镇江市科技支撑计划(社会发展)项目
- 作品数:1,127 被引量:5,308H指数:22
- 相关作者:严金川范钰钱军林江王中群更多>>
- 相关机构:江苏大学附属医院江苏大学江苏大学附属人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省社会发展科技计划更多>>
- 相关领域:医药卫生环境科学与工程理学自动化与计算机技术更多>>
- 鲍曼不动杆菌OmpA经ROS/NLRP3信号通路调控THP-1细胞自噬和凋亡被引量:5
- 2020年
- 目的:探讨鲍曼不动杆菌外膜蛋白A(outer membrance protein A,OmpA)对人单核巨噬THP-1细胞自噬和凋亡的影响及其可能机制。方法:构建OmpA/pET-28a载体,转化大肠埃希菌BL21(DE3)表达纯化重组OmpA蛋白,并免疫家兔制备多克隆抗体;采用蛋白质印迹法检测呼吸机相关性肺炎患者发病前后血清中OmpA抗体水平变化。以不同浓度(1、10μg/mL)重组OmpA蛋白分别刺激THP-1细胞1、3、6 h,采用蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白LC-3和Beclin-1表达,流式细胞术检测细胞凋亡率及活性氧产生,荧光实时定量PCR检测细胞含NLR家族Pyrin域NOD样受体家族3(NLRP3)、Caspase-1和IL-1β等mRNA表达。结果:自制多抗可以识别临床菌株OmpA蛋白。呼吸机相关性肺炎患者发病前后,血清中均可检出OmpA抗体(IgG型),且发病后OmpA抗体水平显著高于气管插管前(P<0.05)。重组OmpA蛋白刺激THP-1细胞后,细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1表达显著上升,细胞凋亡率显著升高,呈一定的时间和浓度依赖性(P<0.05)。与对照组比,在重组OmpA蛋白作用1 h时,细胞IL-1βmRNA表达和活性氧含量显著增加(P<0.05);3 h和6 h时,3种mRNA表达量和活性氧含量显著降低(P<0.05)。结论:OmpA通过激活THP-1细胞NLRP3炎症小体,释放活性氧和IL-1β等炎症介质,诱导THP-1细胞自噬和凋亡发生。
- 戴晓玥吴亮夏雯阴晴邹治情周亚玲何蕾丁龙坤席月张有江许化溪
- 关键词:鲍曼不动杆菌OMPA自噬NLRP3
- 澳洲茄边碱对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响被引量:3
- 2015年
- 目的探讨澳洲茄边碱(SM)对HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制。方法用不同浓度SM 5、10、15和20μg/ml分别处理HepG2细胞3、6、12和24h,并设不加药的对照组。采用MTT法检测HepG2细胞增殖,DAPI染色法观察细胞核形态的变化,流式细胞术检测细胞凋亡和周期,Western blot法检测B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)及Ki67的蛋白表达。结果与对照组相比,SM呈剂量依赖性地抑制HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡,将细胞周期阻滞于G2/M期,并且上调Bax和Caspase-3蛋白表达,下调Bcl-2和Ki67蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论 SM能有效抑制HepG2细胞的增殖,促进细胞凋亡的发生;SM上调Bax和Caspase-3表达,下调Bcl-2和Ki67表达,细胞周期阻滞于G2/M期可能是其发挥上述作用的机制。
- 谢晓东吴荧荧黄文斯刘庆王颖朱海涛张礼荣王冬青
- 关键词:HEPG2细胞
- 阿尔茨海默病患者血清miR-145表达水平及诊断价值研究
- 2022年
