天津市科技发展战略研究计划项目(003119811)
- 作品数:9 被引量:33H指数:4
- 相关作者:邱录贵李茜韩忠朝韩俊领翟琼莉更多>>
- 相关机构:中国医学科学院中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医学院天津市脐带血造血干细胞库更多>>
- 发文基金:天津市科技发展战略研究计划项目天津市自然科学基金国家攀登计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 细胞因子介导的体外扩增对脐血干/祖细胞粘附分子表达的影响被引量:5
- 2002年
- 目的比较脐血(CB)AC133+细胞扩增前后CD34+ 细胞亚群表面归巢相关粘附分子VLA-4(CD49d)、VLA-5(CD49e)、LFA-1(CD11a)、L-selectin(CD62L)和PECAM-1(CD31)等的表达情况,以评价细胞因子介导的体外扩增对干/祖细胞(HSPC)归巢功能的影响。方法将从新鲜CB标本中纯化的AC133+ 细胞接种于无血清培养基QBSF-60的无基质悬浮体系培养扩增14d,加入早期作用因子FL、SCF和TPO组合(FST),并在接种0d时添加一剂IL-3,分别于培养0,7、10和14d检测扩增潜能和上述几种粘附分子的表达情况。结果(1)在14d的培养扩增中,各阶段的HSPC均得到有效扩增,至14d时AC133+和CD34+细胞分别增加33.50和64.56倍;(2)表达上述粘附分子的各CD34+ 细胞亚群均有不同程度(约20~160倍)的扩增;(3)扩增后CD34+ 细胞表面的粘附分子CD11a、CD49e和CD49d的表达与原代CD34+细胞持平或上升,而CD62L和CD31的表达则有不同程度的下调。结论我们建立的短期培养体系不仅可以支持CB HSPC的?
- 翟琼莉邱录贵刘燕李茜韩俊领周征李新应红光韩忠朝
- 关键词:脐血粘附分子细胞因子介导
- 脐血间充质干细胞鉴定及其生物学特性研究被引量:7
- 2004年
- 孙爱红冯四洲冯义张磊卢士红韩忠朝
- 关键词:脐血充质干细胞MSC细胞生长
- 脐带血AC133^+细胞体外扩增及生物学特性的研究被引量:2
- 2004年
- 目的研究脐带血穴UCB雪AC133+细胞体外扩增及其生物学特性,动态观察AC133+细胞的免疫表型变化,以了解AC133+抗原与CD34抗原的关系。方法将从新鲜UCB标本中纯化的AC133+细胞接种于无血清无基质的悬浮体系,分别于培养0、7、10、14天检测扩增潜能、免疫表型和集落形成等指标。结果①自早期的AC133+CD34-、AC133+CD34+、CFC-HPP、CFU-GEMM、AC133+及CD34+细胞群至各系定向祖细胞等各阶段造血干/祖细胞穴HSPC雪均得到持续显著的扩增;②AC133+和CD34+细胞的比例随培养时间的延长而迅速降低,AC133+细胞在CD34+细胞中的比例亦明显下降穴从99%降至50%雪,但同一时点AC133/CD34亚群比例均呈现出AC133+CD34-
- 闫凤英李茜韩俊领李新邱录贵韩忠朝
- 关键词:脐带血体外扩增免疫表型生物学特性造血干细胞
- 脐血干/祖细胞短期体外扩增后归巢相关粘附特性的研究被引量:1
- 2003年
- 目的 探讨体外扩增对脐血 (UCB)造血干 祖细胞 (HSPC)原有粘附功能的影响。方法 将从新鲜UCB标本中纯化的CD34+ 细胞接种于无血清、无基质的悬浮扩增体系 ,分别于培养第 7天、第10天和第 14天从扩增产物中再次纯化CD34+ 细胞 ,比较扩增前后CD34+ 细胞表面VLA 4 (CD4 9d)、VLA 5(CD4 9e)、LFA 1(CD1 1a)、L selectin (CD6 2L)、PECAM 1(CD31 )、ICAM 1(CD54)和HCAM(CD4 4)等归巢相关粘附分子 (CAMs)的表达情况 ,并检测CD34+ 细胞与纤连蛋白 (FN)间的自发粘附率和基质细胞来源因子 1(SDF 1)诱导粘附率。结果 ①在第 14天的培养扩增中 ,表达上述CAMs的各CD34+ 细胞亚群均有不同程度 (15~ 72倍 )的扩增 ;②扩增后CD34+ 细胞表面粘附分子CD4 4、CD1 1a、CD4 9e和CD4 9d的表达与原代CD34+ 细胞持平或高于培养开始时水平 ,而CD6 2L、CD54和CD31 的表达则有不同程度下调 ;③在前 10d的扩增中 ,CD34+ 细胞与FN间的自发粘附率和SDF 1诱导粘附率均呈上升趋势。结论 所建立的短期培养体系不仅可以支持表达重要CAMs的UCBCD34+ 细胞亚群的有效扩增 ,而且扩增后的HSPC总体上保持原有的粘附功能。
- 翟琼莉周余邱录贵李茜韩俊领于珍孟恒星应红光王亚非韩忠朝
- 关键词:脐血
- 天津地区2854份脐血HLA-Ⅰ类等位基因多态性分析被引量:6
