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干细胞向雏鸡和成年豚鼠耳蜗的移植方法: 2009年; 目的建立干细胞向雏鸡和成年豚鼠耳蜗移植的方法。方法从绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转基因胚胎小鼠中分离出GFP标记的嗅球神经干细胞。雏鸡耳蜗的干细胞移植是经外耳道剥离鼓膜,暴露中耳腔的蜗窗,再经蜗窗膜造孔注入干细胞。成年豚鼠耳蜗鼓阶的干细胞移植是行耳后切口暴露听泡,在耳蜗底转近镫骨动脉处钻孔,并注入干细胞。中阶的移植是经耳蜗第三转的血管纹外侧壁注入干细胞。细胞移植1天后,分离雏鸡和豚鼠的耳蜗作冰冻切片,在荧光显微镜下观察移植细胞的分布。结果分离出GFP标记的嗅球神经干细胞。移植后的干细胞可分布于雏鸡耳蜗及豚鼠耳蜗的鼓阶、中阶。结论成功建立了干细胞向雏鸡和成年豚鼠耳蜗移植的方法,为进一步将干细胞应用于耳聋的治疗及机制研究奠定基础。; 陈俊王枫钟翠萍韩宇查定军薛涛邱建华; 关键词：细胞移植耳蜗

外源性谷氨酸对大鼠耳蜗核的毒性损伤实验研究被引量：1: 2007年; 目的建立一种立体定位注射谷氨酸损伤大鼠耳蜗核的动物模型并观察其损伤特点。方法采用脑立体定位技术向成年Wistar大鼠右侧耳蜗核注射10mmol/L的谷氨酸2μl,左侧耳蜗核注射等量生理盐水,术后不同时间进行听性脑干反应测试,并用免疫组化方法观察耳蜗核的神经元和神经胶质细胞变化。结果术前大鼠ABR阈值平均22.23±3.04dBSPL,手术后ABR阈值右侧平均58.24±22.13dBSPL,左侧59.28±22.30dBSPL,较术前明显升高(P<0.01)。术后第7d,ABR阈值右侧平均49.42±25.17dBSPL,左侧平均45.19±22.45dBSPL,术后10d,ABR阈值右侧平均43.27±17.16dBSPL,左侧平均38.32±16.20dBSPL,右侧与左侧比较差异无显著统计学意义(P>0.05)。耳蜗核免疫组化结果证实注射点神经元减少,局部形成空腔及坏死灶,神经胶质细胞在坏死灶周围增生,右侧损伤较左侧明显。结论立体定位注射技术可以建立大鼠耳蜗核的损伤模型,谷氨酸可以加重其听力损伤。听力损失在术后有自恢复的趋势。; 陈阳邱建华刘顺利; 关键词：谷氨酸神经毒性耳蜗核

大鼠嗅上皮神经干细胞自体免疫原性的体外测定被引量：1: 2008年; 目的本实验拟阐明大鼠嗅上皮神经干细胞(NSCs)的免疫原性,为临床NSCs移植治疗和免疫排斥反应的防治提供一定的实验依据。方法本实验通过将成年大鼠嗅上皮分离、培养出巢蛋白免疫反应阳性并能分化为神经元和星形胶质细胞的NSCs。将大鼠嗅上皮NSCs分别与自体以及异体外周血单核细胞(PBMCs)共培养,共分为4组,使用cck-8比色法测定刺激后外周血单核细胞增殖能力,观察不同来源NSCs刺激PBMCs的增殖情况。结果异体的嗅上皮NSCs对于PBMCs的刺激增殖能力明显强于同体细胞。结论嗅上皮NSCs在体外有一定的免疫原性,可促进PBMCs增殖,移植时需注意免疫排斥问题。; 薛涛查定军乔莉陈福权卢连军邱建华; 关键词：嗅上皮神经干细胞免疫原性

毒性损伤大鼠耳蜗核移植嗅球神经前体细胞的初步观察被引量：4: 2007年; 目的体外培养大鼠嗅球神经前体细胞,并移植到谷氨酸诱导损伤的耳蜗核,观察其生存、分化过程。方法嗅球神经前体细胞取自孕15d胚胎大鼠,免疫荧光染色鉴定。耳蜗核定位注射谷氨酸制成损伤模型。伤后7d移植标记的神经前体细胞,不同时间测定听性脑干反应并取材观察移植细胞的存活及分化。结果巢蛋白阳性的嗅球神经前体细胞在体外可自我复制传代,并分化出神经元和神经胶质细胞。谷氨酸损伤和前体细胞移植均造成听性脑干诱发反应(ABR)阈值升高,并有部分的恢复。免疫荧光技术发现耳蜗核中Hoechst33342分别和神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、谷氨酸双重标记的移植细胞。结论嗅球神经前体细胞移植耳蜗核短期存活良好,所分化出的神经元可表达听觉神经递质。; 陈阳陈福权邱建华刘顺利米文娟; 关键词：干细胞嗅球神经元

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