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国家重点基础研究发展计划(2003CB114204): 作品数：36 被引量：241H指数：10; 相关作者：邱德文杨秀芬曾洪梅刘峥袁京京更多>>; 相关机构：中国农业科学院植物保护研究所中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所湖南农业大学更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

细极链格孢菌蛋白激发子对棉主要性状及相关酶的影响被引量：5: 2007年; 为了给细极链格孢菌蛋白激发子的田间使用提供依据,测定了其粗提蛋白液对棉主要性状及相关酶活性变化影响的相关数据。结果表明:细极链格孢菌蛋白激发子诱导后显著提高了棉成铃数,且不同程度提高了株高、单铃重、衣指、子指和衣分,降低了单铃壳重,特别是促进了棉花早熟,获得了较高的产量。以浸种处理的籽/皮棉产量最高,分别达到3 800.60和1 598.15 kg/hm2,比对照提高了22.15%和26.11%;纤维的主要品质性状指标与对照间差异均达到了极显著水平,浸种+现蕾期喷雾处理的综合值比对照提高6.1%,为最高;诱导后POD(过氧化物酶)、SOD(超氧化物歧化酶)及NR(硝酸还原酶)的酶比活性增强,其中POD酶比活性均值最高为(502.00±1.10)μmol/(g.min),SOD为(378.36±0.43)μmol/(mg.min),NR为(168.96±2.30)μg/(g.h);而MDA(丙二醛)含量降低,最低为(2.814±0.090 9)μmol/g。; 张志刚邱德文曾洪梅杨秀芬官春云梅正鼎杨晓萍; 关键词：链格孢菌蛋白激发子 POD NR

Gateway~技术构建交链孢菌JH505 cDNA文库被引量：18: 2005年; Gateway○R技术构建cDNA文库,利用λ噬菌体的位点特异性重组,避免使用限制性内酶切割cDNA,能够解决常规方法构建cDNA文库的技术缺陷。首次应用Gateway○R技术构建交链孢菌cDNA文库,经检测cDNA入门文库的滴度达到1×107cfumL,文库总容量为9×107cfu,平均插入片段为1510bp。通过LR重组把入门文库转换为表达文库,表达文库的滴度为1.58×106cfu/mL,文库总容量为6.32×106cfu,平均插入片段大小为1680bp。表达文库的构建为进一步克隆植物激活蛋白基因打下了基础。; 龙松华张宁邱德文黎定军黄炜; 关键词：GATEWAY技术交链孢菌激活蛋白 CDNA表达文库

Expression of a Magnaporthe grisea Elicitor and Its Biological Function in Activating Resistance in Rice被引量：2: 2007年; The expression of a protein elicitor from Magnaporthe griesea and its biological function in activating resistance in rice （Oryza safiva L） were reported. The gene of elicitor was expressed in Escherichia colicells and produced a His6-fusion protein with 42 kD apparent molecular weight on SDS-PAGE. The purified protein could induce the resistance to blast disease, with the control efficiency of 46.47% and 36.41% at the 14^th day and the 21^st day after blast inoculation, respectively. After treatment with the expressed protein, the phenylalanine ammonia-lyase （PAL） and peroxidase （POD） activities were promoted in rice plants, meanwhile, the transcription levels of STKM, FAD, PBZ1 and PR1 genes were increased in rice plants. Moreover, after comparing the profile of total rice leaf proteins on two-dimensional electrophoresis gel, about 14 proteins were found to be increased in expression level after the expressed protein treatment. All the results indicated that the expressed protein could act as an elicitor to trigger the resistance in rice.; YAO QingYANG Xiu-fenLIANG YingXu FengLIu ZhengYUAN Jing-jingQIU De-wen; 关键词：ELICITOR RICE

极细链格孢蛋白激发子诱导棉花抗病性及相关酶的变化被引量：12: 2007年; 张志刚邱德文杨秀芬曾洪梅袁京京官春云; 关键词：蛋白激发子棉花黄萎病生化机制

一种促进植物根系生长的极细链格孢菌蛋白质分离、纯化和生物功能被引量：31: 2007年; 通过硫酸铵沉淀、有机溶剂沉淀、离子交换和分子筛连用的方法,从极细链格孢菌JH505菌株中分离纯化到分子量约为35kD的植物激发子。利用固相梯度凝胶双向电泳方法测定了该蛋白的等电点为4.22。将该纯化蛋白稀释液浸泡小麦种子8h,7d后小麦根系琥珀酸脱氢酶活性提高65.27%,经蛋白处理的小麦根长比对照提高13.1%。; 赵明治杨秀芬张明袁京京邱德文; 关键词：蛋白纯化激发子生物活性

应用表达谱基因芯片筛选植物激活蛋白处理水稻相关差异基因被引量：8: 2005年; 应用基因表达谱检测植物激活蛋白处理水稻相关差异基因的表达,建立相关基因表达谱。用Cy5和Cy3分别标记激活蛋白处理和对照cDNA,将两种荧光探针混合,与载有10368位点的水稻表达谱cDNA基因芯片进行杂交,并用芯片扫描系统进行扫描,通过Cy5与Cy3信号强度比值的计算研究基因的表达差异。共获得97个差异表达基因,其中上调基因4个,下调基因93个。应用基因表达谱芯片成功筛选了植物激活蛋白处理水稻差异表达的基因,为深入揭示该激活蛋白的作用机制研究提供依据。; 黄丽俊邱德文刘峥左斌杨秀芬王建华; 关键词：基因表达谱植物激活蛋白基因芯片

