浙江省科技计划项目(2009C33147)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
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- 膜结合型HLA-G1～G4分子的克隆表达及对NK细胞杀伤功能的影响
- 2010年
- 目的 探讨膜结合型HLA-G1～G4异构体的表达及对NK细胞杀伤功能的影响.方法 通过基因克隆及转染,分别建立稳定表达HLA-G1～G4抗原的人绒癌JAR细胞株.采用RTPCR、流式细胞术、Western blot及免疫细胞化学法分析、鉴定转染细胞中HLA-G的mRNA及蛋白表达.通过加载HLA-G高亲和性KIPAQFYIL抗原肽,观察对HLA-G表达的影响.LDH释放法检测HLA-G1～G4表达对NK细胞杀伤活性的影响.结果 RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学结果显示,HLA-G1～G4/pVITRO2-mcs重组质粒成功转染HLA-G表达阴性的人绒癌JAR细胞株.FACS分析显示HLA-G1抗原能在JAR-HLA-G1细胞株表面表达,HLA-G2～G4抗原不能有效到达细胞表面.体外杀伤试验发现表达HLA-G1～G4抗原的细胞均能抑制NK细胞的杀伤活性（P＜0.05） 加载HLA-G高亲和性KIPAQFYIL抗原肽对HLA-G表达无明显影响,对NK细胞杀伤抑制程度也未见明显改变.结论 HLA-G1～G4能够明显抑制NK细胞的杀伤活性,提示不同膜结合型HLA-G异构体分子均能作为免疫耐受分子,具备免疫调节功能.
- 许惠惠林爱芬颜卫华
- 关键词：HLA-G
- 组织生物样本库中冷冻组织质量鉴定体系的建立被引量：6
- 2010年
- 目的:建立组织生物样本库中储存的冷冻组织样本的质量鉴定体系。方法:随机选取浙江省台州医院组织库中肝癌、胃癌冷冻组织及正常对照组织各20例,HE染色评估标本取材的准确性,Agilent2100生物分析仪检测RNA纯度和完整性,Western blot和琼脂糖电泳分别测定组织样本的蛋白质和DNA质量。结果:HE染色观察到受检样本肿瘤部分均达到80%以上,RNA完整系数(RIN)为7.1～8.4,28s/18s比值为1.5～1.8,受检样本蛋白质及DNA均保存完好,无明显降解。结论:本研究介绍的冷冻组织质量鉴定体系,采用的方法可靠,可以作为组织生物样本库冷冻组织样本质量鉴定的有效且常规方法。
- 包卫光林爱芬章霞颜卫华陈海啸
- 关键词：HE染色DNA免疫印迹法
