）法、流式细胞术、Transwell侵袭实验和裸鼠移植瘤实验检测PDK1 siRNA对EC9706细胞增殖、凋亡、侵袭以及体内抑瘤能力的影响。结果与未转染组相比，PDK1siRNA转染细胞后继续培养24、48和72h时，PDK1 mRNA的表达均明显降低，抑制率分别为（28．5±4．2）％、（51．1±5．7）％和（60．6±4．1）％，PDK1蛋白和Akt蛋白的磷酸化水平也明显降低（P〈0．05）。PDK1siRNA能有效抑制EC9706细胞的增殖、侵袭并促进细胞凋亡，且能抑制裸鼠移植瘤的生长并降低移植瘤组织中PDK1蛋白的表达。结论PDK1可能与食管癌细胞的增殖、凋亡和侵袭等生物学行为密切相关，是肿瘤基因治疗的有效靶点。
- 于婧陈奎生李亚南杨娟赵路
- 关键词：RNA干扰食管肿瘤EC9706细胞裸鼠
- 良恶性病变食管组织及其邻近组织中HOXA5蛋白和mRNA的表达被引量：1
- 2009年
- 【目的】探讨食管鳞癌组织中同源异型盒基因(HOX)HOXA5蛋白和mRNA的表达情况,分析HOXA5表达与食管癌患者年龄、性别及其他临床病理学特征的关系。【方法】选择31例择期手术的食管癌患者,手术切除的标本均在离体30min内分别于癌灶、癌旁3cm以内及手术残端食管黏膜组织3处取材;对各部分标本作HE染色进行病理学诊断及分型,用免疫组织化学染色方法检测HOXA5蛋白的表达,用荧光定量PCR法检测HOXA5 mRNA的表达。【结果】①HE病理组织学检测证实31例癌组织标本均为鳞癌,癌旁3cm以内的标本呈中-重度不典型增生,手术残端食管黏膜组织均为正常鳞状上皮。②在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中HOXA5蛋白阳性表达率分别为32.3%、58.1%和64.5%(P<0.05);HOXA5 mRNA的含量分别为0.97±0.46、1.76±1.03和2.37±2.11(P<0.05);HOXA5蛋白和mRNA均表现为癌组织及癌旁不典型增生组织的表达率/表达量明显高于正常食管黏膜组织。③HOXA5蛋白阳性表达率(P<0.05)、HOXA5 mRNA的含量(P<0.05)均与食管鳞癌组织的病理学分级有关,其在病理学Ⅲ级中的表达率明显高于病理学Ⅰ+Ⅱ级的;不支持HOXA5蛋白和mRNA的表达与患者的年龄、性别、浸润深度及有无淋巴结转移有关(均P>0.05)。④HOXA5蛋白表达与其mRNA的表达一致性程度良好(Kappa=0.718,P<0.05)。【结论】HOXA5蛋白和mRNA的表达在癌旁不典型增生组织、食管鳞癌组织中明显升高,它可能是食管鳞癌发生过程中的早期事件。
- 赵秋民
- 关键词：食管鳞癌荧光定量PCR
- VEGF与MMP-9蛋白在食管鳞癌中的表达及其意义被引量：3
- 2009年
- 目的检测VEGF和MMP-9蛋白在食管鳞癌中的表达,探讨其病理临床意义及其相关性。方法应用免疫组化SP法检测51例食管鳞癌组织、27例癌旁非典型增生和15例正常食管黏膜组织中VEGF和MMP-9蛋白的表达,分析其与食管癌的临床分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移的关系及二者的相关性。结果VEGF和MMP-9蛋白在食管鳞癌组织中的表达明显高于癌旁非典型增生组织和正常食管黏膜(P<0.05),在中晚期食管癌组织中的表达高于早期,在侵及纤维膜组中的表达明显高于未侵及纤维膜组,在有淋巴结转移组中的表达高于无淋巴结转移组,差异均有统计学意义(均P<0.05),但VEGF在高分化组和低分化组的表达差异无统计学意义(P>0.05),而MMP-9在高分化组和低分化组的表达差异有统计学意义(P<0.05);两者的表达呈正相关关系(rs=0.419)。结论VEGF和MMP-9在食管癌组织中的表达和临床分期、浸润深度、淋巴结转移有关,两者的表达呈正相关性。
- 刘恩娜王晓兰陈奎生
- 关键词：食管鳞癌VEGFMMP-9免疫组化
