国家自然科学基金(30760055)
- 作品数：14 被引量：23H指数：3
- 相关作者：谢小薰罗彬肖绍文范蓉林永达更多>>
- 相关机构：广西医科大学广西医科大学第一附属医院广西中医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 癌-睾丸抗原OY-TES-1多克隆抗体的制备及鉴定被引量：9
- 2009年
- 目的制备癌-睾丸抗原OY-TES-1多克隆抗体,并进行鉴定。方法以大肠杆菌表达的MBP/OY-TES-1融合蛋白作为抗原,免疫新西兰白兔,制备抗血清。经蛋白A凝胶纯化后,采用ELISA法检测抗血清的效价,Western blot和免疫组化法检测多克隆抗体的特异性。结果制备的抗血清经ELISA检测,效价不低于1∶128000,纯化后,其效价不低于1∶8000。Western blot显示,抗OY-TES-1多抗可与MBP/OY-TES-1融合蛋白、MBP、OY-TES-1重组蛋白和睾丸组织总蛋白特异性结合;免疫组化检测显示,精子头部呈现阳性反应。结论已成功制备了效价高、特异性强的癌-睾丸抗原OY-TES-1多克隆抗体,为深入研究OY-TES-1的生物学功能提供了工具。
- 范蓉肖绍文黄巍罗彬李颀徐丽湘谢小薰
- 关键词：癌-睾丸抗原融合蛋白多克隆抗体
- OY—TES-1在肿瘤组织中的表达及生物信息学分析被引量：4
- 2009年
- 目的：了解OY-TES-1mRNA及其蛋白在肿瘤组织中的表达情况，初步探讨其结构与功能。方法：利用定量PCR和免疫组织化学技术检测肿瘤组织中OY—TES-1的表达，结合生物信息学技术分析其结构和功能。结果：肿瘤与瘤旁组织中目的基因mRNA的表达频率分别为61．95％和59．57％，其中肝细胞癌72．97％、脑膜瘤55．5s％、胶质瘤57．50％，肿瘤组织中该基因mRNA的表达量明显高于瘤旁组织。目的蛋白在胃癌的阳性率为25．00％，肝细胞癌40．00％，结肠癌46．67％，而瘤旁组织与肺癌均为阴性反应。生物信息学分析提示目的蛋白富含螺旋结构，具有一个信号肽、多种修饰位点及sp32结构域，存在较多T、B细胞表位且主要位于目的蛋白的羧基端。结论：OY-TES-1mRNA及其蛋白均可在肿瘤组织中表达，生物信息学分析结果提示该蛋白功能的多样性。
- 范蓉黄巍肖绍文罗彬李颀何少健罗国容谢小薰
- 关键词：基因表达肿瘤生物信息学分析
- 顶体素结合蛋白真核表达载体的构建及其在肝癌细胞株的表达被引量：1
- 2011年
- 目的:构建ACRBP真核表达载体,建立稳定表达ACRBP的人肝癌细胞株,为后继研究该基因的功能奠定基础。方法:以pMAL-C2/ACRBP重组质粒作为模板进行PCR,扩增出ACRBP编码区cDNA,并与真核表达载体pEGFP-N1连接,构建pEGFP-N1/ACRBP重组质粒。通过Fugene HD将该重组质粒转染至ACRBP表达阴性的肝癌细胞株HepG2,经G418筛选阳性克隆获得稳定转染株。RT-PCR和免疫组织化学方法检测HepG2细胞中ACRBP的表达情况。结果:pEG-FP-N1/ACRBP真核表达载体经测序证实插入序列完全正确;ACRBP基因已经稳定转染至HepG2细胞中并获得表达。结论:成功构建了pEGFP-N1/ACRBP真核表达载体并将其转染HepG2后,能稳定地表达ACRBP。
- 罗彬云翔林永达肖绍文闫光华何少健贺菽嘉陈芳谢小薰
- 关键词：基因克隆转染
- 癌-睾丸抗原GAGE与肿瘤被引量：1
- 2009年
- 赵飞兰李立志罗国容谢小薰
- 关键词：肿瘤免疫治疗
- 癌-睾丸抗原NY-ESO-1的表位鉴定及其抗原肽疫苗研究被引量：1
- 2009年
- 罗彬林永达肖绍文谢小薰
- 关键词：癌-睾丸抗原NY-ESO-1肿瘤免疫治疗肿瘤组织
- 卵巢癌细胞中OY-TES-1基因启动子CpG位点甲基化状态分析
- 2011年
- 目的：了解卵巢癌SKOV3细胞中OY-TES-1启动子区域CpG位点的甲基化状态。方法：运用免疫细胞化学法检测SKOV3细胞中OY-TES-1蛋白表达；通过硫化测序PCR法，分析SKOV3细胞中OY-TES-1启动子区域CpG位点的甲基化状态，并与睾丸组织相比较。结果：免疫细胞化学法检测结果显示，SKOV3细胞中OY-TES-1蛋白呈阳性反应；在检测的OY-TES-1启动子区域（转录起始点-127bp-＋110bp，含24个CpG位点）中，CpG位点的甲基化频率为80．21％，其甲基化状态明显高于睾丸组织。结论：SKOV3细胞中OY-TES-1启动子CpG位点处于高甲基化状态，进一步可探讨甲基化抑制剂氮杂脱氧胞嘧啶对OY-TES-1甲基化状态及其表达水平的影响。
- 范蓉黄巍郭文文王炜炜罗彬宋慧肖绍文谢小薰
- 关键词：癌-睾丸抗原卵巢癌CPG甲基化OY-TES-1
- OY-TES-1诱导的树突状细胞对T淋巴细胞的增殖活化作用
- 2011年
