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哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路与生理功能的调节研究进展被引量：8: 2012年; 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是调控蛋白质翻译起始阶段的一种蛋白激酶,与细胞的生长和细胞周期关系十分密切,近年来备受关注。文章就mTOR的结构,mTOR组成的上游信号和下游信号传导通路,mTOR在调节细胞增殖、促进细胞生长、参与免疫抑制和能量代谢及肿瘤发生等方面的作用进行了全面阐述,旨在为全面认识其功能并为相关疾病特别是肿瘤的治疗提供新的思路。; 王怡张姣姣杨炜蓉王莉娟王鲜忠; 关键词：MTOR 雷帕霉素信号传导

FSH通过cAMP、Ca^(2+)调节仔猪睾丸支持细胞的增殖被引量：11: 2010年; 本研究旨在阐明FSH调节睾丸支持细胞增殖的机制。试验以2～3周龄的仔猪睾丸支持细胞为实验材料,采用体外培养模型,通过细胞数量检测、ELISA和Western blot等方法研究FSH对睾丸支持细胞的调节作用。试验结果如下:(1)在0～50ng·mL-1内,随着FSH浓度的增加,睾丸支持细胞数量呈增加的趋势(P<0.05);当浓度为50ng·mL-1时,FSH促增殖作用最明显;细胞内cAMP的浓度也随着FSH的浓度而增加(P<0.05);(2)FSH作用后5min内就激活了ERK1/2级联反应,在48h内,ERK1/2的激活有一定的周期性;加入ERK1/2的抑制剂PD98059和U0126明显的降低了FSH诱导的睾丸支持细胞的增殖和PCNA的表达(P<0.05);(3)加入FSH和Forskolin增强了细胞的增殖和ERK1/2的激活(P<0.05);而加入Rp-cAMP则明显降低了FSH诱导的细胞增殖和ERK1/2的激活(P<0.05);L-Ca2+通道抑制剂Verapamil抑制了细胞的增殖和ERK1/2的激活;Rp-cAMP与Verapamil共同作用强于单独作用,表现出一定的协同效应(P<0.05)。结果表明,FSH通过cAMP、Ca2+激活ERK1/2,并通过ERK1/2调节PCNA的表达进而调节支持细胞的增殖。; 王鲜忠周玉兰赵伯川周银涛陈永军张姣姣王怡张家骅; 关键词：促卵泡素睾丸支持细胞

FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞skp2表达的影响被引量：2: 2011年; 本研究旨在确定促卵泡素是否可通过cAMP、Ca2+内流和细胞外调节的蛋白激酶(ERK1/2)调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中S期激酶相关蛋白2(skp2)的表达。以培养的仔猪睾丸支持细胞为实验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,运用Western blot检测skp2、p27kip1蛋白的表达,运用实时荧光定量PCR检测skp2mRNA的表达。结果发现,促卵泡素(50ng.mL-1)以时间依赖的方式促进了skp2蛋白和mRNA的表达(P<0.05),这一作用在30min时达到高峰。FSH(50ng.mL-1)和Forskolin(10μmol.L-1)均促进了skp2蛋白和mRNA的表达(P<0.05),但降低了p27kip1蛋白的水平,而Rp-cAMP、Verapamil和U0126都抑制了FSH的作用,使skp2蛋白和mRNA的表达有所下降,但提高了p27kip1蛋白的表达,但3种抑制剂单独作用时对skp2蛋白、mR-NA以及p27kip1蛋白的表达没有显著影响(P>0.05)。这表明FSH可能主要通过影响cAMP的产生和Ca2+内流,并激活ERK1/2通路调节skp2蛋白的表达,而skp2蛋白的水平与p27kip1蛋白成负相关。; 甘瑞左敬张国升朱峰伟孙燕王鲜忠张家骅; 关键词：促卵泡素睾丸支持细胞 S期激酶相关蛋白2 P27KIP1

