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PRRSV缺失变异毒株JL/07/SW株的分离鉴定及序列分析被引量：17: 2009年; 分离并鉴定了1株猪繁殖与呼吸综合征病毒,经病毒生物学特性测定、血清学试验、病毒基因鉴定,确定为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒,将其命名为JL/07/SW株。根据猪繁殖与呼吸综合征病毒VR-2332株及变异毒株的核苷酸序列,设计合成了针对NSP2变异序列、N基因以及GP5基因的引物,扩增出正确的序列,经测定的序列比对后,发现该毒株为美洲型变异毒株,NSP2上缺失了30个氨基酸,而GP5和M基因相对保守。; 李志杰丁壮孟轲音宣华王贵平高恩鹏丛彦龙母连志; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒

猪繁殖与呼吸综合征病毒TP株P4、P60、P90基因组遗传变异分析及动物致病力试验: 2010年; 本研究旨在对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TP株P4、P60、P90三个代次毒株进行全基因组序列测定,分析其遗传变异特性。通过分段RT-PCR、5′RACE和3′RACE法扩增病毒基因组,并运用生物信息学软件和动物致病力试验进行相关分析。结果表明:TP株P4、P60、P90株基因组全长分别为15346、15394和15393bp。3个代次病毒的基因组序列中ORF1a基因和3′-UTR区域变异较大,尤以Poly(A)尾序列碱基数差异显著,分别为26、74和73bp。3代次毒株基因组序列比对发现TPP90与TPP4差异较大,共有58个核苷酸位点和27个氨基酸位点发生突变,P90GP5蛋白抗原指数和表面亲和力与TPP4和TPP60相比呈增加趋势,动物致病力试验表明TPP4毒株致病力较TPP60和TPP90强。结果提示:TPP4、P60、P903代次毒株基因组序列存在着一定的差异,主要集中在4～60代致弱阶段,遗传进化关系上该病毒分属于PRRSV美洲株分支,并与高致病性PRRSV JXA1株亲缘关系最为接近,相似性高达99.5%、99.2%和99.3%。; 招丽婵苏润环邓雨修王东东杨明柳李春梅罗小飞宋延华; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传变异分析

高致病性猪蓝耳病病毒差异膜蛋白筛选及功能分析: 本研究拟采用2-DE电泳及MALDITOF-MS/MS技术比较分析PRRSV JL/07/SW株体外感染Marc-145细胞、感染体内肺泡巨噬细胞（PAMs）膜蛋白差异表达模式,揭示PRRSV感染引起的细胞膜蛋白表达变化...; 李志杰丁壮母连志丛彦龙; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 2-DE 差异蛋白; 文献传递

PRRSV JL/07/SW毒株GP5基因克隆与真核表达被引量：1: 2010年; 根据PRRSV VR-2332毒株核苷酸序列,设计针对GP5基因的特异引物,以PRRSVJL/07/SW毒株细胞培养物为模板,利用RT-PCR方法,成功的扩增出GP5基因,将该基因与真核表达载体pCI-neo连接,转染Marc-145细胞中,用间接免疫荧光试验、SDS-PAGE和western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果:RT-PCR分别扩增出GP5基因大小与预期一致,与国际PRRSV美洲型VR-2332毒株的GP5基因序列同源率为89.2%;间接免疫荧光、SDS-PAGE及Western blot试验证明GP5蛋白在Marc-145细胞中成功表达;同时利用pCI-neo真核表达载体在Marc-145细胞中成功表达了PRRSVJL/07/SW毒株GP5基因,为下一步研究蛋白的功能奠定了基础。; 白晶剡根强丁壮陈创夫李志杰丛彦龙母连志; 关键词：PRRSV GP5基因真核表达

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广东省农业攻关项目(2008A020100020)