- 目的通过癌-睾丸抗原OY-TES-1致敏树突状细胞(DC),研究其对T淋巴细胞的增殖活化作用。方法体外诱导培养人外周血DC,观察其细胞形态并经流式细胞仪进行表型鉴定;分别用OY-TES-1融合蛋白(OY-MBP)、麦芽糖结合蛋白(MBP)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)致敏DC,与T淋巴细胞共同培养。CCK-8法检测不同蛋白致敏DC后T淋巴细胞的增殖,ELISA检测致敏DC与T淋巴细胞共同培养后上清液IFN-γ的含量。结果诱导出高表达HLA-DR、CD86、CD83和CD80并具有典型细胞特征的DC。经不同蛋白致敏的DC均能促进T淋巴细胞的增殖活化,其中OY-MBP致敏的DC促进T淋巴细胞增殖的能力明显强于其他各组(P<0.05),IFN-γ分泌量也明显高于其他各组(P<0.05)。结论 DC在体外经OY-TES-1融合蛋白致敏后,可显著促进T淋巴细胞的增殖活化。
- 李静郭文文罗彬陈芳王炜炜肖绍文谢小薰
- 关键词：树突状细胞OY-TES-1T淋巴细胞
- 睾丸组织中ACRBP的表达及启动子CpG位点的甲基化分析
- 2011年
- 目的了解人睾丸组织中ACRBP的表达及其启动子CpG位点的甲基化状态,为探讨该基因表达机制奠定基础。方法运用免疫组化法研究睾丸组织中目的蛋白定位;结合生物信息学分析该基因启动子CpG位点序列;通过Bisulfite PCR测序法(BSP)分析目的基因CpG位点的甲基化状态。结果免疫组化显示精子与精子细胞及部分的精原细胞和精母细胞表达目的蛋白。对ACRBP启动子序列(转录起始点-127～+110 bp)进行BSP扩增测序,发现该区域共有24个CpG位点,其中仅有3个出现甲基化,其甲基化频率为1.67%。结论生精小管中ACRBP蛋白呈区域性的阳性反应,可能与生精小管内精子发生的不同步性有关;ACRBP启动子CpG位点低甲基化可能与该基因表达的机制有关。
- 黄巍范蓉李希圣郭文文罗彬宋慧肖绍文谢小薰
- 关键词：睾丸甲基化
- 胎盘特异性基因PLAC1与肿瘤被引量：1
- 2010年
- 胎盘特异性基因PLAC1(placenta-specific 1 gene)具有癌-睾丸(cancer-testis antigen,CT)抗原的特点,即能在多种肿瘤组织中表达,而在正常组织(除胎盘和睾丸)几乎不表达。PLAC1编码一种膜蛋白,该蛋白质具有一定的免疫原性,能在肿瘤患者体内引起体液免疫和细胞免疫。目前的研究结果显示PLAC1代表一类新的肿瘤相关抗原,可能成为肿瘤免疫治疗的一个靶点。
- 闫光华罗彬肖绍文谢小薰
- 关键词：肿瘤免疫治疗
- 精子蛋白32/OY-TES-1在视网膜母细胞瘤中的表达
- 2011年
- 目的 观察精子蛋白（SP）32/OY-TES-1在视网膜母细胞瘤（RB）组织中的表达.方法 病理科收检并经病理学检查确诊的30例RB患儿的石蜡标本纳入研究.采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测15例RB组织、12例非肿瘤病变视网膜组织及22例眼部正常组织中SP32/OY-TES-1mRNA的表达;免疫组织化学技术对30例RB组织和24例正常视网膜组织中SP32/OY-TES-1蛋白的表达进行检测,对比分析SP32/OY-TES-1 mRNA和蛋白表达与RB患儿年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分化程度和临床分期的相互关系.结果 RB组织、非肿瘤病变视网膜组织、眼部正常组织SP32/OY-TES-1mRNA的表达率分别为86.7%、16.7%和36.4%.不同性别（χ^2=0.744）、年龄≤2岁和＞2岁（χ^2=1.178）、临床分期（χ^2=1.188）、肿瘤大小（χ^2=0.216）、肿瘤分型（χ^2=1.885）之间SP32/OY-TES-1基因阳性表达率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.SP32/OY-TES-1蛋白在RB中的表达率为73.3%,在正常视网膜组织中则不表达.不同性别（χ^2=1.000）、年龄≤2岁和＞2岁（χ2=0.403）、不同肿瘤大小（χ^2=2.274）、不同肿瘤分型（χ^2=0.138）之间SP32/OY-TES-1蛋白阳性表达率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;不同临床分期（χ^2=6.193）、视神经是否浸润（χ^2=4.535）之间SP32/OY-TES-1蛋白阳性表达率比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 SP32/OY-TES-1高表达于RB组织中;SP32/OY-TES-1蛋白在RB组织中的表达率与视神经浸润和临床分期存在密切的关系.
- 孔旻王玲王树先谢小薰梁皓
- 关键词：基因表达
