广东省自然科学基金(10251064201000004)
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
- 相关作者：廖明焦培荣韦良孟袁润余罗开健更多>>
- 相关机构：华南农业大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家肉鸡产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 两株H6N2亚型鸡源禽流感病毒的分离鉴定被引量：2
- 2012年
- 本研究利用血凝抑制试验(HI)、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、基因测序等方法,对广东省某活禽交易市场进行流行病学调查时获得的两株非H5、H9亚型禽流感病毒65株和C7株进行了亚型鉴定。结果表明这两株病毒均具有血凝活性,且能被抗H6亚型禽流感病毒标准阳性血清特异性抑制。用针对禽流感病毒的M基因、H6亚型禽流感病毒HA基因、N2亚型禽流感病毒NA基因特异性鉴定引物对65株和C7株进行RT-PCR扩增,分别获得特异性目的片段。测序及BLAST分析表明两株分离株与H6N2亚型禽流感广东分离株的HA基因和NA基因核苷酸序列相似性均高达95%以上。将该两分离株鉴定为H6N2亚型禽流感病毒,并命名为A/Chicken/Guangdong/65/2009、A/Chicken/Guangdong/C7/2009。
- 贾宝琴焦培荣韦良孟单芬袁润余徐成刚廖明
- 关键词：禽流感病毒
- 两株H6N2亚型鸡源禽流感病毒的分离鉴定
- 本研究利用血凝抑制试验(HI)、反转录一聚合酶链式反应(RT—PCR)、基因测序等方法,对广东省某活禽交易市场进行流行病学调查时获得的两株非H5、H9亚型禽流感病毒65株和C7株进行了亚型鉴定。结果表明这两株病毒均具有血...
- 贾宝琴焦培荣韦良孟单芬袁润余徐成刚廖明
- 关键词：禽流感病毒
- 文献传递
- 鸭RIG-1基因的PCR扩增及其序列分析被引量：6
- 2012年
- 维甲酸诱导基因1(RIG-1)是细胞质中侦测病原相关分子模式的识别受体。论文旨在扩增北京鸭RIG-1编码基因,并对其进行序列分析。通过PCR方法,从北京鸭脾脏中扩增得到RIG-1基因cDNA,并使用LaserGene分子生物学分析软件进行序列分析。结果发现北京鸭的RIG-1基因cDNA开放阅读框全长2 802bp,编码933个氨基酸。结构预测发现鸭RIG-1结构与哺乳动物类似,N端有两个串联CARD区,中间为DExD/H解旋酶区,C端为抑制区,各功能区起重要作用的氨基酸较为保守。同源性及进化树分析发现鸭RIG-1与鹅和斑马鱼的同源性最高分别为93.7%、78.4%,与哺乳动物同源性高于50%,与其他鱼类的同源性低于50%。成功扩增出北京鸭RIG-1基因cDNA编码序列,为鸭RIG-1的深入研究奠定了基础。
- 程玉强焦培荣韦良孟钟自富廖顺娣袁润余贾宝琴罗开健廖明
- 关键词：聚合酶链反应天然免疫
- 鸡干扰素调节因子7的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：3
- 2013年
- 为表达鸡干扰素调节因子7蛋白并制备其多克隆抗体,通过RT-PCR技术扩增chIRF7基因的编码序列,构建重组质粒PET30a-chIRF7。将重组质粒转化至大肠埃希菌(E.coil)BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白rchIRF7分子量约为60ku。将纯化的重组蛋白免疫接种小鼠制备多克隆抗体,间接ELISA测定血清抗体滴度在1∶51 200以上,IFA检测结果显示制备的鼠抗chIRF7蛋白多抗能够与AIV刺激的CEF细胞内的chIRF7蛋白发生特异性反应,表明通过原核表达系统表达的重组蛋白rchIRF7具有很好的免疫原性,以其制备的鼠抗chIRF7蛋白多克隆抗体滴度高、特异性好。
- 崔鹏飞邓国华韦良孟焦培荣廖明
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- H5N1亚型高致病性禽流感病毒对鸽的致病性分析被引量：4
- 2011年
- 为评估H5N1亚型禽流感病毒对鸽的致病性,用我国2004年分离的一株H5N1亚型禽流感病毒A/pigeon/GD/C2/2004(H5N1)人工感染4周龄鸽,进行了致病性试验。结果表明,该株病毒以106EID50/100μL剂量感染能致死鸽,致死率为22.2%,病毒能在感染鸽体内广泛分布,其中肺脏和肾脏中病毒含量达到104.50EID50/mL,表明该株病毒对鸽具有感染性,且感染鸽未通过喉头和泄殖腔向外排毒。
- 乔立旺焦培荣张东霞李芳胡自立刘海玲辛朝安廖明罗开健
- 关键词：禽流感病毒H5N1
- 一株鸭源H3N6亚型禽流感病毒遗传进化分析被引量：3
- 2013年
- 从活禽交易市场健康鸭体内分离到一株H3N6亚型禽流感病毒,命名为A/Duck/Guangdong/E9/2012(H3N6),这是该亚型禽流感病毒在我国广东地区的首次分离报道。为分析其遗传进化特征,对该病毒全基因组序列进行了测定,进行了遗传进化分析。结果显示,其HA裂解位点附近的氨基酸序列为PE-KQTR↓GLF,只含有1个碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒的HA裂解位点氨基酸序列的分子特征;其HA基因与2011年蒙古国分离的鸭源A/Duck/Mongolia/OIE-7457/2011(H3N5)禽流感病毒的HA基因同源性最高,其NA基因与2011年蒙古国分离的鸭源A/Duck/Mongolia/OIE-7438/2011(H4N6)禽流感病毒的NA基因同源性最高。全基因组分子遗传进化分析结果显示,其8个基因均属于欧亚谱系的禽源进化分支。
- 曹蓝焦培荣宋亚芬龚浪袁润余韦良孟亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒
- 三株H9N2亚型禽流感病毒全基因组序列分析被引量：5
- 2012年
- 采用RT-PCR对3株H9N2亚型禽流感病毒基因组进行扩增,测序后再利用DNAStar和MEGA 4对所得到的序列和部分具有代表性的参考序列进行遗传演化及分子特点分析,旨在从分子水平探讨华南地区H9N2亚型禽流感病毒的流行特点,为该病的综合防控提供依据。结果表明,3个分离株CK/GD/162/03、Francolin/GD/298/05与CK/GD/A8/10分别属于B34、B47和B54基因型;3个分离株HA基因未发生明显的变异,符合我国大陆H9N2亚型AIV HA基因的遗传进化特点,但内部基因出现不同程度重组且部分基因与人源高致病性H5N1亚型AIV同源性很高;CK/GD/162/03、Francolin/GD/298/05两株分离株具有宿主多样性。因此,对华南地区H9N2亚型AIV进行监控及分子流行病学调查具有重要意义。
- 刘国乾曹蓝和君冯军祥张长辉田进焦培荣亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型基因重组
