江苏省中医药领军人才培养项目(LJ200911)
- 作品数：11 被引量：46H指数：5
- 相关作者：徐新荣杭丽于海涛丁淑华杨学文更多>>
- 相关机构：南京中医药大学江苏省中医院南京中医药大学附属医院更多>>
- 发文基金：江苏省中医药领军人才培养项目江苏省中医药管理局科技项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 枸杞提取物及其成分叶黄素/玉米黄质在体内外对年龄相关性黄斑变性防治的影响被引量：11
- 2013年
- 目的研究枸杞提取物在体内对高脂饮食及氢醌诱发的年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)模型小鼠的半胱氨酸组织蛋白酶B(cathepsin B,Cat B)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C,Cys C)表达的抑制作用,并探讨叶黄素和玉米黄质在体外对过氧化氢(H2O2)诱导的人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞的基质金属蛋白激酶(MMP)2、金属蛋白激酶组织抑制因子(TIMP)2表达的影响。方法 8个月龄的雌性C57BL/6小鼠50只。10只正常饮食作为年龄对照组;40只高脂饮食6个月后,在饮水中加入氢醌(0.8%)继续3个月,随机分为模型对照组(10只)、高、中、低剂量治疗组(每组10只)分别以3.75、2.50、1.25g/(kg·d)枸杞浸膏灌胃,每日1次,持续3个月。观察期满处死动物,摘取眼球。免疫组化观察Cat B、Cys C的表达,RT-PCR、Western blot检测Cat B、Cys C mRNA及蛋白表达;细胞增殖活性的检测筛选H2O2、叶黄素和玉米黄质的药物浓度,Western blot检测细胞中MMP-2、TIMP-2蛋白表达。结果在体内模型对照组的Cat B、Cys C mRNA及蛋白的表达显著强于年龄对照组(P<0.05,P<0.01),而治疗各组Cat B、Cys C mRNA弱于模型对照组(P<0.01),中、高剂量组Cat B及各剂量组CysC蛋白表达弱于模型对照组(P<0.05,P<0.01)。在体外细胞中叶黄素和玉米黄质能够下调受H2O2诱导的ARPE-19细胞的MMP-2、TIMP-2的蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论枸杞提取物能下调高脂饮食及氢醌诱发的模型小鼠Cat B、Cys C的高表达,叶黄素和玉米黄质对H2O2诱导的ARPE-19细胞MMP-2、TIMP-2的蛋白表达有下调作用。
- 黄冰林丁淑华杭丽郑仕中李伟徐新荣
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶抑制剂C叶黄素玉米黄质
- 柚皮素β-环糊精包合物的制备及对模型大鼠脉络膜新生血管形成的抑制作用被引量：5
- 2014年
- 目的:制备柚皮素β-环糊精(β-CD)包合物,研究其对模型大鼠脉络膜新生血管(CNV)形成的抑制作用。方法:采用饱和溶液法制备柚皮素β-CD包合物;利用红外光谱、X射线衍射法对包合物进行表征分析,测定柚皮素的含量与水溶解度;通过氪激光复制大鼠CNV模型,15只BN大鼠随机均分为溶媒对照(等容溶媒)组、柚皮素(20 mg/kg)组与柚皮素β-CD包合物(97.4 mg/kg)组,腹腔注射给药,每天1次,连续4周。以脉络膜铺片法测量大鼠CNV面积。结果:柚皮素和β-CD形成了稳定的包合物,柚皮素β-CD包合物中柚皮素质量分数为20.53%,柚皮素在水中的溶解度为单体的11.8倍。与溶媒对照组比较,柚皮素组、柚皮素β-CD包合物组大鼠CNV面积减小,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与柚皮素组比较,柚皮素β-CD包合物组大鼠CNV面积减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:柚皮素和β-CD包合后,水溶性增加;柚皮素β-CD包合物抑制模型大鼠CNV形成的作用优于柚皮素。