- 食管鳞癌组织中Galectin-3蛋白及mRNA的表达及意义被引量：3
- 2009年
- 目的探讨Galectin-3蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化及原位杂交方法检测50例ESCC、19例癌旁不典型增生组织及50例正常食管黏膜组织中Galectin-3蛋白及mRNA的表达。结果ESCC、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Galectin-3蛋白的阳性表达率依次降低,分别为72.0%(36/50)、47.4%(9/19)和24.0%(12/50),组间比较差异有统计学意义(P<0.05);ES-CC、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Galectin-3 mRNA的阳性表达率依次降低,分别为66.0%(33/50)、31.6%(6/19)和20.0%(10/50),组间比较差异有统计学意义(P<0.05);Galectin-3蛋白及mRNA的表达均与ESCC的组织分级、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论Galectin-3蛋白及mRNA表达与ESCC的发生、发展和转移密切相关,联合检测Galectin-3蛋白及mRNA表达可望成为ESCC早期诊断和预后判断的分子指标之一。
- 庞霞郑湘予李晟磊赵志华陈奎生
- 关键词：食管肿瘤鳞状细胞癌GALECTIN-3原位杂交
- CD_(31)、CD_(34)和CD_(105)蛋白在食管鳞状细胞癌组织微血管中的表达及意义被引量：5
- 2009年
- 目的探讨CD31、CD34和CD105蛋白表达在食管鳞状细胞癌(ESCC)发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法对50例ESCC和10例正常食管黏膜组织标本进行标记染色,按Weidner法计算三种蛋白标记物的肿瘤组织微血管密度(MVD)。结果在ESCC及正常食管黏膜组织中MVD-CD31、MVD-CD34及MVD-CD105均依次降低,组间比较P<0.01;MVD-CD31、MVD-CD34与ESCC的浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05),MVD-CD105与ESCC的TNM分期、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.01);ESCC组织中MVD-CD31、MVD-CD34均显著高于MVD-CD105(P<0.01)。结论CD31、CD34和CD105蛋白表达在ESCC发生、发展和转移中起重要作用;联合检测三者可望为判断ESCC发展及利用血管抑制剂治疗提供理论依据。
- 庞霞郑湘予李晟磊赵志华陈奎生
- 关键词：微血管密度
- β-榄香烯对人涎腺腺样囊腺癌SACC-83细胞中VEGF蛋白表达的影响被引量：7
- 2007年
- 目的探讨β-榄香烯对人涎腺腺样囊腺癌SACC-83细胞中血管内皮细胞生长因子（VEGF）蛋白表达的影响。方法分别用浓度为40、60和80mg／L的β-榄香烯乳剂处理人涎腺腺样囊腺癌SACC-83细胞12h和24h。对照组仅换培养液，不加β-榄香烯。应用免疫组织化学S—P法检测VEGF在人涎腺腺样囊腺癌细胞中的表达。结果不同浓度的β-榄香烯对SACC-83细胞中VEGF蛋白的表达均有影响，与对照组两两相比，差异均有统计学意义（P均〈0．05）；以浓度为60mg／Lβ-榄香烯作用24h最强，但与其他实验组两两相比，差异均无统计学意义（P均〉0．05）。结论β-榄香烯可下调人涎腺腺样囊腺癌SACC-83细胞中VEGF蛋白的表达，为临床进一步防治涎腺腺样囊腺癌浸润转移奠定一定的理论基础。
- 刘红庞霞郝润春常万松王效珍陈奎生
- 关键词：Β-榄香烯血管内皮细胞生长因子SACC-83细胞
