国家火炬计划(2007GH020171)
- 作品数：2 被引量：13H指数：1
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- 相关机构：生物技术有限公司华南理工大学更多>>
- 发文基金：国家火炬计划广东省教育部产学研结合项目广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- HIV-1整合酶基因合成与其在大肠杆菌中的高效表达
- 2009年
- 目的:通过人工合成HIV-1整合酶(integrase,IN)基因的编码序列,提高目的蛋白的表达。方法:根据IN的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏好的密码子,设计并合成了877碱基,共编码288个氨基酸,克隆入pMD18-T载体,经测序证实后,构建原核表达载体pET-His-p31,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果:酶切及测序结果表明表达载体构建成功,工程菌诱导表达后的电泳图谱在相对分子质量为32kDa的位置出现明显目的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的65.9%,Western blot结果表明表达的聚合酶蛋白能与HIV-1阳性血清发生特异性反应。结论:已获得高效表达工程菌pET-His-p31,为下一步研究HIV诊断试剂奠定基础。
- 赵喜红何小维李文美王继华杨连生彭运平刘晓云
- 关键词：聚合酶基因合成
- 大肠杆菌表达包涵体蛋白体外复性研究进展被引量：13
- 2010年
- 包涵体形成是大肠杆菌表达重组蛋白常见的问题。因此,为获得大量的活性蛋白而对其包涵体进行复性的研究引起了人们极大兴趣。本文综述了近年来发展起来的低分子量添加物、反胶团、分子伴侣、层析复性等新的复性方法、复性检测方法和体外复性机制。
- 赵喜红何小维李文美杨连生王继华彭运平刘晓云
- 关键词：包涵体蛋白复性重组蛋白