- 徐新荣于海涛杭丽邵雁丁淑华杨学文
- 关键词：柚皮素Β-环糊精包合物脉络膜新生血管
- 视网膜血管瘤样增生和湿性年龄相关性黄斑病变的鉴别被引量：4
- 2015年
- 视网膜血管瘤样增生(retinal angiomatous proliferation,RAP)是湿性年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)的一种特殊类型,临床一般分三期,晚期有新生血管形成,但与起源于脉络膜的新生血管不同,多数学者认为RAP的新生血管起源于视网膜深层毛细血管网。目前对RAP和湿性AMD两者到底是同一种疾病的不同亚型还是独立的两种疾病还存在争议,由于两者的病程、预后及治疗存在差异,因此临床鉴别诊断十分重要。近年来,随着吲哚菁绿血管造影(indocyanine green angiography,ICGA)技术和新一代光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)技术的应用,对RAP和湿性AMD的鉴别取得了显著进步。本文就两者的临床表现、自然病程、治疗方法及预后等方面做一综述。
- 杨艳徐新荣
- 关键词：视网膜血管瘤样增生年龄相关性黄斑变性视网膜
- 年龄相关性黄斑变性肝肾亏虚证血浆蛋白组学研究被引量：2
- 2012年
- 目的从蛋白质表达水平初步探讨年龄相关性黄斑变性(AMD)肝肾亏虚证的本质内涵。方法门诊确诊AMD肝肾亏虚证患者20例为观察组,AMD非肝肾亏虚证患者20例作为对照组。采集外周血,用双向凝胶电泳(2-DE)结合质谱分析、生物信息学分析方法对2组患者血浆蛋白进行比较蛋白质组学分析。结果发现有138个蛋白质斑点在2组凝胶中差异有统计学意义,获得有效鉴定及临床意义的蛋白质共16种。其中补体C1、补体因子B、成纤维细胞生长因子6、成纤维细胞生长因子13、肝细胞生长因子亚型6、胎盘生长因子亚型3、增殖细胞核抗原、激肽原1、真核翻译起始因子4、可溶性耐药相关钙结合蛋白亚型b、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶2表达上调,而补体因子I、色素上皮源性因子、αl-抗胰蛋白酶、αl-抗胰凝乳蛋白酶、NADH脱氢酶1α表达下调。结论 AMD肝肾亏虚证同时存在炎症损伤、补体激活、细胞增殖启动及细胞因子过表达,导致视网膜色素上皮细胞(RPE)损伤、代谢障碍及凋亡,同时也损伤血管内皮细胞,最终导致脉络膜新生血管(CNV)形成。这些差异蛋白可能作为AMD肝肾亏虚证的治疗靶点,对诊断和治疗有意义。
- 徐新荣魏源华黄冰林仲路周欣王玲王富强
- 关键词：年龄相关性黄斑变性肝肾亏虚证血浆蛋白蛋白质组学
- 中药治疗年龄相关性黄斑变性研究进展被引量：5
- 2013年
- 年龄相关性黄斑变性(AMD)是老年人主要的不可逆性致盲眼病之一。近年,湿性AMD的药物治疗取得了一定进展,但仍有不少问题有待深入研究,而干性AMD目前尚缺乏有效治疗药物。中药防治AMD的研究报道已有不少,并显示在AMD防治上有一定优势。本文就中药防治AMD的研究进展作一综述。
- 邵雁徐新荣
- 关键词：年龄相关性黄斑变性中药
- 柚皮素铜、锌配合物的制备及其对大鼠实验性脉络膜新生血管的抑制作用被引量：3
- 2013年
- 目的制备柚皮素铜、锌配合物,比较配合物与柚皮素对大鼠激光诱发脉络膜新生血管(CNV)的抑制作用。方法以柚皮素为配体与铜、锌金属离子分别在甲醇、乙醇溶液中配位,合成柚皮素铜、锌配合物,对配合物进行元素分析,利用红外、紫外光谱对配合物进行表征。采用氪激光制作大鼠CNV模型,模型动物随机分为溶媒对照组、柚皮素组及柚皮素铜、锌配合物4组,每组5只。视网膜光凝后开始给药,给药剂量:20mg/(kg·d),溶媒对照组给等体积的二甲基亚砜(DMSO)。腹腔注射给药,每日1次,连续4周。给药后4周进行荧光素异硫氰酸酯葡聚糖(FITC-D)食下静脉注射,用脉络膜铺片法测量CNV面积。结果柚皮素与铜、锌金属离子形成了稳定的配合物。实验动物CNV面积(×103)测定:溶媒对照组(34.56±1.67)μm2、柚皮素组(20.90±1.47)μm2、柚皮素铜配合物组(13.24±1.33)μm2、柚皮素锌配合物组(13.0±1.28)μm2。柚皮素及其铜、锌配合物组CNV面积明显小于溶媒对照组(P<0.05,P<0.01),柚皮素铜、锌配合物组则小于柚皮素组,(P<0.05)。结论柚皮素与铜、锌金属离子形成配合物后,生物活性显著增加,抑制模型大鼠CNV的作用强于柚皮素。
