陕西省科技攻关计划(2004K01-G7)
- 作品数：7 被引量：41H指数：3
- 相关作者：李建科周艳利夏凯伍小红吴丽华更多>>
- 相关机构：陕西师范大学更多>>
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- 相关领域：理学轻工技术与工程农业科学生物学更多>>
- 用于农药残留检测的大豆酯酶的纯化分离被引量：3
- 2007年
- 以大豆种子为原料探索农药残留检测用酯酶的新酶原。采用差素离心、硫酸铵盐析、DE-AE-32离子交换层析和SephadexG-100凝胶过滤层析等方法对大豆酯酶进行了纯化分离,并研究了纯化酶对有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性。最终得到3种电泳纯的大豆酯酶,记为E1,E2和E3。但3种大豆酯酶对有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性不同,E1对农药没有敏感性,E2的敏感性比E3好。因此,大豆酯酶E2可作为农药残留检测的新酶原。
- 周艳利李建科温艳霞
- 关键词：农药残留纯化
- 气相色谱法测定苹果中的多种农药残留量被引量：17
- 2006年
- 采用丙酮和正己烷提取,C18固相萃取小柱净化,气相色谱法用电子捕获检测器（GC-ECD）测定,建立了苹果中有机氯、拟除虫菊酯和有机磷3类15种农药的同时检测方法.该方法的回收率为78.3%～104.2%、相对标准偏差≤6.2%.
- 吴丽华李建科伍小红
- 关键词：气相色谱固相萃取苹果
- 酸土环脂芽孢杆菌的鼠源多克隆抗体制备及纯化被引量：2
- 2012年
- 以耐热菌标准菌株(Aliyclobacillus acidoterrestris)为抗原,通过背部肌肉注射免疫SD大鼠,取血制备免疫血清,再通过饱和硫酸铵沉淀法和ProtainG亲和层析纯化制备耐热菌鼠源多克隆抗体,经测定抗体效价达到1:12800。经SDS-PAGE鉴定抗体为IgG,纯化效果好,与食源性常见菌无交叉反应,证明特异性良好。本研究首次建立了耐热菌鼠源多克隆抗体的制备及纯化方法,为耐热菌的酶联免疫检测研究提供了基础。
- 夏凯李建科于振
- 关键词：SD大鼠多克隆抗体
- 快速检测农药残留用大豆酯酶的稳定性被引量：2
- 2008年
- 目的观察用于快速检测农药残留的大豆酯酶的稳定性,确定其最适保存条件。方法分别测定不同温度、不同酸碱度和不同保护剂对大豆酯酶酶活力的影响。结果在4℃保存30d,酶活力损失较少;在-20℃保存30d,完全失活;温度在50℃以下,pH在6.0～9.0保存10min,酶活力无明显变化;保护效果好的保护剂依次为牛血清白蛋白(BSA)、蔗糖和甘油。结论已确定大豆酯酶最适保存条件。
- 周艳利李建科
- 关键词：农药残留稳定性
- 农残检测用大豆酯酶同工酶的分离及特性研究被引量：1
- 2008年
- 从大豆中纯化分离得到三种大豆酯酶同工酶(Soybean Esterase isozyme,SEI)记为SEI1,SEI2和SEI3。利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定三种酯酶的亚基相对分子量,SEI1的亚基分子量为40.7 ku;SEI2含有两个亚基,分子量分别为37.2 ku和21.4 u;SEI3的亚基分子量为74.1 ku。催化底物α-乙酸奈酯的米氏常数Km分别为22.7,58.6和13.4μmol/L,最适温度分别为30,30和25℃,最适pH值分别为6.5,6.0和6.5。三种酯酶对农药的敏感性实验表明,SEI2对农药的敏感性最好,SEI3其次,SEI1无敏感性。故而选择SEI2作为农残检测用植物酯酶。
- 周艳利李建科
- 关键词：农药残留大豆酯酶同工酶
- 农药残留快速检测固定化酶片的研究被引量：13
- 2008年
- 采用硝酸纤维素膜(NC)和植物酯酶研究了农药残留快速检测固定化酶片。通过对酶用量、戊二醛浓度、牛血清白蛋白浓度、固定化pH值和温度的参数优化,建立了NC膜固定化植物酯酶的方法,即:20μl游离酶,0.05%戊二醛2μl,0.5%牛血清白蛋白15μl,pH7.0缓冲液体系,4℃下固定8h。对游离酶和固定化酶的特性进行了比较,发现固定化植物酯酶对底物的最适反应温度为35℃,比游离酶提高了5℃;最适pH为8.0,比游离酶提高了0.5个pH单位。游离酶和固定化酶对四种农药(敌敌畏、灭多威、氧乐果、久效磷)的敏感性进行了比较,发现固定化酶对四种农药敏感性都较游离酶有所提高,固定化酶更适合于农药的快速检测。
- 许娟李建科牛乐
- 关键词：植物酯酶固定化农残检测
- 苹果浓缩汁中耐热菌的间接ELISA快速检测方法被引量：4
- 2011年
- 【目的】研究果汁中耐热菌的免疫化学快速检测方法。【方法】以果汁中分离的耐热菌免疫家兔获得抗体,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)原理建立果汁中耐热菌快速检测方法。【结果】首次成功建立并优化了耐热菌间接ELISA快速检测方法,检测限为5×10 4CFU/mL。实际检测时,通过对果汁样品集菌及预增菌,应用本研究建立的耐热菌间接ELISA快速检测方法,可以在24 h内给出果汁中耐热菌是否超过1 CFU/10 mL的检测结果,满足国内外果汁标准中耐热菌不超过1 CFU/10 mL的要求,检测时间比目前国内外普遍采用的KFL(Krueger Food Laboratories)法缩短3-4 d,检测结果与KFL法完全相符。【结论】本研究建立的果汁中耐热菌间接ELISA快速检测方法快速、简便、准确,具有良好的特异性、敏感性和重复性。
- 李建科王峰夏凯
- 关键词：苹果浓缩汁耐热菌酶联免疫吸附法