转hrfA_(Xoo)基因水稻对白叶枯病的抗性被引量：29: 2004年; 将来自水稻白叶枯病菌 (Xanthomonasoryzaepv .oryzae)编码harpinXoo的hrfAXoo基因连接到双元载体pBI12 1上 ,构建成含hrfAXoo基因的植物表达质粒pBMH9。以粳稻R10 9成熟胚诱导愈伤组织 ,由根癌农杆菌EHA10 5介导 ,将含有hrfAXoo基因的重组质粒pBMH9转化水稻愈伤组织。用G 4 18抗生素做抗性筛选 ,产生抗性愈伤组织的频率为 85 % ,转化植株的再生频率为 5 3%。根据hrfAXoo基因两端序列和pBMH9中外源片断的旁侧序列设计 2对引物 ,通过PCR扩增验证转化水稻中的靶基因序列。对部分转基因水稻进行RT PCR和Northernblot分析 ,结果显示hrfAXoo基因在转基因水稻中能正常表达。抗病性鉴定结果表明 ,转基因水稻在T0、T1和T2代对水稻白叶枯病有较好的抗性 ;在转基因系中水稻白叶枯病菌的生长明显受到抑制。因此 ,本研究获得对水稻白叶枯病抗性提高的转基因水稻。; 邵敏王金生; 关键词：水稻白叶枯病抗性

基于cDNA微阵列技术对激活蛋白处理水稻后信号传导及防卫反应相关基因的研究被引量：3: 2006年; 为探讨激活蛋白对植物抗病防虫作用的机理，应用水稻10368条非冗余序列标签（ESTs）所制备的cDNA微阵列及荧光信号Cy3、Cy5杂交体系，对激活蛋白处理水稻后信号传导及防卫反应相关基因进行了研究，并利用半定量RT-PCR方法验证了相关基因的表达。结果表明：激活蛋白处理水稻后1～5d内，诱导了NPR1和bZIP等信号传导相关基因的上调表达，同时对APX、GST、CHS及PR1α等防卫基因的表达也有促进作用。激活蛋白诱导水稻启动了水杨酸介导的系统获得抗性（systemic acquired resistance，SAR）反应。; 顾成波李学锋邱德文刘峥杨秀芬; 关键词：激活蛋白水稻 CDNA微阵列信号传导防卫反应

植物激活蛋白对黄瓜的促生诱抗相关酶的影响被引量：50: 2005年; 为探讨植物激活蛋白对植物的促生、诱抗作用 ,以 30mg·L-1的激活蛋白处理黄瓜种子、幼根和叶片 ,测定了激活蛋白对黄瓜幼根生长以及脱氢酶、过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶和脯氨酸含量的影响。结果表明 ,激活蛋白诱导处理黄瓜种子 2 4、36h后 ,幼根长度均明显高于对照 ,二者差异显著 ;处理幼根 1 2h后脱氢酶活性比对照提高 2 9 6 2 % ;处理子叶 1 5h后脯氨酸含量较对照提高 4 4 6 1 % ,4d后苯丙氨酸解氨酶较对照提高 1 5 36 % ;处理叶片 1～ 6h过氧化物酶活性均高于对照 ,1 5h后比对照增加了 2 4 8 73%。; 邱德文肖友伦姚庆李丽刘峥; 关键词：激活蛋白黄瓜脱氢酶苯丙氨酸解氨酶

细极链格孢菌蛋白激发子诱导棉苗基因表达差减文库的构建及EST分析被引量：12: 2007年; 利用细极链格孢菌蛋白激发子粗提蛋白液诱导棉花苗期相关基因表达，以清水喷施为对照样本，进行抑制差减杂交，构建棉花苗期基因表达文库。结果显示，插入片段的大小主要集中在200～1000bp。随机选取150个克隆进行菌液PCR检测与测序，并将所测序列与Gen-Bank dbEST库进行比对，共得到104个单一序列。其中，78个EST与其它物种已知基因部分区域的同源性为48．54％～100％，占总EST的75％；6条EST序列能在数据库中检索到同源性序列，但其功能尚不清楚，占5．77％；10个EST能在数据库中发现为推测蛋白，占9．6％；10个EST在GenBank中没有查到对应的同源序列，可能是新基因，占9．6％。同时，将所得到的104条EST序列在WEGO网站上进行功能分类，通过Gene ontology确定具体EST的分子功能。其中，在生物途径分类中，与生理途径和细胞过程相关的EST最多，分别为48个和45个；在细胞组份功能分类中，与细胞相关的EST最多，达到44个；在分子功能分类中，催化功能与分子绑定相关的EST数量最多，分别达到了30个和28个。由此可见，细极链格孢菌蛋白激发子诱导棉苗时涉及到植物的生理生化的多条途径，受到多个基因的调控，可能包括抗病与防御蛋白、信号传导蛋白、转录因子、能量代谢相关蛋白、抗逆相关蛋白、细胞保护机制蛋白、功能未知及其它蛋白等相关蛋白。; 张志刚邱德文杨秀芬曾洪梅袁京京刘峥杨晓萍官春云; 关键词：EST

国家重点基础研究发展计划(2003CB114204)

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