- 徐新荣于海涛杭丽邵雁丁淑华杨学文
- 关键词：柚皮素实验性脉络膜新生血管
- 柚皮铜配合物对激光诱发大鼠脉络膜新生血管形成的抑制作用被引量：1
- 2014年
- 目的:观察柚皮铜配合物对激光诱发大鼠脉络膜新生血管形成的抑制作用。方法:选取雄性Brown-Norway大鼠24只,其中18只建立大鼠脉络膜新生血管模型,6只12眼作正常对照。动物模型随机分为模型对照组和2个不同给药实验组,每组6只。模型建立后,实验组大鼠腹腔注射同等剂量的柚皮素、柚皮铜配合物[20mg/(kg·d)],对照组不给药。于造模后30d取各组视网膜-脉络膜-巩膜复合体标本,在荧光显微镜下观察脉络膜新生血管的面积,采集各组大鼠的脉络膜标本,采用RT-PCR及Western blot方法检测各组大鼠脉络膜组织中VEGF、COX-2、PI3K、MAPK、MMP-2、MMP-9mRNA与蛋白的表达。结果:与模型对照组相比,各实验组大鼠新生血管面积均减少,但柚皮铜配合物组较柚皮素组更明显,差异均具有显著统计学意义(P<0.01);模型组基因和蛋白表达水平均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);各实验组基因及蛋白表达水平与模型组相比均有所下降,除PI3K,MMP-9外,柚皮铜配合物组下降幅度大于柚皮素组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:相较于柚皮素,柚皮铜配合物有更好的生物活性,对激光诱发大鼠脉络膜新生血管的形成有更显著的抑制作用。
- 邵雁杭丽于海涛杨学文丁淑华徐新荣
- 关键词：柚皮素脉络膜新生血管COX-2
- 年龄相关性黄斑变性血浆蛋白质组学初步研究被引量：1
- 2013年
- 目的应用比较蛋白质组学技术,从蛋白质水平初步探讨年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)的发病机制。方法门诊确诊湿性AMD组患者13例(18眼)、干性AMD组患者11例(17眼),6名健康志愿者作为对照组。采集外周血,用双向凝胶电泳结合质谱分析、生物信息学分析方法对各组患者血浆蛋白进行比较蛋白质组学分析。结果正常对照组、干性AMD组、湿性AMD组中各样品图谱蛋白点平均匹配率分别为91.5%、92.2%、92.9%。发现有219个蛋白质斑点在3组凝胶中差异有统计学意义,获得有效鉴定及临床意义的蛋白质共28种。湿性AMD存在明显的补体激活、细胞生长因子相对高表达、细胞增生作用增强、抗损伤功能降低,而代谢障碍及抗氧化功能降低在干性及湿性AMD均存在。炎症损伤及由此触发的细胞增生在湿性AMD的发病过程中起了重要作用。结论 AMD患者血浆蛋白表达的改变,有助于阐明AMD发病机制,还可能作为AMD的治疗靶点,对早期诊断和治疗有意义。
- 徐新荣仲路黄冰林周欣魏源华王玲王富强
- 关键词：年龄相关性黄斑变性血浆蛋白蛋白质组学
- 槲皮素磷脂复合物激活Nrf2信号通道增强对氧化损伤ARPE-19细胞的保护作用被引量：6
- 2016年
