国家自然科学基金(30572056)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：孙善珍宋樱曲迅王文霞张晓英更多>>
- 相关机构：山东大学山东省肿瘤医院青岛大学更多>>
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- 姜黄素对舌鳞状细胞癌Tca8113侵袭和迁移影响的实验研究
- 2008年
- 目的研究姜黄素对舌鳞状细胞癌明胶酶分泌的影响，探讨舌鳞癌侵袭和转移的机制。方法收集不同浓度（0～100μmol／L）姜黄素作用Tea811324h后的细胞上清液，采用明胶酶谱法（gelatin zymography）检测上清液中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-2和MMP-9活性的变化；同时采用Transwell小室建立细胞体外侵袭迁移模型，检测不同浓度姜黄素对Tca8113细胞侵袭和迁移能力的影响。结果25μmol／L姜黄素作用24h后，MMP-9活性降低86．8％，50～100μmol／L姜黄素作用24h后，则检测不到MMP-9的活性，抑制率接近100％；25μmol／L和50μmol／L姜黄素作用24h后，MMP-2活性降低40％左右，在75μmol／L和100μmol／L时，抑制率达90％。姜黄素可显著降低细胞的侵袭迁移能力，经分析，以上结果具有统计学意义（P〈0．01）。结论姜黄素可以通过抑制明胶酶的分泌抑制Tca8113细胞的侵袭和迁移。
- 王文霞孙善珍郭小玲宋樱
- 关键词：姜黄素肿瘤转移
- 靶向survivin基因的shRNA真核质粒表达稳定株的筛选和建立被引量：3
- 2008年
- 目的:针对survivin基因,构建短发卡状RNA干扰(short hairpin RNA interference,shRNA interference)真核质粒表达载体,并转染到高表达survivin基因的舌鳞癌细胞株Tca8113中,筛选出稳定低表达survivin基因的细胞株。方法:针对survivin基因的mRNA序列设计,并合成2对寡核苷酸序列,插入质粒pSilencerTM-2.1U6-neo中,形成重组质粒(PS1和PS2)。用大肠杆菌扩增,酶切、PCR、测序鉴定,用脂质体介导转染Tca8113细胞,G418筛选得到稳定表达株,荧光实时定量PCR和Western印迹检测survivin基因在mRNA和蛋白水平的变化。采用SAS8.0软件包对数据进行t检验。结果:2个真核质粒表达载体均构建成功,并筛选出转染成功的细胞。与对照组相比,PS1和PS2转染的Tca8113细胞中的survivin基因在mRNA水平均显著下降,P<0.05;在蛋白水平,PS2转染后显著下降,P<0.01。结论:本研究成功建立针对survivin基因的shRNA质粒载体,并筛选出稳定低表达survivin基因的Tca8113细胞,为口腔鳞癌的基因治疗提供了理论基础。
- 王文霞孙善珍宋樱
- 关键词：SURVIVIN基因RNA干扰质粒
- 缺氧条件下缺氧诱导因子-1α对人舌鳞癌细胞血管内皮生长因子表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨缺氧条件下缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对人舌鳞癌细胞株 Tca8113细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法采用 RT-PCR 技术半定量检测人 Tca8113细胞常氧和缺氧培养0.5、1、3、6、12和24 h HIF-1α、VEGF 基因的表达。结果缺氧条件下 HIF-1α基因的表达呈先升后降的趋势,在缺氧6、12 h 表达显著高于常氧组(P<0.05);VEGF 的表达在缺氧培养0.5、1、3、12及24 h 均高于常氧组(P<0.05);VEGF 基因的表达在缺氧初始阶段随 HIF-1α基因表达的增强而升高,但 Spearman 相关分析显示两者在缺氧24 h 内相关性不明显(r_s=0.5750,P>0.05)。结论缺氧条件下 Tca8113细胞中 VEGF 的高表达受 HIF-1 α的调控和影响,是多种因素作用的结果。
- 张晓英王霞孙善珍宋樱杨美香曲迅
- 关键词：细胞低氧鳞状细胞缺氧诱导因子-1Α
- 乏氧对人舌鳞癌细胞系Tca8113体外黏附和侵袭能力的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:研究乏氧及人乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因表达对舌鳞癌Tca8113细胞系黏附和侵袭能力的影响。方法:将化学合成的siRNAHIF-1α转染入Tca8113细胞后进行常氧或乏氧(1%O2)培养。实验设以下对照组:空白对照组、脂质体组及非特异性siRNA(siRNAIrr)组。采用real time-PCR和Western blot法测定细胞中HIF-1αmRNA表达和蛋白含量,并分别检测HIF-1α基因干扰前后细胞对细胞外基质(ECM)的黏附与侵袭力。结果:乏氧能够诱导Tca8113细胞的黏附与侵袭力增加。乏氧培养条件下,HIF-1α的表达上调主要发生在蛋白水平。siRNAHIF-1α转染后常氧或乏氧培养24 h,HIF-1αmRNA表达显著下调,与各对照组相比有统计学意义(P<0.01),Tca8113细胞内HIF-1α蛋白含量亦显著降低。无论在常氧还是乏氧培养条件下,siRNAHIF-1α转染的Tca8113细胞黏附力与各对照组相比均显著降低(P<0.05或P<0.01);侵袭力也显著降低(P<0.01)。乏氧条件下siRNAHIF-1α转染的Tca8113细胞黏附力和侵袭力下降程度高于常氧培养〔(36.4±2.7)%vs(26±2.35);(44.2±2.2)%vs(35±1.75),P<0.01)〕。结论:化学合成的靶向HIF-1α的siRNA能够下调Tca8113细胞中HIF-1α基因的表达,降低细胞对ECM的黏附和侵袭力,可能成为抑制肿瘤转移的基因治疗的新途径或新靶点。
- 宋樱孙善珍曲迅王文霞张晓英宋宝
- 关键词：口腔肿瘤HIF-1基因沉默
- 缺氧条件下HIF-1α对舌鳞癌细胞VEGF-C及FAS表达的影响被引量：4
- 2010年
- 目的探讨缺氧条件下人舌鳞癌Tca8113细胞株HIF-1α对VEGF-C及FAS基因表达的影响。方法采用RT-PCR技术半定量检测人Tca8113细胞常氧和缺氧培养0.5、1、3、6、12和24h HIF-1α、VEGF-C和FAS基因的表达。结果缺氧条件下HIF-1α与VEGF-C基因表达呈先升后降的趋势,二者表达呈显著正相关性(rs=0.979,P<0.01)。FAS基因表达呈上升趋势,与HIF-1α表达无明显相关性(rs=0.556,P>0.05)。结论缺氧条件下Tca8113细胞中HIF-1α可上调VEGF-C的表达,促进癌细胞的转移;HIF-1α参与促进肿瘤细胞FAS的表达,影响舌癌细胞的凋亡。
- 王霞王培源曲迅孙善珍
- 关键词：缺氧HIF-1ΑVEGF-CFAS
