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天津市自然科学基金(08JCZDJ16200)
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
相关作者:
王德芝
张春明
佟晓丽
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相关机构:
中国医学科学院北京协和医学院
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发文基金:
天津市自然科学基金
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相关领域:
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佟晓丽
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王德芝
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生物医学工程...
年份
1篇
2009
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重组人心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的制备及鉴定
被引量:3
2009年
目的制备重组人心肌肌钙蛋白I(rhcTnI)的单克隆抗体,并对其单克隆抗体的特性进行鉴定。方法利用纯化后的rhcTnI作为免疫原,常规免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与同系骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,用甲基纤维素半固体培养基法获得单克隆抗体杂交瘤细胞株,利用ELISA、Western blot等方法对单克隆抗体的特性进行鉴定。结果筛选出3株稳定分泌抗rhcTnI的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为4B3、7D5和3E6。3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类分别为IgG1(4B3、7D5)和IgG2b(3E6)。3株单克隆抗体与rhcTnI发生特异性结合,而与大肠杆菌菌体蛋白、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)无特异性交叉反应,3株单克隆抗体的亲和力常数分别为1.76×109L/mol、1.43×109L/mol和1.04×109L/mol。结论获得了效价高、特异性好的抗rhcTnI的单克隆抗体,为cTnI诊断试剂盒的研制奠定了基础。
佟晓丽
张春明
王德芝
关键词:
人心肌肌钙蛋白I
单克隆抗体
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