17β-雌二醇对仔猪支持细胞周期的影响被引量：1: 2010年; 为了研究17β-雌二醇对仔猪睾丸支持细胞周期的影响,实验采用流式细胞术测定了细胞周期中DNA含量,分析了细胞周期细胞增殖指数(PI)和S期细胞指数(SPF)的变化。结果表明:低浓度的17β-雌二醇(10-10～10-7mol/L)能够促进支持细胞周期的转化,其中17β-雌二醇浓度为10-9mol/L时的作用最强;而高浓度的17β-雌二醇(10-6mol/L)则抑制支持细胞周期的转化。17β-雌二醇(10-9mol/L)能以时间依赖性促进支持细胞周期转化,其中24h的作用最明显。ERK1/2抑制剂U0126能减少17β-雌二醇诱导的细胞周期的转化。cAMP的激动剂8-Br-cAMP促进了细胞周期的转化,而抑制剂Rp-cAMP阻止了17β-雌二醇诱导的细胞周期的转化。表明17β-雌二醇对细胞周期的调节呈现一定的时间-剂量依赖性,cAMP和ERK1/2级联参与了这一过程。; 赵伯川程舒巧周玉兰周银涛王鲜忠张家骅; 关键词：17Β-雌二醇支持细胞细胞周期仔猪

17beta-雌二醇通过beta受体和cAMP-ERK1/2级联调节仔猪睾丸支持细胞cyclinA2 mRNA的表达被引量：1: 2011年; 【目的】确定雌激素是否通过雌激素受体以及在cAMP-细胞外调节的蛋白激酶(ERK1/2)调节培养条件下,未成熟仔猪睾丸支持细胞中cyclinA2 mRNA的表达。【方法】以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加雌激素受体抑制剂以及各种信号通路的抑制剂,应用实时荧光定量PCR检测cyclinA2 mRNA的相对表达量。【结果】17beta-雌二醇(10-9 mol.L-1)以时间依赖的方式促进了cyclinA2 mRNA的表达(P<0.05),这一作用在30 min时到达到高峰。雌激素非特异性受体抑制剂ICI182780、雌激素受体beta抑制剂(ERbetaAnt)和雌激素受体alpha抑制剂(ERalphaAnt)单独作用对cyclinA2 mRNA的表达与空白对照相比没有显著影响(P>0.05),但ICI 182780与ERbetaAnt,而不是ERalphaAnt抑制了17beta-雌二醇诱导的cyclinA2 mRNA的表达(P<0.05)。17beta-雌二醇(10-9mol.L-1)和forskolin均促进了cyclinA2 mRNA的表达(P<0.05),而Rp-cAMP、H-89和U0126都抑制了17beta-雌二醇(10-9mol.L-1)的活性(P<0.05),但3种抑制剂单独作用时对cyclinA2 mRNA的表达与空白相比没有显著影响(P>0.05)。【结论】17beta-雌二醇主要通过ERbeta受体、影响cAMP的产生和ERK1/2激活,进而调节cyclinA2 mRNA的表达。; 左敬甘瑞张国升张姣姣朱峰伟孙燕王鲜忠张家骅; 关键词：睾丸支持细胞雌激素受体

FSH和17β-雌二醇联合作用对仔猪睾丸支持细胞Skp2表达的调节被引量：2: 2011年; 【目的】确定FSH和雌激素联合作用是否可通过ERK1/2级联调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中Skp2的表达。【方法】以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,应用Western blotting和实时荧光定量PCR检测Skp2蛋白、mRNA的表达。【结果】FSH(50 ng.mL-1)和17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用时以时间依赖的方式促进了Skp2蛋白和mRNA的表达(P<0.05),这一作用在30 min时到达高峰;FSH(50 ng.mL-1)、17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)和forskolin单独作用均促进了Skp2蛋白和mRNA的表达(P<0.05),FSH(50 ng.mL-1)和17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用对Skp2表达的影响与FSH或17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)单独作用无显著差异(P≥0.05),而环磷酸腺苷抑制剂(Rp-cAMP)、蛋白激酶A(PKA)抑制剂(H-89)、L-Ca2+离子通道抑制剂(verapamil)和ERK1/2抑制剂(U0126)单独作用时对Skp2蛋白和mRNA的表达与空白对照相比无显著影响(P>0.05),但都抑制了FSH(50 ng.mL-1)与17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用对Skp2蛋白和mRNA表达的影响(P<0.05)。H-89、verapamil单独作用对ERK1/2(细胞外信号调节的蛋白激酶1/2)活性没有影响,但降低了FSH(50 ng.mL-1)和17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用对ERK1/2活性的影响。【结论】FSH与17β-雌二醇联合作用激活了cAMP-PKA级联和Ca2+内流,而PKA和Ca2+内流又通过影响ERK1/2的活性进而影响Skp2的表达。; 张国升左敬甘瑞朱峰伟孙燕王鲜忠张家骅; 关键词：FSH 17Β-雌二醇睾丸支持细胞 S期激酶相关蛋白2

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