国家自然科学基金(30760022)
- 作品数：4 被引量：25H指数：3
- 相关作者：梁文裕王星陈伟焦广飞张喜娟更多>>
- 相关机构：宁夏大学福建农林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 发状念珠藻多糖的提取及其对农作物种子发芽率的影响被引量：5
- 2008年
- [目的]为发状念珠藻多糖的提取、开发及生物学活性研究提供试验及理论基础。[方法]以发状念珠藻为材料，用石油醚脱脂脱色素，80％的乙醇去可溶性小分子糖类，用水作提取剂，98℃下提取3次，每次3h，合并提取液后减压浓缩，三氯乙酸脱蛋白，SephadexG-50层析纯化，醇析后冷冻干燥，进行红外光谱测定和种子发芽试验。[结果]结果表明，发状念珠藻多糖得率为15．8％～19．7％，红外光谱的特征吸收峰明显，是一种含氨基和B糖苷键，不含硫酸基的多糖。当多糖浓度为1．0mg／L时油菜种子、小麦种子、水稻种子和胡麻种子的发芽率分别比对照组增加14．29％、12．79％、4．40％和15．48％，而多糖浓度为2．0mg／L时白菜和玉米种子的发芽率分别比对一照组增加11．24％和22．50％。
- 梁文裕马秀丽郑国旗谢亚军尹晓雯王星
- 关键词：发菜多糖发芽率生物学活性
- 发菜蛋白质组双向电泳技术的建立及优化被引量：15
- 2009年
- 为建立适用于发菜（Nostoc flagelliforme）蛋白质组研究的双向电泳技术，对发菜蛋白质的提取、裂解、上样量、IEF及SDS-PAGE电泳等关键步骤进行了优化，结果显示：发菜蛋白质主要分布在pH4～7范围内，采用改良TCA法可提高提取液中蛋白质的含量和双向电泳图谱的分辨率，裂解液含60mmol／LDTT，24cm IPG胶条上样量1．5mg时不仅提高了蛋白质的溶解性，而且改善了双向电泳的分离效果，得到近800个蛋白点，且蛋白点清晰，图谱分辨率较好。采用优化后的双向电泳体系提高了发菜蛋白质双向电泳的分辨率和重复性，建立起一套适用于发菜蛋白质组分析的双向电泳方法。
- 梁文裕王星焦广飞张喜娟陈伟
- 关键词：发菜双向电泳蛋白质组学
- 发菜藻蓝蛋白基因克隆及原核表达被引量：1
- 2011年
- 发菜(Nostoc flagelliforme)是一种陆生固氮蓝藻,具有重要的经济和生态价值。运用双向电泳技术、MALDI-TOF-TOF/MS鉴定和数据库检索,获得藻蓝蛋白部分氨基酸序列并设计简并性引物,克隆藻蓝蛋白基因并研究其表达。结果表明,发菜藻蓝蛋白α和β亚基两个基因的编码序列及两者之间的间隔序列全长为1097bp,编码β亚基和α亚基的基因序列全长分别为519bp和489bp,β亚基基因序列位于α亚基基因序列上游,两者之间通过89bp的基因片段连接,GenBank登录号为GU549478,并对推译的α和β亚基三维结构进行了预测。将藻蓝蛋白的α和β亚基基因在大肠杆菌中表达,获得了符合预期的外源重组蛋白。研究结果为进一步研究发菜藻蓝蛋白的分子结构及生物学功能奠定了基础。
- 焦广飞梁文裕陈伟庄惠其翁兆霞许鸿川
- 关键词：发菜亚基基因藻蓝蛋白双向电泳原核表达
- 发菜藻蓝蛋白分离纯化的研究(英文)被引量：6
- 2008年
- 以发菜为材料,比较了提取液类型和饱和硫酸铵浓度对藻蓝蛋白提取的影响,并对藻蓝蛋白的提取程序和部分特性进行了研究。结果表明：50 mmol/L KP缓冲液（pH值7.2）是合适的提取液,体积分数为40%～50%饱和硫酸铵盐析效果优于其它浓度。经过DEAE-Toyopeal 650 S离子交换层析和Superdex^TM 200凝胶过滤层析后,藻蓝蛋白纯度达6.2,最大吸收峰位于615 nm,荧光发射峰位于649 nm,由α和β2个亚基组成,其分子质量分别为18 051.17和19 142.27 Da。因此,发菜藻蓝蛋白分离纯化较为理想的程序为：藻粉→50 mmol/L KP缓冲液（pH值7.2）浸泡→French pressure（1 500 kg/cm^2）破碎细胞→40%～50%饱和硫酸铵盐析→DEAE-Toyopeal 650 S离子交换层析→Superdex^TM 200凝胶过滤层析→较纯的藻蓝蛋白。
- 梁文裕NISHIFUJI Taku
- 关键词：发菜藻蓝蛋白分离纯化分子量
