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Dicer蛋白分子的进化与结构研究进展被引量：1: 2011年; Dicer蛋白在RNA干扰(RNA interference,RNAi)途径中起着非常重要的作用,不同生物来源的Dicer蛋白在数量和结构上均存在着一定的差异。在植物界的生物进化过程中,Dicer蛋白的数量逐渐增多,功能逐步出现分化;而在动物界的生物进化过程中,Dicer蛋白的数量逐渐减少,功能却逐步整合。不同Dicer蛋白之间存在着一定的结构差异,但一般均含有RNA解旋酶(RNA helicase)结构域、PAZ结构域、RnaseⅢ结构域和双链RNA结合结构域等。从Dicer蛋白的种类及分子进化、结构功能域和作用模型等方面对Dicer蛋白分子的进化与结构的研究进展进行了综述。; 刘新建陶刚刘永翔刘作易; 关键词：RNA干扰分子进化结构功能域

抗马铃薯Y病毒的ihpRNA高效茎长度的选择: 2011年; 为获得干涉基因片段的最小有效干涉长度,利用Gateway技术,构建出4个具有不同马铃薯Y病毒（PVY）外壳蛋白基因片段的RNAi载体（Phe-Y246、Phe-Y199、Phe-Y143和Phe-Y103）,瞬时表达检测这4个干涉载体的干涉效果。结果表明：20株浸润有Phe-Y143载体的抗病毒植株比例达100%,Phe-Y246、Phe-Y199和Phe-Y103载体浸润植株的抗病毒比例分别为85%、90%和80%。表明,PVY外壳蛋白基因的高效抗性片段的茎长度为104~143 bp。; 刘新建陶刚刘永翔朱英邱礽李奇科刘作易; 关键词：RNA干涉马铃薯Y病毒外壳蛋白

马铃薯品种茎段愈伤组织诱导和植株再生的研究被引量：14: 2009年; 以2个马铃薯品种夏坡蒂和费乌瑞它茎段为外植体,研究了不同植物激素对马铃薯愈伤组织诱导及其不定芽分化的影响。结果表明,夏坡蒂和费乌瑞它的茎段最佳愈伤诱导组织培养基分别为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA30.5 mg/L和MS+ZT 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA30.5 mg/L,愈伤率均可达到100%;夏坡蒂和费乌瑞它的不定芽最佳诱导培养基分别为MS+ZT 2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+GA35 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+ZT 2.0 mg/L+GA35 mg/L,诱导率分别为52.38%和53.6%。结果为进一步转基因工作中高效植株的再生奠定了一定的基础。; 邱礽陶刚朱英黄永会程仪琳刘作易; 关键词：马铃薯费乌瑞它愈伤组织诱导植株再生

马铃薯Y病毒CP基因RNAi载体构建与干涉效果测定被引量：12: 2009年; RNA沉默(RNAi)介导的植物抗病毒研究是近年来引起广泛关注的一项植物抗病毒基因工程策略。马铃薯Y病毒(PVY)在世界范围内引起马铃薯、烟草等重要经济作物的病害,并且造成严重的经济损失。本文以PVY的外壳蛋白(CP)基因为模板扩增300bp和354bp两个片段,正向和反向分别插入植物表达载体pROKⅡ的35S启动子下游,从而构建了以PVY的CP基因为靶标的RNAi植物表达载体pROKY300,转入农杆菌EHA105中,以农杆菌渗入法在本氏烟中瞬时表达与PVYCP同源的hairpin RNA。结果表明,瞬时表达的hairpinRNA有效干涉了PVY侵染。; 李奇科陶刚邱又彬邱礽迟胜起朱英刘作易; 关键词：马铃薯Y病毒 CP基因 RNAI

农杆菌渗入法介导的基因瞬时表达技术及应用被引量：38: 2009年; 农杆菌渗入法是在植物中瞬时表达外源基因的一种方法,该方法通过在植物叶片上注射农杆菌,使目的基因转入植物细胞中进行快速表达。本文综述了农杆菌渗入法的原理、技术流程、影响因素及其应用,其应用主要涉及外源基因的表达、检测转基因的表达、启动子分析、转录后基因沉默、抑制子功能鉴定、细胞定位以及基因相互作用等方面。随着技术的进一步完善,我们相信该技术将成为转基因育种领域的重要的手段。; 邱礽陶刚李奇科邱又彬刘作易; 关键词：转基因

TC-RT-PCR技术在马铃薯病毒检测及其基因克隆上的应用被引量：8: 2009年; 利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)技术从马铃薯病毒发病叶片中检测并克隆到PVX、PVY和PLRV3种病毒及其外壳蛋白基因的全长序列,长度分别为714、804和627 bp。结果表明,TC-RT-PCR技术是一种简单,快捷,灵敏度高的方法,在马铃薯病毒的检测和相关基因的克隆中将会得到很好的应用。; 邱又彬陶刚黄永会李奇科刘作易朱英郑世玲; 关键词：马铃薯病毒外壳蛋白基因

瞬时表达比较2种不同的RNAi载体的干涉效果被引量：1: 2010年; RNAi with natural defence mechanism of homologous RNA degradation is widely used in research of antiviral plant.It is important to construct a highly efficent RNAi vector for transgenic plants of virus resis-tance.In this study,part fragments of coat protein gene of Potato virus Y(PVY)(451-750 bp) were inserted into the two expression vectors.Vector pROKY300 without intron and pHelY300 with PDK and CAT introns on the hpRNA stem were constructed.The silence efficiency of virus resistance of the two vectors was investigated as 88%(22/25)for pROKY300 and 92%(23/25) for pHelY300 through transient expression mediated by agroinfiltration.The results showed that both vectors were highly antiviral and elucidated the validity of RNAi-medicates resistance to virus.; 邱礽陶刚邱又彬李奇科朱英迟胜起刘作易; 关键词：RNAI载体马铃薯Y病毒植物表达载体抗病毒复合侵染

马铃薯X病毒外壳蛋白基因片段的瞬时表达诱导对PVX的高抗性(英文)被引量：1: 2011年; 为获得抗马铃薯X病毒(PVX)的植株,从疑似感染马铃薯X病毒的马铃薯叶片中提取出PVXcp cDNA,将其保守片段插入到RNAi质粒pHellsgate12中以构建编码发夹结构RNA的载体,通过Agroinfiltration的方法在本氏烟植株中瞬时表达。结果表明:病毒侵染10d后,15株引入该载体的本氏烟植株对PVX均具有抗性,此载体可用于产生对马铃薯X病毒具有高抗性的转基因植物。; 黄永会陶刚朱英Mariena Ketudat-Cairns邱礽刘永翔刘作易; 关键词：马铃薯X病毒外壳蛋白

贵州马铃薯Y病毒外壳蛋白基因的克隆与遗传分析被引量：5: 2009年; 本研究从中国贵州不同海拔地区采集感染马铃薯Y病毒(PVY)病害叶片,利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)方法克隆到长度为804bp的8个目的片段,序列分析表明为PVY外壳蛋白(PVY-CP)基因。通过与已经发表的PVY-CP基因序列进行比较和遗传分析,并根据PVY的CP基因全长和5'端序列构建系统发育树,结果表明,本研究分离的PVY,7株为O株系,1株为NTN株系。; 邱又彬陶刚李奇科刘作易郑世玲朱英; 关键词：马铃薯Y病毒外壳蛋白基因

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国家重点基础研究发展计划(2008CB117010)