- 目的探讨血清miR-145在阿尔茨海默病患者中的表达水平及临床诊断价值。方法收集2020年6~12月就诊于江苏大学附属医院神经内科门诊的36例初诊AD患者为AD组,另选取18例健康体检者为对照组。AD组在治疗前及盐酸多奈哌齐治疗6个月后、对照组在入组时采用荧光定量PCR检测miR-145表达水平,ELISA试剂盒检测IGF-1R的表达,采用MMSE、MoCA量表评价AD患者的认知功能,分析血清miR-145与MMSE、MoCA量表评分及IGF-1R表达水平的相关性。ROC曲线评价miR-145对AD的诊断效能。结果AD组在治疗前血清miR-145表达水平高于对照组,治疗后血清miR-145低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.01);血清miR-145表达水平与MMSE和MoCA量表评分、IGF-1R表达水平呈负相关(r分别为-0.707、-0.687、-0.608,P<0.01);ROC曲线结果显示,血清miR-145曲线下面积为0.773(95%CI:0.619~0.927,P<0.05),敏感度为88.9%,特异性为66.7%。结论AD患者血清miR-145表达上调,对AD筛查具有一定的应用价值,有望成为临床辅助诊断AD的潜在生物学标志物。
- 党玉婷徐宇浩徐建慧周亚丽于明
- 关键词:阿尔茨海默病MIR-145胰岛素样生长因子1受体
- 内质网应激介导的凋亡在糖尿病ApoE^(-/-)小鼠内膜钙化中的作用被引量:7
- 2015年
- 目的观察内质网应激(ERS)介导的凋亡在糖尿病动脉粥样硬化(As)性载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠内膜钙化启动中的作用。方法 6周龄雄性Apo E-/-小鼠,给予腹腔注射链脲佐菌素(STZ)40mg/(kg·d),连续5天。2周后血糖水平>3000 mg/L的小鼠纳入本研究,并由普通饮食转为半合成型高脂饮食(HFD),同时给予尾静脉注射羧甲基赖氨酸(CML)10 mg/(kg·d),连续4个月。在转换高脂饮食和给予CML注射后的0个月(0月组,n=10)、2个月(2月组,n=10)和4个月(4月组,n=10)时对小鼠实施安乐死,进行相关检测与分析。结果病理形态学研究证实STZ-CML-HFD联合处理2个月后,糖尿病ApoE^(-/-)小鼠可形成早期的As斑块,4个月后形成典型的晚期As内膜钙化。主动脉壁平滑肌细胞固有表型SM22α逐渐丢失,而成骨表型骨形成蛋白2、核心结合因子α1、碱性磷酸酶的表达与活性则增加。主动脉壁CML沉积信号和糖基化终产物受体(RAGE)表达主要局限于粥样斑块内。Western blot检测显示,随着糖尿病Apo E-/-小鼠病程的延长,主动脉壁CML、RAGE、CD36表达显著上调,而胆固醇外流调控子三磷酸腺苷结合盒转运体A1先出现代偿性增加继而又减少至基线附近。TUNEL染色与Cleaved Caspase-3免疫组织化学染色发现,随着糖尿病As的演进,斑块内细胞凋亡率明显增加。定位分析显示ERS伴侣分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EPB同源蛋白(CHOP)主要分布在As病变区的脂质池内,而且相对于CHOP,4月组GRP78的分布位置似乎更倾向于脂质池的基底部。Western blot半定量分析发现,ERS相关指标GRP78、磷酸化蛋白激酶样内质网激酶、磷酸化eIF2α、活化转录因子4和CHOP的表达随着动物实验时间的延长均呈上调趋势。结论 STZ-CML-HFD联合干预4个月可成功诱导ApoE^(-/-)小鼠形成糖尿病As钙化。CML/RAGE可能首先启动了斑块ERS介导的凋亡,继而诱发了钙化级联信号。
- 戴俏武徐绥宁王中群严金川刘乃丰
- 关键词:糖尿病糖基化终产物APOE-/-小鼠
- 右美托咪定在全麻腹腔镜下胆囊切除术后抑制瑞芬太尼诱发痛觉过敏的半数有效量被引量:1
- 2014年
- 目的 测定右美托咪定抑制瑞芬太尼诱发痛觉过敏的半数有效量(ED5o).方法 择期全麻腹腔镜下行胆囊切除术患者40例,随机分为对照组(C组)及右美托咪定组(D组).D组在麻醉诱导前15 min采用序贯法泵注右美托眯定,初始剂量为0.8 μg/kg,相邻剂量之差为0.1 μg/kg;C组在麻醉诱导前15 min泵注等容积的生理盐水.记录各组气管拔管后30 min的VAS评分及恶心呕吐发生率.采用概率单位法计算右美托咪定抑制瑞芬太尼诱发痛觉过敏的ED50及其95%可信区间.结果 D组的VAS评分及恶心呕吐发生率低于C组(P<0.05).经计算右美托咪定抑制瑞芬太尼诱发痛觉过敏的ED50是0.51 μg/kg,95%可信范围为0.32~0.66 μg/kg.结论 右美托咪定抑制瑞芬太尼诱发痛觉过敏的ED50是0.51 μg/kg.