- 目的研究槲皮素磷脂复合物对叔丁基氢过氧化物(tert-butyl hydroperoxide,tBHP)诱导ARPE-19细胞氧化损伤的保护作用及相关机制。方法采用溶剂法制备槲皮素磷脂复合物,并测定磷脂复合物在水和氯仿中的溶解度。实验细胞分组:溶媒对照组、模型对照组、槲皮素及其磷脂复合物组(含400μmol·L-1、200μmol·L-1和100μmol·L-1三个浓度)。MTT法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡,酶标仪检测细胞内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛、总抗氧化能力水平,荧光素DCFH-DA探针法测定细胞内活性氧含量,Real time PCR、Western Blot检测细胞核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶-1、醌氧化还原酶-1和谷氨酸半胱氨酸连接酶的表达水平。结果形成磷脂复合物后槲皮素在水和氯仿中的溶解度分别为(38.36±2.91)μg·m L-1、(1351.27±28.12)μg·m L-1,较单体显著提高;浓度为400μmol·L-1、200μmol·L-1和100μmol·L-1的槲皮素及其磷脂复合物对氧化损伤ARPE-19细胞有保护作用,而且高、中浓度的槲皮素磷脂复合物的作用优于单体;浓度为200μmol·L-1的槲皮素及其磷脂复合物均能降低氧化损伤ARPE-19细胞的凋亡率,槲皮素磷脂复合物作用明显优于单体;槲皮素磷脂复合物能显著提高细胞内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性,降低细胞内活性氧、丙二醛水平,槲皮素单体则不能,但槲皮素及其磷脂复合物能提高细胞内总抗氧化能力;槲皮素及其磷脂复合物能诱导Nrf2核转位,激活Nrf2通道,上调血红素加氧酶-1、醌氧化还原酶-1和谷氨酸半胱氨酸连接酶的表达。结论槲皮素形成磷脂复合物后,水溶性、脂溶性提高,对氧化损伤ARPE-19细胞的保护作用比单体强,其作用机制与激活Nrf2信号通路,上调下游Ⅱ相代谢酶和抗氧化酶的表达有关�
- 杨艳于海涛杭丽丁淑华徐新荣
- 关键词：槲皮素磷脂复合物NRF2
- 柚皮素β-环糊精包合物对大鼠实验性脉络膜新生血管的抑制作用被引量：5
- 2015年
- 背景脉络膜新生血管（CNV）是导致多种眼底疾病致盲的主要原因，目前仍无有效的治疗方法。研究表明柚皮素能够抑制CNV的发生和发展，但由于其水溶性差而影响其生物利用度。β-环糊精（β-CD）可提高药物的水溶解度，但其与柚皮素包合后是否能改善柚皮素抑制CNV的作用尚不清楚。目的制备柚皮素β-CD包合物，比较其与柚皮素对大鼠CNV的抑制作用。方法采用饱和溶液法制备柚皮素β-CD包合物，依据标准曲线法测定包合物中柚皮素的水溶解度。采用随机数字表法将32只SPF级健康雄性Brown—Norway大鼠分为正常对照组、模型对照组、柚皮素组和柚皮素β-CD组，每组8只。采用氪激光法在模型对照组、柚皮素组及柚皮素β-CD组大鼠右眼制作CNV模型。于视网膜光凝当天起柚皮素组和柚皮素β-CD组大鼠腹腔内分别注射20mg／kg柚皮素和相同质量浓度柚皮素的β-CD包合物，每日1次，连续4周，模型对照组大鼠腹腔注射等容积的DMSO。给药后第4周经大鼠食下静脉注射荧光素异硫氰酸酯葡聚糖（FITC—D），制备脉络膜铺片，测量大鼠CNV面积；从各组大鼠实验眼分离出视网膜色素上皮（RPE）-脉络膜-巩膜复合体组织标本，分别采用实时荧光定量PCR及Western blot法检测标本组织中血管内皮生长因子（VEGF）、环氧化酶-2（COX-2）、磷脂酰肌醇（-3）激酶（PI3K）、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9 mRNA及其蛋白的相对表达量。结果柚皮素经β-CD包合后在水中的溶解度较原药提高了11．8倍。模型对照组、柚皮素组和柚皮素β-CD组CNV面积分别为（34．56±1．67）、（20．90±1．47）和（13．20±1．38）×10^3μm^2，柚皮素组、柚皮素β-CD组大鼠CNV面积明显小于模型对照组，差异均有统计学意义（t=3．973，P〈0.05；t=5．532，P〈0．01），柚皮素β-CD组大�
- 徐新荣于海涛杭丽邵雁丁淑华杨学文
- 关键词：柚皮素Β-环糊精包合物脉络膜新生血管
