国家自然科学基金(30760063)
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 相关作者：黄瑾罗星郭政席少松李宽新更多>>
- 相关机构：石河子大学新疆医科大学附属肿瘤医院中国人民解放军69233部队更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Notch信号通路与Neuralized蛋白被引量：1
- 2008年
- Notch信号通路在脊椎动物和无脊椎动物许多组织的发育过程和细胞间通讯中都发挥了关键的作用,包括调控细胞命运,调节细胞迁移,分化和增殖.Notch信号通路由Notch受体及其跨膜配体如Delta(Dl)和Serrate组成.Neuralized蛋白(Neur)编码1个E3泛素连接酶,是Notch配体D1内吞所必需的.Neur蛋白包括3个从线虫到人高度保守的结构域:2个Neur同源重复结构域(NHR1和NHR2)和1个C端RING结构域.本文就Notch信号通路主要元件和Neru的结构与功能及其关系进行综述.
- 郭政黄瑾
- 关键词：NOTCH信号通路DELTA
- siRNA表达载体对293T细胞neuritin表达的抑制作用
- 2012年
- 目的观察siRNA表达载体对293T细胞神经生长因子neuritin的抑制作用,为进一步研究neuritin基因的功能及作用机制奠定基础。方法通过RT-PCR技术筛选neuritin高表达细胞株;利用分子克隆技术,采用两步法构建PBS/U6-neuritin siRNA(1～3)表达载体,脂质体法转染293T细胞,稳定转染后采用Western-blot技术进行干扰效率的筛选鉴定。结果 293T细胞与L-02细胞的RT-PCR产物为500bp左右可见特异性条带,选择293T细胞作为实验细胞株,测序结果显示经2次构建后PBS/U6-neuritin siRNA表达载体在338bp处出现发夹结构,说明构建成功。转染72h后Western-blot技术检测PBS/U6-neuritin siRNA-(1～3)在不同程度上均可使293T细胞内源性Neuritin蛋白表达下调。结论 PBS/U6-neuritin siRNA(1～3)表达可以有效抑制293T细胞系Neuritin蛋白的表达。
- 张峤罗星黄瑾
- 关键词：RNA干扰基因表达
- MSCs移植在大鼠SCI中的实验研究现状及展望
- 2009年
- 张红刘维钢黄瑾李宽新席少松
- 关键词：细胞移植技术SCIMSCS脊髓损伤中枢神经系统
- Neuritin真核表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2011年
- Neuritin(CPG15)是一种神经营养因子,能促进神经突起生长,为了探讨Neuritin可能的作用机制,本研究构建了人类neuritin基因的真核表达载体。采用PCR技术扩增编码人neuritin基因cDNA全长序列,并纯化回收,酶切、连接入真核表达载体pcDNA3.1(-)A中,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆pcDNA3.1(-)A-neuritin扩增后,提取质粒,进行双酶切鉴定以及DNA测序鉴定。结果显示,构建的重组质粒pcDNA3.1(-)A-neuritin含有450bp neuritin片段,且重组质粒所含的neuritin读框片段与GenBank NM 016588.2序列同源性100%。由此可知:成功构建了pcDNA3.1(-)A-neuritin真核表达载体,为进一步研究该基因的功能及作用机制奠定良好的实验基础。
- 钟晨罗星于娜黄瑾
- 关键词：真核表达载体
- 泛素连接酶对Notch信号途径的调节作用