- 2003年
- 杨丛林杨丛林梁晓岚王晓静燕丽王晓静王晓静
- 关键词:脐血等位基因多态性分析
- 体外扩增中CD34^+细胞CD38与HLA-DR抗原表达的变化
- 2003年
- 翟琼莉王亚非周余李茜孟恒星邱录贵
- 关键词:体外扩增CD34^+细胞CD38HLA-DR抗原
- 脐血CD_(34)^+细胞迁移能力在体外扩增过程中的变化被引量:3
- 2004年
- 目的 比较扩增前、后脐血 (CB)CD34+ 细胞在体外的迁移能力及细胞表面趋化因子CXCR4的表达情况。方法 将从新鲜CB标本中纯化的CD34+ 细胞接种于已建立的扩增体系 ,分别于培养 7,10和 14d从扩增产物中再纯化CD34+ 细胞 ,检测培养不同时间CD34+ 细胞的自发迁移率和SDF 1诱导迁移率以及CD34 + 细胞表面CXCR4的表达。结果 ①原代和扩增不同时间CD34 + 细胞的SDF 1诱导迁移率均高于自发迁移率 ;②扩增 7d时CD34+ 细胞的自发迁移率和SDF 1诱导迁移率与原代CD34+ 细胞相当 ,但在第 2周的培养中 ,CD34+ 细胞的两种迁移率均明显下降 (P值均 <0 .0 5 ) ;③扩增后CD34 + CXCR4 + 细胞的数量明显增加 ,但CXCR4在CD34 + 细胞上的表达呈下降趋势 ,14d时显著低于原代细胞的表达水平 (P <0 .0 5 )。结论 CB造血干 祖细胞 (HSPC)在已建立的短期培养体系中扩增 1周可保持原有的迁移功能 ,但持续扩增则可能对HSPC的归巢潜能产生不利影响。
- 翟琼莉王亚非李茜刘拥军于珍周余孟恒星邱录贵韩忠朝
- 关键词:脐血CD34^+细胞细胞迁移体外扩增造血祖细胞趋化因子
- 26例动员外周血干细胞的程控降温冷冻保存效果评价被引量:6
- 2006年
- 目的评价程控降温冷冻保存高浓度外周血干细胞的效果。方法采集动员的患者外周血干细胞,用程控降温系统降温至-80℃后保存于液氮中。冷冻前和解冻后均做有核细胞计数、粒单-集落形成单位(colonyformingunit-granulocyte/macrophage,CFU-GM)培养和苔盼蓝拒染率实验。结果冷冻的外周血有核细胞终浓度平均为1.405×108/ml,融化后有核细胞和CFU-GM回收率分别为80.64%±11.51%和94.01%±25.42%;拒染率为84.69%±8.72%。26例患者除1例死于预处理毒性不能进行评价外,余者均获得快速稳定造血功能重建。结论程控降温冷冻保存高浓度的外周血干细胞是一种安全有效的方法。
- 方健赵英新姜容武文杰房敬超王玫韩俊领
- 关键词:冷冻保存外周血干细胞移植
- 两步法从脐血CD_(34)^+细胞获得大量树突细胞的初步研究被引量:4
- 2004年
- 目的 探索利用先扩增后诱导的“两步法”从脐血 (CB)CD34+ 细胞高效大量地获得树突细胞 (DC)。方法 免疫磁珠法从CB分选获得CD34+ 细胞 ,以干细胞因子 (SCF)、IL 3、Flt 3配体 (FL)、Tpo组合刺激 ,扩增 7d、10d和 14d(依次为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组 )后以GM CSF +IL 4 +TNF α诱导 8d或 5d获得DC ,通过相差显微镜、电镜观察形态 ,流式细胞仪检测表型 ,混合淋巴细胞培养、ELISA法检测培养液上清IL 12含量评价其功能。结果 CBCD34+ 细胞经SCF +IL 3+FL +Tpo刺激扩增 7d、10d和 14d后细胞总数分别扩增了 (5 3.39± 2 0 .5 9)倍、(30 7.17± 119.5 9)倍和 (1117.2 5± 335 .4 9)倍。经GM CSF +IL 4 +TNF α诱导 8d后所得CD1a+ 细胞是扩增前细胞数的 (2 1.4 0± 16 .70 )倍、(14 3.2 0± 6 0 .35 )倍和(15 0 .80± 4 2 .16 )倍 ,Ⅱ、Ⅲ组明显多于Ⅰ组 (P <0 .0 5 ) ,但Ⅱ、Ⅲ组间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。所得DC的形态、表型及刺激异基因T细胞增殖能力、IL 12分泌量 ,三组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。当诱导时间缩短至 5d时 ,各组DC功能均显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 CBCD34+ 细胞扩增 7~ 10d再诱导 8d可以高效大量获得具有正常功能的DC ,而扩增时间超过 10d并不能显著增加DC产量 。
- 王亚非李茜孟恒星于珍刘津华崔雯周余麦玉洁尤胜国邱录贵
- 关键词:两步法脐血CD34^+细胞树突细胞免疫磁珠法体外扩增