中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010JB12)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：陈兆国呼高伟米荣升张国恩黄燕更多>>
- 相关机构：中国农业科学院上海兽医研究所宁夏大学湖南农业大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目上海市科技兴农重点攻关项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 隐孢子虫鼠基因型CP15基因真核表达质粒的构建及在Hela细胞中的表达被引量：2
- 2011年
- 为了构建隐孢子虫鼠基因型CP15基因的重组真核表达质粒,检测其重组质粒在Hela细胞中的表达。采用PCR方法,从pMD18-T-CP15菌液中扩增了CP15及含寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)的CP15基因,酶切测序鉴定;将该基因亚克隆至pVAX1载体中,用脂质体介导的方法转染Hela细胞,RT-PCR法、间接免疫荧光法和Western-blot法检测表达蛋白的生物学活性。结果显示,扩增了约360 bp和380 bp的隐孢子虫鼠基因型CP15和含CpG-ODN的CP15基因,酶切测序鉴定成功构建了pVAX1-CP15和含有CpG-ODN的重组真核表达质粒pVAX1-C-CP15。转染Hela细胞后,用RT-PCR法检测到外源基因有效的转录,用间接免疫荧光、SDS-PAGE和Western-blot法检测到外源基因的有效表达。结果表明,构建的重组真核表达质粒能够在Hela细胞中成功转录和表达,并且表达产物具有良好的免疫活性。这为下一步深入研制具有高保护性的隐孢子虫核酸疫苗奠定了基础。
- 苏庆美何生虎米荣升张国恩黄燕周鹏秦培兰呼高伟陈兆国
- 关键词：真核表达质粒HELA细胞
- 隐孢子虫P23基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2011年
- 将隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mouse genotype)P23基因亚克隆到pGEX-4T-1载体中,并用大肠杆菌BL21(DE3)为宿主菌诱导表达。以纯化的rP23为诊断抗原,建立隐孢子虫间接ELISA检测方法,观察其敏感性、特异性和重复性,并对临床血清样品进行检测。结果隐孢子虫鼠基因型P23基因在大肠杆菌中获得了高效表达,Western blot检测显示rP23能被隐孢子虫感染兔血清识别。以纯化rP23为诊断抗原,成功地建立了检测兔隐孢子虫病的间接ELISA技术。对23份临床血清检测结果显示,该方法检出率高于Sheather's蔗糖漂浮法、套式PCR法。本研究结果为研制兔隐孢子虫病诊断试剂盒打下了基础。
- 张国恩米荣升苏庆美黄燕周鹏胡义彬秦培兰呼高伟陈兆国
- 关键词：原核表达间接ELISA
- 一例山羊暴发多种寄生虫混合感染及其防控思考
- 2011年
- 近年来，上海某羊场饲养的山羊先后暴发疾病，造成较严重的死亡和较大的经济损失，其中成年山羊的死亡率达8．67％～13．23％，羔羊的死亡率高达27．52％～48．13％。经流行病学调查、临床症状观察、病理学检测和实验室病原学诊断，确诊为多种寄生虫混合感染。通过采取综合防控措施，控制了病情，取得了良好效果，现报道如下。
- 陈兆国米荣升林矫矫
- 关键词：防控措施寄生虫山羊流行病学调查病原学诊断死亡率
- MicroRNA及其研究现状被引量：1
- 2012年
- MicroRNA（miRNA）是一类非编码的内源性小RNA分子，长度约20-25个核苷酸（nucleo-tides，nt），参与调控诸多基因的表达。miRNA的作用方式有2种：一种是通过与靶标基因mRNA的完全匹配结合，促使mRNA发生降解；另一种是通过不完全地与靶mRNA的3’非编码区（3’untrans-
- 呼高伟陈兆国程天印许娟
- 关键词：MICRORNA基因MRNA非编码区RNA分子内源性多基因