- 2011年
- Notch信号途径是生物进化过程中高保守的信号通路,对细胞的定向发育及成熟起到决定性的作用。Notch信号途径受到多种分子机制的严格调控。近年来,多项研究均突出了泛素化在调控Notch信号途径活性中的重要性。本文就四种E3泛素连接酶Su(dx)/Itch、Sel-10、LNX以及Neuralized对于调控Notch受体及Notch信号途径配体的研究现况作一综述。
- 钟晨黄瑾
- 关键词：NOTCH信号途径
- 大鼠脊髓完全性损伤模型的建立被引量：3
- 2009年
- 背景:建立有效的完全性脊髓损伤动物模型是深入研究脊髓损伤的前提,只有建立标准的、可重复性高的实验动物模型才能择优选出治疗脊髓损伤的可行方案。目的:实验拟建立一种稳定的大鼠完全性脊髓损伤动物模型。设计、时间及地点:对照观察动物实验,于2007-11/2008-10在石河子大学药学院动物试验中心完成。材料:30只健康Wistar大鼠随机分成假手术组6只、实验组24只。方法:显露实验组大鼠T8～T12棘突及椎板,切除T9～10棘突及椎板,暴露相应脊髓段作为损伤区,采用大鼠脑定位仪自主设计改良Allen模型打击装置,予15g×20cm=2.94×10-2N重力打击大鼠T10节段脊髓,动物模型保证硬脊膜完整。假手术组仅同法暴露相应脊髓段,但不做打击。主要观察指标:造模后2,4,8周以斜板试验及BBB评分观察大鼠双后肢运动功能,以苏木精-伊红染色观察大鼠脊髓组织的变化。结果:假手术组大鼠苏醒后能站立行走,斜板试验角度均大于70°,BBB评分21分,脊髓结构正常。实验组大鼠造模后双下肢全瘫,2只大鼠表现为痉挛性瘫痪,5只大鼠表现出不同程度的自残现象。造模后2,4,8周斜板试验角度均小于30°,BBB评分均少于10分,随时间延长,部分大鼠可见后肢刺激性反射,但无主动性功能活动,局部脊髓结构破坏严重。结论:以2.94×10-2N重力打击大鼠脊髓可保证硬脊膜的完整,并获得稳定的完全性脊髓损伤动物模型。
- 张红刘维钢黄瑾李宽新席少松张富军李东正
- 关键词：急性完全性脊髓损伤动物模型
- DLL1-ICD基因真核表达载体的构建及转染鉴定被引量：3
- 2011年
- 通过克隆DLL1-ICD(Delta-like1细胞内区域)的cDNA及测序鉴定,构建pEGFP-C1-DLL-ICD真核表达载体并进行细胞转染,为研究Notch信号通路与Neuritin的关系奠定基础。首先根据小鼠全长DLL1 cDNA序列,设计DLL-ICD PCR引物,以小鼠胎脑cDNA文库为模板,利用PCR技术扩增DLL1-ICD cDNA。将扩增出的基因片段克隆至pEGFP-C1载体,进行DNA序列测定。并进一步将测序正确的pEGFP-C1-DLL1-ICD真核表达载体转染HEK293细胞。结果显示:成功克隆了DLL1-ICD的cDNA片段,测序结果与基因文库中的DLL1-ICD序列一致,并在转染真核细胞后获得了较好地表达。表明pEGFP-C1-DLL1-ICD真核表达载体构建成功,并在293细胞中成功表达了DLL1-ICD-EGFP融合蛋白。研究结果为进一步探讨Notch信号通路与神经系统疾病的分子机制奠定基础。
- 郭政崔丽娟黄瑾
- 关键词：真核表达载体
- Notch信号途径与肿瘤血管发生
- 2010年
- Notch信号途径广泛存在于无脊椎和哺乳动物体内,与肿瘤血管的萌发,尖端细胞的选择、血管分支的出现、脉管系统的成熟、以及血管损伤后修复等多个阶段均存在密切的关系。在血管发生过程中Notch信号途径主要受到VEGFs的调节,通过发挥抑制作用减少尖端细胞的数量和脉管分支的出现。对Notch信号途径的研究有可能成为未来肿瘤血管抑制治疗的新靶点。本文就Notch信号途径及与肿瘤血管发生之间的关系做一综述。
- 张峤张健罗星黄瑾
- 关键词：NOTCH信号途径肿瘤血管发生