- 杭黎华束薇薇陈远丰孙文晋施蕾蕾蔡会凤
- 关键词:右美托咪啶痛觉过敏
- 营养风险及发育不良筛查工具在住院新生儿营养风险筛查中的应用被引量:14
- 2016年
- 目的选择合适的营养风险筛查工具对新生儿进行营养风险评估。方法使用营养风险及发育不良筛查工具STRONGkid对98例住院新生儿进行营养风险筛查,并通过Fenton 2013生长曲线图从身长、体质量及头围等方面进行对比监测,评估新生儿的营养状况。结果总的营养风险检出率为67.3%(66/98),早产新生儿营养高风险的发生率较足月新生儿高(P<0.05);总的营养不良检出率为52.0%(51/98),早产新生儿出营养不良的概率高于足月新生儿(P<0.05)。营养风险检出率越高,则营养不良检出率也越高。结论营养风险及发育不良筛查工具STRONGkid的筛查结果可以为早期存在营养不良风险的新生儿进行营养干预提供参考。
- 李衡孙娟王正新祝启花董梅花解红文
- 关键词:营养风险营养不良住院新生儿
- 血浆D-二聚体含量在急性主动脉夹层与非ST段抬高型急性冠脉综合征鉴别中的意义被引量:6
- 2018年
- 目的:探索血浆D-二聚体含量在急性主动脉夹层与非ST段抬高型心肌梗死患者中的差异,及其在二者鉴别中的意义。方法:回顾性分析就诊于我院胸痛中心的53例急性主动脉夹层和104例非ST段抬高型急性冠脉综合征患者,比较两组患者血浆D-二聚体含量,通过ROC曲线分析血浆D-二聚体含量对急性主动脉夹层的鉴别意义。结果:急性主动脉夹层患者血浆D-二聚体含量明显高于非ST段抬高型急性冠脉综合征患者(P<0.05)。ROC曲线分析显示血浆D-二聚体含量在该人群中对主动脉夹层有鉴别意义(P<0.05)。结论:急性主动脉夹层患者血浆D-二聚体含量明显高于非ST段抬高型急性冠脉综合征患者,急诊血浆D-二聚体含量可用于二者的鉴别。
- 郭俊芳张宝伟陈蓉王莹莹王成华陶艾彬鲍中华张国辉尹春阳
- 关键词:急性主动脉夹层非ST段抬高型急性冠脉综合征D-二聚体
- γ-氨基丁酸能神经元条件性敲PGC-1α基因小鼠的制备
- 2017年
- 目的制备在γ-氨基丁酸能神经元条件性敲除过氧化物酶体增殖物激活受体了辅激活因子-1α(peroxisomprolKerator—activate dreceptor-γ coactivator-1,PGC-1γ)基因小鼠。方法从美国Jackson Lab引进SPF级条件性敲除PGC-1α基因的杂合子小鼠PGC—1α^t/+,通过饲养、繁育获得PGC-1α^t/+纯合子小鼠。通过将PGC-1α^t/+小鼠与在γ~氨基丁酸能神经元表达Cre重组酶的Dlx5/6-Cre—IRES-EGFP小鼠进行繁育,获得在γ-氨基丁酸能神经元条件性敲除PGC-1α的基因鼠PGC-1α^t/tDfl5/6-Cre-IRES-EGFP。结果成功制备了在γ-氨基丁酸能神经元条件性敲除PGD1α的基因鼠。结论成功引进PGC-1α^t/+杂合子小鼠,应用合理的基因敲除策略,获得在γ-氨基丁酸能神经元敲除PGC—1α的基因鼠,为神经精神疾病的机制研究提供了一种可信的模型动物。
