国家教育部博士点基金(200806310005)
- 作品数:3 被引量:15H指数:3
- 相关作者:魏光辉刘星何昀袁心刚温晟更多>>
- 相关机构:重庆医科大学重庆市第五人民医院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 转录因子Twist的siRNA筛选、腺病毒构建及功能检测被引量:4
- 2010年
- 目的 筛选特异性沉默人的Twist基因的siRNA序列,构建siTwist腺病毒并在MG63及143B骨肉瘤细胞中进行功能鉴定.方法 体外退火获得4组siTwist双链DNA序列,克隆至含有Twist基因的pSOS-Twist质粒中获得pSOS-siTwist质粒,脂质体转染HEK293细胞,GFP检测筛选有功能的siTwist片段,将筛选出的siTwist序列构建腺病毒,感染143B骨肉瘤细胞.通过RT-PCR、Western 印迹检测Twist的表达.siTwist与Twist腺病毒共感染MG63骨肉瘤细胞,细胞计数及细胞侵袭实验检测siTwist对Twist的抑制作用.结果 在HEK293细胞中,4组siTwist中有2组GFP的表达明显降低,且siTwist腺病毒能抑制143B骨肉瘤细胞中内源性的Twist表达,Twist腺病毒能促进MG63骨肉瘤细胞的增殖和转移,而两组siTwist与Twist共感染组MG63细胞的增殖及迁徙率均明显低于Twist组(P〈0.05).结论 筛选出两对特异性沉默Twist基因的siRNA片段,并成功构建腺病毒,转染细胞后能有效抑制内源性和外源性的Twist表达,为研究Twist在骨肉瘤细胞增殖和转移中的作用及具体机制提供了有效的分子工具.
- 何昀毕杨刘星袁心刚魏光辉
- 关键词:TWIST基因腺病毒小干扰RNA
- 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯诱导大鼠尿道下裂及对阴茎TGF-β1、TGF-βR3表达的影响被引量:7
- 2011年
- 目的:探讨诱导建立大鼠先天性尿道下裂,研究邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)及胎鼠阴茎内转化生长因子(TGF-β1,TGF-βR3)在尿道下裂发生机制中的意义。方法:SD孕鼠随机分为DEHP组(每日500 mg/kg)和大豆油对照组,每组20只。分别于母鼠孕12 d至19 d(GDl2~19)持续经口灌注给药。每组分别留取10只孕鼠让其正常分娩,出生第1日计数新生大鼠,并在解剖显微镜下测量雄性新生鼠的肛门生殖器距离(AGD)和称体质量;雄性仔鼠70日龄时逐个检查尿道下裂的发生情况。另10只孕鼠于孕第19日行剖宫产取仔鼠,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测胎鼠阴茎TGF-β1、TGF-βR3 mRNA的表达水平。结果:DEHP成功诱导出尿道下裂大鼠动物模型,DEHP组仔鼠体质量及AGD较对照组明显缩小(P<0.05)。DEHP组胎鼠阴茎TGF-β1、TGF-βR3 mRNA表达水平增加(P<0.05)。结论:DEHP成功诱导建立先天性尿道下裂大鼠模型,胎鼠阴茎内TGF-β1、TGF-βR3异常表达可能是尿道下裂的发生机制之一。
- 陈柏林刘星吴盛德袁心刚何昀徐明灯刘东尧温晟魏光辉
- 关键词:尿道下裂TGF-Β1
- 综合ICU患者多药耐药菌感染分析被引量:4
- 2014年
- 目的对综合ICU患者多药耐药菌(MDR)感染情况进行分析,为MDR的预防和控制提供数据支持。方法取自2009年9月-2012年3月在医院综合ICU住院的298例患者送检标本1 965份进行分析,找出培养阳性的病原菌,筛选出MDR,并分析MDR的类型、感染部位分布等,所有数据采用SPSS 19.0进行分析。结果 1 965份标本共分离出病原菌746株,其中MDR 584株占78.3%,排前3位的MDR为鲍氏不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌,分别占32.0%、30.5%、12.8%;MDR感染部位分布以呼吸道、血液、泌尿道最多分别占48.5%、9.6%、3.9%;属于MDR医院感染的有306株,占52.4%。结论 MDR感染多由于医院感染而引起,因此应加强医院感染的管理,制定切实可行的管理制度,降低MDR感染的发生。
- 袁智慧何勤陈毅袁静
- 关键词:综合重症监护病房多药耐药菌医院感染