- 王佳常宪鲁钱进军姜扬王春艳王玉聪冯驰王永洁夏培慧张颖吴丹萍张维宁
- 关键词:小鼠中间神经元
- 黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子基因启动子甲基化特异性PCR法的建立与初步应用被引量:1
- 2009年
- 目的建立甲基化特异性PCR(MSP)技术检测黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GRAF)基因启动子甲基化。方法设计针对GRAF基因启动子的MSP引物,建立MSP检测体系,对不同DNA模板进行检测,评价方法的特异性、重复性和灵敏度;对10例急性髓系白血病(AML)标本进行检测。结果建立的MSP方法仅能扩增出甲基化阳性模板,不能扩增出未甲基化阳性模板和未硫化处理的DNA模板;检测不同稀释度的甲基化阳性模板,其最大灵敏度可达2%;在不同时间进行MSP检测的结果均一致;对10例AML患者的初步检测发现7例存在着GRAF基因启动子甲基化。结论成功建立了检测GRAF基因启动子甲基化的MSP方法,有良好的特异性、灵敏度和重复性,可用于临床AML标本的批量检测。
- 钱震林江钱军姚冬明王雅丽韩兰秀朱照辉肖高飞
- 关键词:甲基化特异性PCR甲基化
- 血清脂肪甘油三酯脂肪酶水平与肥胖和糖尿病的相关性被引量:3
- 2012年
- 目的通过检测肥胖和新诊断2型糖尿病患者的血清脂肪甘油三酯脂肪酶(adiposetfiglycefidelipase,ATGL)水平,探讨ATGL与糖、脂代谢的相关性。方法选取2006年8月至2009年4月在江苏大学附属医院门诊和内分泌科住院患者114例,其中男54例,女60例,年龄38-70岁。分为2型糖尿病患者66例和正常糖调节者48例,再按体质指数(BMI)是否≥25kg/m^2分为4组:2型糖尿病-超重组、正常糖调节-超重组、2型糖尿病.正常体重组和正常糖调节.正常体重组,检测空腹血糖、血脂和空腹胰岛素(FINS)、ATGL水平,并计算BMI、腰臀比、体脂含量和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。分别进行t检验、直线相关分析、多元逐步回归分析。结果(1)血清ATGL水平在2型糖尿病-超重组为(239±61)μg/L,与2型糖尿病-正常体重组[(355±54)μg/L]相比,差异有统计学意义(t=22.53,P〈0.05);而正常糖调节-超重组[(242±60)μg/L]与正常糖调节-正常体重组[(383±58)μg/L]相比,差异也有统计学意义(t=8.23,P〈0.05)。(2)简单相关分析发现,血清ATGL浓度与体脂含量、BMI、腰臀比、甘油三酯、HOMA.IR等呈负相关(r值分别为-0.271、-0.238、-0.375、-O.313、-0.164,均P〈0.05)。多元逐步回归分析发现腰臀比、体脂含量为血清ATGL的独立相关因素。结论肥胖者的血清ATGL水平明显低于正常体重者,ATGL与腰臀比、体脂含量呈独立相关,而与血糖无明显相关。
- 杨玲袁国跃周丽斌王东王兴洲陈军建
- 关键词:糖尿病肥胖脂肪酶